Description
Le réactif de transfection in vitro siRNA/miRNA Hieff Trans™ est un réactif de transfection cationique et amphiphile PEI développé pour la transfection de siRNA dans des cellules de mammifères. Convient à la transfection de siRNA et de miRNA. Ce réactif de transfection encapsule le siRNA ou le miRNA pour former un complexe cationique, qui interagit avec les protéoglycanes chargés négativement à la surface cellulaire et s'adsorbe à la surface cellulaire, pénètre dans la cellule par endocytose et forme un corps d'inclusion. Le réactif de transfection agit comme une éponge à protons, qui peut absorber H+ dans le lysosome, et l'afflux continu de protons provoque le gonflement et la rupture du complexe, libérant ainsi l'ARNsi ou l'ARNmi exogène dans le cytoplasme.
Ce produit peut atteindre une efficacité d'expression de plus de 90 % de 1 nM d'ARNsi dans une large gamme de lignées cellulaires, évitant ainsi les effets hors cible. Il convient à la transfection d'une variété de cellules, notamment Hela, MCF-7, HepG2, CHO et d'autres cellules adhérentes ; et les lignées cellulaires en suspension difficiles à transfecter, telles que les cellules K562 ou THP-1, peuvent atteindre une efficacité de silençage de 80 % ; y compris certaines cellules primaires, les fibroblastes humains primaires et les hépatocytes humains primaires, etc., une efficacité de silençage de 80 % peut être atteinte.
Fonctionnalité
- Faible toxicité : les cellules transfectées conservent toujours une bonne activité.
- Grande adaptabilité : les cellules ordinaires et les cellules primaires difficiles à transfecter sont entièrement couvertes.
Application
- Transfection cellulaire
Spécification
| Propriétés physiques et chimiques | Information |
| Formulaire | Liquide |
| Compatible avec le sérum | Oui |
| Type de cellule | Lignées cellulaires établies |
| Type d'échantillon | siRNA/miRNA |
| Technique de transfection | Transfection basée sur le PEI |
Composants
| Composants N° | Nom | 40806ES01 | 40821ES02 | 40821ES03 |
| 40806 | Hieff Trans™ in vitro Réactif de transfection siRNA/miRNA | 0,1 mL | 0,5 mL | 1 ml |
Stockage
Le produit doit être conservé à 2-8ºC pendant un an. Ne pas congeler !
Chiffres
- Démonstration de l'effet de transfection
Figure 1. L'efficacité de transfection du réactif de transfection siRNA/miRNA in vitro Hieff Trans™ a été démontrée ci-dessus.
(1) Q : Quelle est la différence entre la transfection d’ADN et la transfection d’ARNsi ?
R : 1. Puisqu’il n’y a que 20 paires de bases, l’ARNsi est beaucoup plus petit que l’ADN avec des milliers, voire plus de 10 000 paires de bases.
2. Les réactifs et méthodes de transfection utilisés pour transfecter l’ADN ne conviennent pas à la transfection de l’ARNsi.
3. La transfection d'ARNsi a des exigences plus strictes en matière de cytotoxicité des réactifs de transfection que la transfection d'ADN.
(2) Q : Le réactif de transfection doit-il être changé après la transfection ?
A : Pour le changement de support, on peut distinguer deux situations :
1. S’il n’y a pas de changement de milieu avant la transfection, le milieu doit être changé environ 6 heures après la transfection pour garantir les nutriments nécessaires à la croissance cellulaire ;
2. S'il y a un changement avant la transfection Le milieu peut être changé comme d'habitude lorsque le milieu est déficient en nutriments.
(3) Q : Quelle est l'efficacité du réactif de transfection PEI pour la transfection de l'ARNsi et du plasmide ?
R : Ce réactif de transfection PEI est spécialement développé pour l’ARNsi et la transfection plasmidique n’est pas recommandée.
(4) Q : Le réactif de transfection peut-il être congelé ?
R : Ne pas congeler, car le réactif de transfection est un réactif de transfection cationique PEI. La congélation à basse température détruira l'activité du réactif de transfection PEI. Par conséquent, il est préférable de le conserver à 4 degrés pour maintenir la meilleure efficacité de transfection.
(5) Q : Comment améliorer l’efficacité de la transfection ?
A : a : Densité des cellules au moment de la transfection, 30%-50%.
b : Le milieu sans sérum Opti-MEM doit être utilisé pour la dilution de l'ARNsi et des liposomes pendant la transfection.
c : Le milieu peut être changé 4 à 6 heures après la transfection.
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