La phalloïdine est une toxine heptapeptide cyclique dérivée de l'amanite phalloïde (Amanita phalloides). Elle se lie à l'actine filamenteuse (F-actine) avec une forte affinité (Kd = 20 nM) et ne se lie pas à l'actine globulaire (G-actine). Elle est couramment utilisée pour marquer la F-actine dans les coupes de tissus, les cultures cellulaires ou les systèmes acellulaires à des fins d'analyses qualitatives et quantitatives. Les dérivés de la phalloïdine se lient également aux filaments d'actine d'origine animale et végétale, y compris les cellules musculaires et non musculaires, selon un rapport stœchiométrique d'environ une molécule de phalloïdine par sous-unité d'actine. La liaison non spécifique est négligeable, ce qui permet une distinction claire entre les régions colorées et non colorées. Par conséquent, les dérivés de la phalloïdine sont particulièrement adaptés comme substitut aux anticorps anti-actine dans les recherches connexes. De plus, les dérivés de la phalloïdine sont de petite taille, avec un diamètre d'environ 12 à 15 Å et un poids moléculaire inférieur à 2 000 Daltons. De nombreuses propriétés physiologiques de l'actine sont conservées, telles que la capacité d'interagir avec les protéines de liaison à l'actine comme la myosine, la tropomyosine et la DNase I. Les filaments marqués à la phalloïdine peuvent toujours pénétrer les matrices de myosine solides et les fibres musculaires extraites au glycérol peuvent se contracter après le marquage.

La liaison de la phalloïdine inhibe la dépolymérisation de l'actine filamenteuse (microfilaments), stabilisant ainsi sa structure et perturbant l'équilibre dynamique de polymérisation et de dépolymérisation. Cette propriété réduit la concentration critique (CC) pour la polymérisation de l'actine à moins de 1 µg/mL, ce qui en fait un puissant promoteur de polymérisation. De plus, la phalloïdine inhibe l'activité d'hydrolyse de l'ATP de l'actine F.

Caractéristiques

Se lie sélectivement à l'actine filamenteuse (F-actine).

La phalloïdine n’est pas spécifique à l’espèce et ne présente pratiquement aucune coloration non spécifique, offrant un contraste extrêmement clair entre les régions colorées et non colorées.

Il est hautement compatible et n’affecte pas l’activité de l’actine.

Applications

La liaison étroite et sélective à la F-actine révèle la distribution du cytosquelette microfilamentaire au sein de la cellule.

Caractéristiques

Composants

Expédition et stockage

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Documents:

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Manuels

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