Hieff Trans™ Réactif de transfection liposomale FAQ

(1) Q : Le sérum peut-il être présent lors de la préparation d’un complexe réactif de transfection d’acide nucléique ?

R : La présence de sérum affecte la formation des liposomes. Il est recommandé d'utiliser un milieu sans sérum (généralement un milieu MEM) lors de la préparation de complexes réactifs de transfection d'acides nucléiques.

(2) Q : Le réactif de transfection peut-il être congelé ?

R : Non. Ce réactif doit être conservé entre 2 et 8 ℃ et des précautions doivent être prises pour éviter d'ouvrir le bouchon à plusieurs reprises pendant une longue période, car une ouverture prolongée du bouchon provoquera l'oxydation des liposomes et affectera l'efficacité de la transfection.

(3) Q : À quoi dois-je faire attention lorsque j'utilise le réactif de transfection d'acide nucléique liposomal Hieff Trans™ ?

A : 1) Pendant l'opération de transfection, il est préférable que la confluence cellulaire atteigne 80 à 95 %, et la densité de placage spécifique est déterminée en fonction de la situation des cellules ;

2) L’utilisation d’ADN de haute pureté permet d’obtenir une efficacité de transfection plus élevée ;

3) L’ADN et les réactifs de transfection doivent être dilués avec un milieu sans sérum lors de la préparation des complexes de transfection ;

4) Les antibiotiques ne peuvent pas être ajoutés au milieu pendant la transfection ;

5) La concentration d'ADN et la quantité de réactif liposomal cationique doivent être optimisées lors de la première utilisation afin d'obtenir une efficacité de transfection maximale. Le rapport ADN/réactif de transfection est il est généralement recommandé d'être dans un rapport de 1:2 à 1:3.

(4) Q : Est-il nécessaire de l’arrêter après la transfection ?

R : Pas besoin. Les complexes liposomiques sont stables pendant 6 heures. Si le milieu cellulaire n'est pas changé avant la transfection, afin de garantir les nutriments nécessaires à la croissance cellulaire normale, il est nécessaire de changer de milieu après 4 à 6 heures. Cependant, si le milieu a été changé avant la transfection, il n'est pas nécessaire de changer de milieu après la transfection des liposomes.

(5) Q : À quoi dois-je faire attention si je souhaite améliorer l’efficacité de la transfection ?

A : a : La densité des cellules au moment de la transfection est de 90 à 95 %.

b : Pendant la transfection, utilisez un milieu MEM sans sérum pour les dilutions d'acides nucléiques et de liposomes.

c : Le milieu peut être changé 4 à 6 heures après la transfection.

(6) Q : Peut-on réaliser une co-transfection d'ADN et d'ARNsi ? Quel est l'effet ?

R : Il est possible de réaliser une co-transfection, mais il est recommandé de réaliser une transfection séparée, et la transfection de l'ADN doit être réalisée 6 heures après l'ARNsi. Si elles sont réalisées ensemble, l'efficacité de la transfection de l'ARNsi sera moins bonne.

(7) Q : Le réactif de transfection peut-il être utilisé pour la transfection par emballage lentiviral ?

R : L'emballage lentiviral est possible, mais l'efficacité de l'emballage lentiviral n'est pas nécessairement liée à l'efficacité de la transfection, mais également à la sélection des plasmides d'emballage et au rapport entre les plasmides.

(8) Q : Le réactif de transfection d’acide nucléique liposomal Hieff Trans™ peut-il être utilisé pour la transfection de cellules en suspension ?

R : Le réactif de transfection d'acide nucléique liposomal Hieff Trans™ peut être utilisé pour la transfection de cellules en suspension, voir le protocole pour plus de détails. De plus, nous avons également lancé un réactif de transfection spécifiquement destiné aux cellules en suspension (réf. cat. 40805, réactif de transfection d'acide nucléique liposomal pour cellules en suspension).

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