La D-luciférine est un substrat courant de l'enzyme luciférase et est couramment utilisée dans toute la biotechnologie, en particulier dans l'imagerie in vivo. Le mécanisme d'action est que la luciférine (le substrat) peut être oxydée pour émettre de la lumière en présence d'ATP et de luciférase. Lorsqu'il y a un excès de luciférine, le nombre de quanta de lumière produits est corrélé positivement à la concentration de luciférase (voir la figure ci-dessous). Après avoir transfecté des cellules avec un plasmide portant le gène codant la luciférase (Luc) et l'avoir introduit dans des animaux de recherche tels que des souris et des rats, la luciférine est injectée dans les cellules et les changements d'intensité lumineuse sont détectés par BLI, permettant une surveillance en temps réel de l'état de progression de la maladie ou de l'efficacité thérapeutique d'un médicament, par exemple. L'effet de l'ATP sur ce système réactionnel peut également être utilisé pour indiquer l'énergie ou les signes vitaux en fonction des changements d'intensité de la bioluminescence.

La D-Luciférine est également couramment utilisée dans les études in vitro, notamment l'analyse du niveau de luciférase et d'ATP, l'analyse des gènes rapporteurs, le séquençage à haut débit et divers tests de contamination. Il existe actuellement trois formes de produits sur le marché, la D-Luciférine (acide libre), le sel de sodium de D-Luciférine et le sel de potassium de D-Luciférine. La principale différence entre ces trois produits réside dans leurs caractéristiques de solubilité ; la D-Luciférine (acide libre) est faiblement soluble dans l'eau et dans les systèmes tampons, à moins qu'elle ne soit soluble dans des bases faibles telles que les solutions de NaOH et de KOH. La D-Luciférine sous forme de sels de sodium et de potassium se dissout très facilement et rapidement dans l'eau ou les tampons, est facile à utiliser et les solvants sont non toxiques, ce qui la rend particulièrement adaptée aux expériences in vivo. Lorsqu'ils sont formulés sous forme liquide, il n'y a pas de différence substantielle entre les trois produits pour la plupart des applications.

Caractéristiques

• Pas de radiation, presque inoffensif pour les organismes vivants.
• Bioluminescence, sans source lumineuse d'excitation.
• Tellement sensible qu’on peut le détecter dans quelques centaines de cellules.
• Bonne pénétration, une profondeur de tissu de 3 à 4 cm peut encore être détectée.
• Rapport signal/bruit élevé, signal de fluorescence puissant et bonne anti-interférence.

Applications

• Dans l'expérience de tumorigenèse chez la souris nude, la croissance tumorale a été observée sans invasion en temps réel, sans mesure de stripping tumoral.
• Pour tester l’effet de l’administration sur la croissance tumorale ou les métastases, le substrat de fluorescéine peut être complètement éliminé en 3 heures, sans interférence avec l’expérience du médicament.
• La localisation et la distribution de cellules étrangères chez les animaux ont été détectées.
• Le gène cible ou le promoteur du gène cible est fusionné au gène de la luciférase pour détecter les changements dans l'expression génique pendant le traitement médicamenteux ou la progression de la maladie.
• Suivi de la transplantation, de la survie et de la prolifération des cellules souches ; Suivi de la distribution et de la migration des cellules souches in vivo.

Caractéristiques

Composants

Expédition et stockage

Transporté dans des packs de glace ; conservé à -20°C au sec et à l'abri de la lumière ; valable pour 1 année.

Chiffres

Documents:

Fiche de données de sécurité

Manuels

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