Description
Lorsque les cellules subissent une apoptose, elles activent des enzymes endonucléases qui coupent l’ADN génomique entre les nucléosomes. Une échelle d'ADN de 180 à 200 pb peut être détectée par électrophorèse après extraction de l'ADN pendant l'apoptose.
Le kit d'analyse d'apoptose cellulaire TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) (FITC) peut être utilisé pour détecter la rupture de l'ADN nucléaire dans les cellules tissulaires au cours du stade apoptotique tardif. Le principe est que FITC-12-dUTP est inséré dans le terminal 3'-hydroxyle (3'-OH) de l'ADN génomique exposé lors de la rupture de l'ADN sous l'action de la Terminal Deoxynucleotidyl Transférase (TdT). Cela peut être détecté par microscopie à fluorescence ou cytométrie de flux.
Ce kit optimise la réaction de marquage en utilisant FITC-12-dUTP et dNTP non marqué au rapport optimal pour l'incorporation de nucléotides en 3' -OH terminal, ce qui entraîne une « queue d'étiquetage » plus longue à l'extrémité du même fragment d'ADN cassé. La « queue d’étiquetage » réduit l'encombrement stérique des groupes marqués sur les dNTP adjacents, augmente le nombre de groupes fluorescents sur chaque fragment cassé et réduit l'agrégation et l'extinction qui peuvent être causées par les groupes fluorescents adjacents, améliorant ainsi la sensibilité de détection et réduisant les réactions non spécifiques.
Ce kit a une large gamme d'applications. Il peut être utilisé pour détecter l'apoptose dans des coupes congelées ou en paraffine, ainsi que dans des cellules adhérentes en culture ou en suspension.
Caractéristiques
- Les réactifs de ce kit sont fournis sous forme liquide pour une utilisation facile.
- Le kit peut être utilisé à diverses fins : cytométrie de flux, microscopie à fluorescence pour la détection.
- Au microscope à fluorescence, la distinction des couleurs est évidente.
Applications
- Ce kit peut être utilisé pour la cytométrie de flux et la microscopie à fluorescence.
- Ce kit permet de détecter l’apoptose précoce des cellules.
- Ce kit permet de distinguer les cellules apoptotiques tardives et les cellules nécrotiques.
Caractéristiques
| Application | L'application vérifiée du kit était de détecter des cellules apoptotiques par cytométrie de flux ou cytologie par immunofluorescence. |
| Forme d'emballage | Bouteille |
Composants
| Composant | Nom | 40306ES20 (20T) | 40306ES50 (50T) | 40306ES60 (100T) |
| 40306-A | Tampon d'équilibrage 5× | 750 μL | 1,25 mL×2 | 1,25 mL×3 |
| 40306-B | Mélange de marquage FITC-12-dUTP | 100 μL | 250 μL | 250 μL×2 |
| 40306-C | Enzyme TdT recombinante | 20 μL | 50 μL | 50 μL×2 |
| 40306-D | Protéinase K (2 mg/mL) | 40 μL | 100 μL | 100 μL×2 |
| 40306-F | DNase I (1 U/μL) | 5 μL | 12,5 μL | 25 μL |
| 40306-F | Tampon DNase I 10 × | 100 μL | 250 μL | 500 μL |
Expédition et stockage
Le produit est expédié avec de la glace sèche et peut être stocké à -15℃ ~ -25℃ pour 1 année.
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