Description
Voici la traduction anglaise du texte :
Pyrophosphatase inorganique (PPase) catalyse la conversion d'une molécule de pyrophosphate en deux molécules d'ions phosphate. Dans les expériences d'amplification d'acides nucléiques, la PPase peut hydrolyser le pyrophosphate inorganique généré au cours de la réaction. Il s'agit d'une réaction hautement exergonique qui peut déplacer l'équilibre de la réaction vers le côté produit, empêchant ainsi l'inhibition du système réactionnel.
Dans le processus de production de produits vaccinaux à ARNm, l'ajout de PPase peut améliorer le rendement en ARNm. Cependant, pour les produits dont l'ARNm est le produit final, la PPase ajoutée est une substance exogène qui doit être éliminée pendant le processus de purification. Par conséquent, il est nécessaire de détecter la quantité résiduelle de PPase pour évaluer l'efficacité du processus de purification dans l'élimination des résidus de protéines et pour confirmer si la PPase résiduelle dans le produit vaccinal à ARNm a été purifiée à un niveau acceptable.
Ce kit utilise le principe d'un test immuno-enzymatique en sandwich à double anticorps (ELISA) pour détecter les résidus de PPase. Les échantillons standard et de test de PPase sont ajoutés à une plaque enzymatique pré-revêtue d'anticorps anti-PPase (36706-A), suivis de l'ajout d'un anticorps de détection marqué à la biotine dilué (36706-C), et enfin de streptavidine-HRP (SA-HRP) (36706-D). Cela forme le complexe anticorps+antigène+anticorps-biotine+SA-HRP. Après lavage, une solution de substrat TMB (36706-H) est ajoutée pour développer la couleur.
Sous la catalyse de l'enzyme HRP, le TMB passe de l'incolore au bleu et, sous l'action de la solution d'arrêt (36706-1), devient finalement jaune. L'intensité de la couleur jaune est positivement corrélée à la quantité de PPase détectée dans l'échantillon.
Composants
Non. | Nom | 36706ES48 | 36706ES96 |
36706-A | Microtitration avec revêtement anti-PPase bandes | 48T | 96T |
36706-B* | Norme : PPase | 1 ampoule | 2×1 flacon |
36706-C | Anticorps de détection : anticorps conjugué à la biotineodies | 60 μL | 120 μL |
36706-D | Streptavidine-HRP | 30 μL | 60 μL |
36706-F | Dilution Tampon 1 | 25 ml | 45 ml |
36706-F | Laver Tampon Concentré (20×) | 25 ml | 50 ml |
36706-G | Dilution Tampon 2 | 15 ml | 30 mL |
36706-H | Substrat TMB | 8 ml | 15 ml |
36706-1 | Arrêter la solution | 5 ml | 10 ml |
36706-J | Scellant à plaques | 3 chacun | 5 chacun |
*La norme 36706-B est une poudre lyophilisée.
Expédition et stockage
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