Description
La méthode BCA (acide bicinchoninique) est une méthode largement utilisée pour déterminer la concentration en protéines à l'heure actuelle. Basée sur la réaction du biuret, c'est-à-dire dans un environnement alcalin, la protéine réduit le Cu2+ à Cu+, produisant un complexe bleu violet, qui a une valeur d'absorption élevée à 562 nm. La quantité du produit de réaction est proportionnelle à la concentration en protéines. La méthode de détermination de la concentration en protéines BCA est simple, sensible, rapide et stable. L'étalon protéique fourni dans le kit permet aux utilisateurs de réaliser facilement des courbes d'étalonnage.
Le kit de détermination de la concentration en protéines BCA peut être utilisé pour le dosage colorimétrique et le dosage sur microplaque. Le premier nécessite une grande quantité (100 μL) d'échantillon de protéines. Le rapport entre l'échantillon de protéines et la solution de travail BCA est de 1:20 (v/v), ce qui réduit l'impact des substances interférentes. Le second est simple et pratique à utiliser, ne nécessitant qu'une petite quantité (10-25 μL) d'échantillon de protéines. Cependant, comme le rapport entre l'échantillon de protéines et la solution de travail BCA est de 1:8 (v/v), la concentration de tolérance des substances interférentes est limitée dans une certaine mesure et le niveau de détection minimum est réduit. Notre société propose trois tailles de kits de détection de concentration en protéines BCA, la méthode colorimétrique peut être utilisée respectivement 50 fois, 250 fois et 500 fois. La méthode de marquage enzymatique peut être utilisée respectivement 500 fois, 2500 fois et 5000 fois.
Caractéristiques
- Haute sensibilité, avec une concentration minimale de protéine détectée de 0,2 μg. La limite inférieure de concentration de détection atteint 10 μg/mL.
- Il est plus rapide et prend moins de temps à développer la couleur que le kit général de détermination de la concentration en protéines BCA. Il est environ 4 fois plus rapide que la méthode Lowry traditionnelle.
- Large plage linéaire, il existe une bonne plage linéaire dans la plage de concentration de 20 à 2 000 μg/mL.
- Il n’est pas affecté par les produits chimiques présents dans la plupart des échantillons.
Application
- Quantification des protéines
Caractéristiques
| Essai | BCA Essai |
| Type de produit | Dosage de la quantification des protéines |
| À utiliser avec (application) | Détection basée sur la solution, absorbance |
| À utiliser avec (équipement) | Spectrophotomètre, lecteur de microplaques |
| Spécificité | Pas de cible spécifique |
Composants
| Composants N° | Nom | 20201ES76 (500 T) | 20201ES86 (2500 T) | 20201ES90 (5000 T) |
| 20201-A | Réactif BCA A | 100 ml | 500 ml | 2×500 mL |
| 20201-B | Réactif BCA B | 3 ml | 15 ml | 2×15 mL |
| 20201-C | Norme protéique (BSA) | 5×1 mL (2 mg/ml) | 10×1 mL (2 mg/ml) | 10×2 mL (2 mg/ml) |
Stockage
Les réactifs A et B du kit doivent être conservés à température ambiante ou entre 2 et 8 °C. L'étalon protéique (BSA) peut être conservé à -25 et -15 °C pendant 12 mois s'il n'est pas utilisé pendant une longue période.
Chiffres
Figure 1.Bonne gamme linéaire, le R2 les valeurs des courbes standard parmi les différents lots étaient toutes supérieures à 0,995.
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