Description
Le kit de détection de mycoplasmes GMyc-PCR utilise principalement la méthode PCR pour détecter l'infection par Mycoplasma de divers matériaux biologiques (tels que la culture cellulaire, les sécrétions animales expérimentales, le sérum animal, etc.). Il combine plusieurs avantages : sensible, spécifique, rapide et peut être détecté directement avec les surnageants de culture cellulaire. Ce produit détecte les mycoplasmes dans les matériaux biologiques tels que les cellules cultivées par la méthode PCR. Les amorces utilisées sont conçues en fonction de la région conservée de la séquence d'ARNr 16S-23S du mycoplasme et amplifient uniquement l'ADN du mycoplasme de manière spécifique, avec une sensibilité et une spécificité de détection élevées. L'amplification par PCR et l'analyse par électrophorèse ne prennent que quelques heures et l'opération est pratique et simple.
La culture cellulaire est une expérience courante dans la recherche en sciences de la vie. Contrairement à d'autres méthodes expérimentales couramment utilisées, la culture cellulaire est un processus dynamique continu, et les cellules réagissent souvent aux erreurs de manipulation ou aux contaminants qui présentent souvent des états cellulaires ou une apparence de milieu anormaux. Si elle est contaminée par des mycoplasmes, la morphologie cellulaire ne présente aucun changement évident et elle est facile à négliger. On ne la découvre souvent que lorsque la pollution est très grave. Il peut y avoir des centaines de mycoplasmes sur la membrane cellulaire contaminée, ces mycoplasmes rivalisent pour les nutriments et libèrent des métabolites toxiques, affectant gravement les résultats expérimentaux.
Des études ont montré qu'au moins 20 types de mycoplasmes peuvent contaminer les cellules, parmi lesquels les plus courants sont : Mycoplasma oral (M. orale), Mycoplasma arginine (M. arginini), Mycoplasma hyorhinis (M. hyorhinis), Mycoplasma fermentum (M. fermentans), Mycoplasma hominis (M. hominis), Mycoplasma salivarius (M. salivarium), Mycoplasma pulmonaire (M.pulmonis) et Mycoplasma poirier (M. pirum). Le taux de contamination des cellules cultivées par les mycoplasmes varie de 4 % à 92 %. Les sources de contamination comprennent l'environnement de travail, l'opérateur lui-même (certains mycoplasmes font partie de la flore normale du corps humain), le milieu de culture, le sérum, la contamination croisée des cellules, le matériel expérimental et la contamination utilisée du tissu ou de l'organe d'origine à partir duquel les cellules ont été préparées.
L'identification de la cause sous-jacente des problèmes lors de la culture cellulaire est une tâche difficile et longue, où tout changement soudain doit être suspecté, et de bonnes pratiques de test et des tests réguliers de contamination par les mycoplasmes sont nécessaires. Il existe de nombreuses méthodes pour détecter les mycoplasmes, telles que la culture directe, la coloration par fluorescence de l'ADN, les méthodes ELISA et PCR.
Fonctionnalité
- Les amorces utilisées ont été conçues en fonction de la région conservée de la séquence d'ARNr 16S-23S de Mycoplasma
- Seul l'ADN mycoplasmique amplifié spécifiquement
- Excellente sensibilité et spécificité
- Plus de 20 espèces de mycoplasmes ont pu être détectées
Application
- Détection de mycoplasmes
Composants
| Composants N° | Nom | 40601ES10 (10 essais) | 40601ES20 (20 essais) |
| 40601-A | Mélange GMyc-1er PCR | 250 µL | 2×250 µL |
| 40601-B | Mélange GMyc-2e PCR | 250 µL | 2×250 µL |
| 40601-C | Modèle de contrôle positif N | 20 µL | 20 µL |
[Remarques] 1. Lorsqu'il n'est pas utilisé pendant une longue période, il peut être conservé congelé à -85~-65℃.
2. La réaction PCR est extrêmement sensible.Afin d'éviter les faux positifs, un contrôle positif est ajouté à la fin lors de l'ajout d'échantillons.
Stockage
Ce produit peut être conservé à -25~-15℃ pendant 18 mois. S'il n'est pas utilisé pendant une longue période, veuillez le conserver à l'abri de la lumière.
Chiffres
Figure 1. Résultat de l'électrophorèse du kit de test PCR Mycoplama.
Le premier électrophorétogramme rond est présenté dans la Figure 1A et le deuxième électrophorétogramme rond est présenté dans la Figure 1B. (M : marqueur 1 kb, 1-2 : témoins positifs, 3 : témoin négatif)
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