UltraNuclease, également connue sous le nom d'endonucléase non restrictive, nucléase à large spectre, est une endonucléase non spécifique dérivée de Serratia Marcescen, qui hydrolyse les liaisons phosphodiester internes entre tous les nucléotides des acides nucléiques pour produire des oligonucléotides 5'-monophosphate de 2 à 5 bases de longueur. Elle peut dégrader l'ADN et l'ARN sous diverses formes (double brin, simple brin, linéaire, circulaire, natif ou dénaturé) dans une très large gamme de conditions (6 M d'urée, 0,1 M de guanidine HCl, 0,4 % de Triton X-100, 0,1 % de SDS, 1 mM d'EDTA, 1 mM de PMSF) et est largement utilisée pour éliminer les acides nucléiques des produits biologiques. UltraNuclease peut également être éliminée ultérieurement par des méthodes correspondantes.

Ce kit utilise le principe du test immuno-enzymatique sandwich à double anticorps (ELISA sandwich) pour détecter les résidus d'UltraNuclease dénaturé et non dénaturé. Tout d'abord, recouvrez la microplaque d'un anticorps polyclonal de lapin anti-UltraNuclease pour former un anticorps en phase solide. Ensuite, ajoutez l'étalon UltraNuclease et l'échantillon de test à la microplaque d'anticorps en phase solide, puis ajoutez l'anticorps polyclonal anti-UltraNuclease marqué à la biotine, et enfin, ajoutez la streptavidine marquée à la peroxydase de raifort (SA-HRP) pour former un complexe anticorps + antigène + anticorps-biotine + SA-HRP. Par la suite, le substrat TMB a été ajouté au complexe pour observer la réaction de couleur après le lavage du complexe. Le TMB est converti en bleu sous la catalyse de l'enzyme HRP et finalement converti en jaune en présence d'acide, et la nuance de couleur est positivement corrélée à la quantité d'UltraNuclease dans l'échantillon.

La plage de quantification de détection de ce kit est de 0,047 à 3 ng/mL ; la limite de détection inférieure est de 23,5 pg/mL.

Fonctionnalité

• Hautement sensible : Détection de seulement 23 pg/ml de résidus d'UltraNuclease dans les échantillons biologiques en cours de traitement et finaux.
• Assure la précision : les résidus d'UltraNuclease peuvent être détectés avec précision avec une récupération de 80 à 110 %.
• Spécificité : Coopérer avec YEASEN UltraNuclease et peut détecter avec précision les résidus.
• Stable : La différence entre les lots est faible, les propriétés du kit ne sont pas affectées sous 37℃ pendant 6 jours.
• Collecte de signal facile : grâce au système Biotine-Streptavidine, le signal peut être agrandi de manière stable.
• Kit complet : tous les composants clés sont fournis dans le kit, il est rentable à utiliser.

Application

• Test d'UltraNuclease résiduelle dans les produits biologiques

Spécification

Composants

Expédition et stockage

Le kit ELISA UltraNuclease est livré avec un pack de glace et peut être conservé entre 2°C et 8°C. Le produit non ouvert est valable un an. Une fois le réactif ouvert, il est valable six mois. Ne jamais congeler ce produit.

Stockage des réactifs préparés :

1. Le tampon de lavage dilué et le tampon de dilution peuvent être conservés à 2°C ~ 8°C pendant 1 semaine

2. La norme 36701-C est liquide et stockée à 2°C ~ 8°C pendant 1 an

3. L'anticorps de détection préparé et le tampon d'arrêt peuvent être conservés à 2°C ~ 8°C pendant 1 mois

Chiffres

• Démonstration de spécificité

Figures 1. La spécificité du kit ELISA UltraNuclease a été démontrée dans la figure ci-dessus.

8 échantillons mimétiques ont été estimés pour la réaction non spécifique avec les anticorps du kit. Il n'y avait aucune différence significative entre les 8 échantillons et l'échantillon négatif. （* : Différence significative par rapport à l'échantillon négatif ; NS : Aucune différence significative par rapport à l'échantillon négatif）

• Affichage de précision

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Figures 2. La précision de l'ELISA UCF.ME™ UltraNuclease a été testée comme ci-dessus schème.

6 dupliqués ont été testés à chaque concentration sur la courbe standard, et tous les CV% étaient inférieurs à 5 % (Figure 2A). 3 analystes ont mené l'expérience UCF.ME™ UltraNuclease ELISA et les CV% étaient inférieurs à 15 % (Figure 2B).

• Validation de la précision

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Figures 3. La précision de UCF.ME™ L'ELISA UltraNuclease a été testé selon le schéma suivant.

L'UltraNuclease a été ajouté à des solutions de lyse cellulaire de 5 μg/mL (HEK293, E.coli, CHO et Vero) indépendamment avec une concentration finale ajoutée de 1,5 ng/mL. La précision dans différents échantillons de cellules s'est avérée excellente par rapport aux autres fournisseurs (Figure 3A). L'UltraNuclease a été ajouté à un échantillon réel (fourni par le client) et est dilué en série 2 fois de 3 ng/mL à 0,093 ng/mL. La récupération de la dose était comprise entre 80 % et 110 % (Figure 3B).