Description
La protéase recombinante TEV (rTEV Protease) est une protéase recombinante modifiée et purifiée par génie génétique, qui non seulement maintient l'activité fonctionnelle de la protéase TEV naturelle, mais présente également une stabilité et une spécificité plus fortes sur une large plage de températures. La rTEV Protease est une enzyme couramment utilisée pour couper les étiquettes d'affinité sur les protéines de fusion. Elle est spécifique à la séquence de sept acides aminés EXXYXQ↓(G/S), et le site de coupure se situe entre la glutamine et la glycine/sérine. La séquence de sept acides aminés couramment utilisée est Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly. La protéase rTEV est active de manière optimale à pH 7,0, 30°C, mais est actif sur une large gamme de pH de 6,0 à 8,5 et de températures de 4 à 30°C (voir tableau 1), ce qui permet de choisir les conditions de réaction de manière flexible en fonction de la protéine cible. De plus, le 6×Son étiquette N-terminale peut également être utilisée pour éliminer la protéase rTEV par la résine Ni-NTA afin de purifier la protéine cible.
Le produit a été optimisé sur la base du 20403ES et, comparé au 20403ES, il présente une pureté plus élevée, une activité plus forte et une teneur en oxygène plus faible. E.coli Résidu d'ADNg, qui convient aux applications avec des exigences plus élevées en matière de pureté, d'activité et de résidus enzymatiques.
Caractéristiques
Efficacité de clivage élevée:L'étiquette protéique est retirée plus complètement.
Faible teneur résiduelle en ADNg de l'hôte:Réduire efficacement le risque d’introduction de résidus de substances exogènes.
Applications
Suppression des étiquettes de fusion
Caractéristiques
| Définition de l'unité | La quantité d'enzyme nécessaire pour couper >85 % des 3 μg de substrat dans un 1×Tampon rTEV (50 mM Tris, pH 8,0, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT) à 30ouC pendant 1 h a été défini comme une unité d'activité |
| Pureté des protéines | ≥95% |
| Source | Exprimé en Escherichia coli |
Composants
| Composants N° | Nom | 20427ES80 | 20427ES10 | 20427ES50 |
| 20427-UN | Protéase rTEV (5 U/μL) | 200 μL | 2×1 mL | 10 ml |
| 20427-B | Tampon rTEV (10×) | 600 μL | 6 ml | 30 ml |
Expédition et stockage
Protéase rTEV, stockée à -25~-15ouC pendant 6 mois ; conserver à -85~-65ouC depuis 1 an.
Tampon rTEV, stocké à -25~-15ouC depuis 1 an.
Remarque : Il est recommandé de stocker chaque composant séparément lors de la réception de la marchandise ou de sa première utilisation afin d'éviter les gels et décongélations répétés.
Chiffres
Chiffre 1. Vérification de l'activité de clivage de UCF.MEMT Protéase rTEV
Remarque : Utilisation d’une protéine de fusion (3 μg) ccontenant l'UCF.MEMT Site de clivage de la protéase rTEV comme substrat, UCF.MEMT La protéase rTEV a été ajoutée à 10, 5 et 3 U, respectivement. La réaction a été réalisée à 30 ouC pendant 1 heure, et l'effet de clivage a été détecté par électrophorèse sur gel d'agarose. Les résultats ont montré que lorsque la quantité d'UCF.MEMT La protéase rTEV était supérieure à 3 U, elle pouvait cliver le substrat efficacement avec une efficacité de clivage de > 90 %.
Documents:
Fiche de données de sécurité
20427_FDS_Version EN20250120.pdf
Manuels
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