दवा के विकास के लिए प्रभावकारिता का परीक्षण करने के लिए पशु मॉडल की आवश्यकता होती है। 50 से अधिक वर्षों के विकास और अनुकूलन के साथ, विभिन्न पशु मॉडलों में से डेक्सट्रान सल्फेट सोडियम साल्ट (DSS) अल्सरेटिव कोलाइटिस (UC) मॉडल का व्यापक रूप से सूजन आंत्र रोग (IBD) के एटियलजि और रोगजनन का अध्ययन करने के लिए उपयोग किया जाता है।
चित्र 1. डीएसएस अल्सरेटिव कोलाइटिस मॉडल का विकास
1. यूसी मॉडल की विशेषताएं द्वारा निर्मित डीएसएस
2. डीएसएस यूसी मॉडल के लाभ
3. डीएसएस यूसी मॉडल निर्माण उदाहरण
4. मॉडलिंग सफलता मूल्यांकन मानदंड
5. इस संसाधन के लिए लिंक
6. येसेन डीएसएस के साथ मॉडलिंग का सफल मामला
7. पूछे जाने वाले प्रश्न
8. उत्पाद ऑर्डर
9. हमारे अभिकर्मकों के साथ प्रकाशित लेख
10. पढ़ने के संबंध में
1. यूसी मॉडल की विशेषताएं द्वारा निर्मित डीएसएस
यूसी के कई तीव्र या दीर्घकालिक लक्षण उत्पन्न हो सकते हैं, जैसे विभिन्न डीएसएस खुराकों द्वारा दस्त, बलगम जैसा मल, मल में गुप्त रक्त, मल में अत्यधिक रक्त, वजन घटना, क्रियाशीलता में कमी, तथा बालों का रंग खराब होना।
तालिका 1 डीएसएस कोलाइटिस मॉडल की ऊतकवैज्ञानिक विशेषताएं
| डीएसएस कोलाइटिस मॉडल श्रेणी | तीव्र कोलाइटिस मॉडल | क्रोनिक फेज़ कोलाइटिस मॉडल |
|---|---|---|
| ऊतकवैज्ञानिक परिवर्तन | बृहदान्त्र हाइपरमिया, शोफ, छोटा होना, भंगुरता, वजन-से-लंबाई अनुपात में वृद्धि | महत्वपूर्ण रूप से छोटा हुआ बृहदान्त्र |
| अलग-अलग डिग्री के कोलन अल्सर | म्यूकोसल का मोटा होना, लिम्फैडेनोपैथी | |
| म्यूकोसल एडिमा, गॉब्लेट कोशिका की हानि, क्रिप्ट की सूजन और विनाश | गॉब्लेट कोशिका क्षति, क्रिप्ट क्षति | |
| म्यूकोसा और सबम्यूकोसा में सूजन कोशिकाओं की घुसपैठ की अलग-अलग डिग्री, उपकला कोशिका क्षति | कुछ पशुओं में एडेनोमेटस पॉलीप्स और ट्यूमर जैसे परिवर्तन |
2. डीएसएस यूसी मॉडल के लाभ
👍 1. प्रोटोकॉल का क्रियान्वयन आसान है।
👍 2. डीएसएस यूसी मॉडल उच्च पुनरावृत्ति के साथ मानव यूसी लक्षणों से काफी मिलता जुलता है।
👍 3. प्रशासित डीएसएस खुराक को नियंत्रित करके विभिन्न विशिष्ट लक्षण प्रेरित किए जा सकते हैं, जो डीएसएस यूसी मॉडल के लिए अद्वितीय था।
👍 4. डीएसएस यूसी मॉडल को विभिन्न प्रकार के व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले मॉडल जानवरों, जैसे कि चूहे, ज़ेब्राफ़िश, सूअर, फल मक्खियों, आदि के साथ तैयार किया जा सकता है।
👍 5. आईबीडी-प्रेरित कोलाइटिस-संबंधी कैंसर (सीएसी) मॉडल को एज़ोक्सीमेथेन (एओएम) के संयुक्त उपयोग से बनाया जा सकता है।
3. डीएसएस यूसी मॉडल निर्माण उदाहरण
3.1 माउस मॉडल(विवरण के लिए क्लिक करें)
1) BALB/c चूहे, मादा, 6-8 सप्ताह, 25 ग्राम;
2) 3% डीएसएस के साथ बाँझ पीने का पानी, और 0 के साथ फिल्टर।22μm झिल्ली;
3) डीएसएस को 7 दिनों तक प्रशासित किया गया;
4) सूजन, जैसे बृहदान्त्र HE अभिरंजन के बाद शोफ और जमाव देखा गया।
चित्र 2 डीएसएस तीव्र कोलाइटिस अनुभागों के एचई धुंधला परिणाम [1]
3.2 ज़ेब्राफ़िश मॉडल(विवरण के लिए क्लिक करें)
1) ज़ेब्राफ़िश भ्रूण प्राकृतिक स्पॉनिंग से प्राप्त किए गए और एक इनक्यूबेटर में 28.5 डिग्री सेल्सियस पर पुनःपरिसंचारी जल (60 μg/mL तत्काल महासागरीय समुद्री लवण) में निषेचन के 1 दिन बाद तक विकसित किए गए और 1 डीपीएफ तक मेथिलीन ब्लू के साथ पूरक किया गया;
2) 1 डीपीएफ के बाद, 3 डीपीएफ तक संवर्धन के लिए मेथीलीन ब्लू के बिना ई3 भ्रूण संवर्धन माध्यम का उपयोग करें;
3) E3 माध्यम के साथ 10% DSS भंडारण समाधान तैयार करें;
4) डीएसएस को संवर्धन माध्यम के साथ अधिकतम गैर-घातक खुराक तक पतला करें (डीएसएस सांद्रता संदर्भ: 0.5%);
5) ज़ेब्राफिश को 3 डीपीएफ से 6 डीपीएफ तक 0.5% डीएसएस के साथ उपचारित किया गया, और सूचकांक का अवलोकन किया गया।
चित्र 3 डीएसएस ज़ेब्राफ़िश के लीवर में सूजन प्रतिक्रिया उत्पन्न करता है [2]
3.3 सुअर मॉडल(विवरण के लिए क्लिक करें)
1) यॉर्कशायर पिगलेट 18 वर्ष की आयु में 4-5 दिन;
2) डीएसएस खुराक: 1.25 ग्राम/किग्रा, 5 दिनों के लिए मौखिक सेवन;
3) डी-मैनिटोल अवशोषण दर में वृद्धि देखी गई।
चित्र 4 पिगलेट्स में डीएसएस-प्रेरित डी-मैनिटोल सांद्रता नियंत्रण समूह की तुलना में अधिक थी [3]
3.4 ड्रोसोफिला मॉडल(विवरण के लिए क्लिक करें)
1) ड्रोसोफिला, मादा, 5-10 दिन;
2) खिलाना मध्यम 5% सुक्रोज घोल के साथ तैयार किया गया जिसमें 3% डीएसएस और 25 μg/mL था ब्लियोमाइसिन;
3) ड्रोसोफिला को 29 डिग्री सेल्सियस पर तीन दिनों तक संवर्धित किया गया, जिसमें प्रतिदिन संवर्धन बोतल बदली जाती थी;
4) डीएसएस ने आईएससी पूर्ववर्ती कोशिकाओं के प्रसार को प्रेरित किया और ड्रोसोफिला पर इसका घातक प्रभाव पड़ा।
चित्र 5 डीएसएस ड्रोसोफिला में आईएससी अग्रदूत कोशिकाओं के प्रसार को प्रेरित करता है [4].
3.5 कोलाइटिस से संबंधित कैंसर(विवरण के लिए क्लिक करें)
1)BALB/c चूहा, नर, 7 सप्ताह पुराना;
2)पहले दिन, चूहों का वजन करें और उन्हें चिन्हित करें। चूहों को पेट के अंदर 10 मिलीग्राम/किग्रा एओएम घोल इंजेक्ट करें।
3) चूहे के पिंजरे में पीने के लिए पानी भरें। प्रति दिन प्रति चूहे 7-10 एमएल पानी की गणना करें। एक सप्ताह तक खिलाएँ।
4) एक सप्ताह तक पीने के पानी को 2.5% डीएसएस से बदलें;
5) दो सप्ताह तक नियमित पीने के पानी के साथ खिलाएं;
6) चरण 3-4 को 3 बार दोहराएं।
![Fig.6 Schematic diagram of CAC induced by AOM/DSS [5] .](https://seas.ysbuy.com/file/32626/24d9-166605804688444368.jpg?imageView2/2/format/webp/q/100)
चित्र 6 एओएम/डीएसएस द्वारा प्रेरित सीएसी का योजनाबद्ध आरेख [5] .
4. मॉडलिंग सफलता मूल्यांकन मानदंड
4.1 रोग गतिविधि सूचकांक (DAI स्कोर)
मॉडल का मूल्यांकन शरीर के वजन, मल की श्यानता और गुप्त रक्त सहित कई मापदंडों के आधार पर किया गया, जिसके माध्यम से समग्र DAI उत्पन्न होता है।
तालिका 2 DAI स्कोरिंग नियम
| अंक | वजन में कमी का प्रतिशत | मल की स्थिरता | मल गुप्त रक्त |
|---|---|---|---|
| 0 | 0 | सामान्य | नकारात्मक |
| 1 | 1-5% | नरम मल | हल्का नीला रंग |
| 2 | 5-10% | श्लेष्मा मल | नीला |
| 3 | 10-20% | पतले दस्त | गहरा नीला |
| 4 | >20% | \ | बहुत खूनी मल |
4.2 ऊतकवैज्ञानिक परिवर्तन स्कोर
तीव्र कोलाइटिस मॉडल के लिए लिम्फ नोड गठन को छोड़कर हिस्टोलॉजिकल परिवर्तनों के आधार पर उपरोक्त संकेतकों के लिए स्कोर दिए गए थे। इस्तेमाल किया गया HE धुंधला अभिकर्मक Cat#60524ES60 है।
तालिका 3 ऊतकवैज्ञानिक परिवर्तन स्कोर
| पीड़ादायक अल्सर |
अल्सर
| एपिचेंजेस भड़काऊ | भड़काऊ घुसपैठ |
लसीकापर्व )
|
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0 | सामान्य | कोई नहीं | कोई नहीं |
| 1 | 1 | गॉब्लेट कोशिका क्षति | पेरीक्रिप्ट घुसपैठ | 1 |
| 2 | 2 | गॉब्लेट कोशिका क्षति | मांसपेशीय म्यूकोसा में घुसपैठ | 2 |
| 3 | 3 | क्रिप्ट विलोपन | पेशी म्यूकोसा की सामान्य घुसपैठ, म्यूकोसा का मोटा होना | 3 |
| 4 | >3 | व्यापक क्रिप्ट क्षति या पॉलीपॉइड पुनर्जनन | सबम्यूकोसा आक्रमण | > |
4.3 COLON लंबाई
क्रोनिक कोलाइटिस मॉडल के लिए छोटी हुई बृहदांत्र लंबाई एक स्पष्ट लक्षण थी, जबकि तीव्र कोलाइटिस मॉडल के लिए इसी प्रकार के परिवर्तन 8वें दिन देखे जा सकते हैं।
4.4 सारांश
उचित नियंत्रण के साथ DSS UC पशु मॉडल का उपयोग करने के लिए प्रारंभिक प्रयोगों की अनुशंसा की जाती है। प्रति समूह 8-10 जानवर न्यूनतम आवश्यकताएँ हैं। DAI प्रारंभिक अध्ययन से परिणामों का मूल्यांकन करने के लिए मानदंड है।
5. इस संसाधन के लिए लिंक
[1] ज़ियाओना गाओ, एट अल. जर्नल ऑफ न्यूट्रिशनल बायोकैमिस्ट्री 83 (2020) 108438.
[2]जिंग मा, एट अल. एक्वाकल्चर और फिशरीज (2021) 548–557.
[3] कोनी जे. किम, एट अल. जर्नल ऑफ न्यूट्रिशनल बायोकैमिस्ट्री 21 (2010) 468–475.
[4]फैंगफैंग रेन, एट अल.पीएनएएस.2010.107 (49) 21064-21069.
[5]जिया-रोंग हुआंग, एट अल.फ्रंटियर्स इन फार्माकोलॉजी.2020.11:586885.
6. येसेन डीएसएस के साथ मॉडलिंग का सफल मामला
येसेन के साथ सफल तीव्र कोलाइटिस मॉडल तैयार किए गए डीएसएस (कैट#60316ES, मेगावाट: 36000~50000) 7 दिनों में प्रमुख फेनोटाइप के साथ, जैसा कि निम्नलिखित तालिका में दिखाया गया है।
तालिका 4 डीएसएस के साथ विभिन्न प्रकार के आंत्रशोथ मॉडल का निर्माण
| नमूना | मॉडलिंग नमूने | मॉडलिंग योजना | मॉडलिंग परिणाम | उपयोग मूल्यांकन |
|---|---|---|---|---|
| तीव्र बृहदांत्रशोथ | BALB/c चूहे, मादा, 6-8 सप्ताह, 25 ग्राम | 3%-5% DSS लगातार 7 दिनों तक खुलेआम शराब पीते हैं | 5वां दिन आया, बृहदान्त्र की लंबाई छोटी हो गई, HE धुंधलापन, और सूजन स्पष्ट थी | मोल्डिंग की गति तेज़ है और समय कम है। तीव्र कोलाइटिस मॉडल की विशेषताओं के अनुरूप |
| C57BL/6 चूहे, नर, 8 सप्ताह, 20 ग्राम | 3%-5% डीएसएस गैवेज द्वारा, निरंतर प्रशासन | 5वें दिन, बृहदान्त्र छोटा होना, वजन कम होना, मल में रक्त आना, दस्त होना | उच्च मोल्ड दर, और छोटी अवधि। तीव्र कोलाइटिस मॉडल की विशेषताओं के अनुरूप | |
| क्रोनिक कोलाइटिस | C57BL/6 चूहा, नर, 8 सप्ताह, 22 ग्राम | 1-2% डीएसएस गैवेज द्वारा, निरंतर प्रशासन | दिन 40 दिखाई देता है, बृहदान्त्र छोटा होना, वजन कम होना, मल में रक्त, दस्त | उच्च मोल्डिंग दर। क्रोनिक कोलाइटिस मॉडल की विशेषताओं के अनुरूप |
| पेट का कैंसर | C57BL/6 चूहा, नर, 8 सप्ताह, 21 ग्राम | 3 सप्ताह के लिए 5 दिनों के लिए 1%-2% DSS | 14 सप्ताह में बृहदान्त्र की लंबाई कम हो जाना, वजन कम होना, HE धुंधलापन, तथा स्पष्ट सूजन | उच्च मोल्डिंग दर। कोलन कैंसर मॉडल विशेषताओं के अनुरूप |
7. अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न
तीव्र डीएसएस कोलाइटिस मॉडल या क्रोनिक डीएसएस कोलाइटिस मॉडल के बावजूद, आंत्रशोथ की गंभीरता और सफलता माउस प्रजातियों (विभिन्न आनुवंशिक पृष्ठभूमि), डीएसएस एकाग्रता और खुराक चक्र से संबंधित हैं।
तालिका 5 डीएसएस कोलाइटिस मॉडलिंग की सामान्य समस्याएं
| संभावित समस्याएं | संभावित कारण | सुझाया गया समाधान |
|---|---|---|
| चूहों में उच्च मृत्यु दर | डीएसएस सांद्रता बहुत अधिक | प्रशासित डीएसएस की सांद्रता कम करें |
| आंत्रशोथ के कोई या कम लक्षण वाले चूहे | डीएसएस सांद्रता बहुत कम | डीएसएस खुराक सांद्रता बढ़ाएं; चक्र अंतराल घटाएं (10-14 दिन) |
| चूहों के एक ही समूह में, आंत्रशोथ के लक्षण बहुत भिन्न होते हैं | बोतल का ढक्कन बंद हो गया | चूहे की पानी की बोतल की प्रतिदिन जांच करें |
8. उत्पाद ऑर्डर:
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तालिका 6 उत्पाद क्रम
| प्रोडक्ट का नाम | बिल्ली नं. | आकार |
| डेक्सट्रान सल्फेट सोडियम नमक कोलाइटिस मॉडलिंग के लिए MW: 36000~50000 | 60316ईएस25 | 25 ग्राम |
| 60316ES60 | 100 ग्राम | |
| 60316ES76 | 500 ग्राम | |
| 60316ES80 | 1 किलोग्राम |
9. हमारे अभिकर्मकों के साथ प्रकाशित लेख:
2022
[1] मेंगमेंग जू, यिंग कोंग, नन्नन चेन, एट अल. सक्रिय अल्सरेटिव कोलाइटिस में प्रतिरक्षा-संबंधित जीन हस्ताक्षर की पहचान और सीईआरएनए नेटवर्क की भविष्यवाणी [जे]। फ्रंटियर्स इन इम्यूनोलॉजी। 2022; 13: 855645। आईएफ=7.561
[2] लुजुआन जिंग, लिजुआन फू, सोंगमिन काओ, एट अल. एलपीएस-प्रेरित आरए में गोजातीय हड्डी-जिलेटिन-व्युत्पन्न पेप्टाइड्स का विरोधी भड़काऊ प्रभावW264.7 मैक्रोफेज कोशिकाएं और डेक्सट्रान सल्फेट सोडियम-प्रेरित C57BL/6 चूहे [जे]। पोषक तत्व 2022, 14, 1479। आईएफ=5.717
[3]वांग एस, हुआंग जे, टैन के.एस., एट अल. आइसोस्टेविओल सोडियम मेटाबोलिक प्रोफाइलिंग, मैक्रोफेज पोलराइजेशन और एनएफ-बी पाथवे के विनियमन के माध्यम से डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट-प्रेरित क्रोनिक कोलाइटिस को ठीक करता है [जे]। ऑक्सीडेटिव मेडिसिन और सेलुलर दीर्घायु। 2022,4636618। आईएफ=5.076
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2020
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[3] गाओ एक्स, फैन डब्ल्यू, टैन एल, एट अल। सोया आइसोफ्लेवोन्स ERα/NLRP3 इन्फ्लेमसोम मार्गों को लक्षित करके प्रायोगिक कोलाइटिस को ठीक करते हैं [जे]। जर्नल ऑफ न्यूट्रिशनल बायोकैमिस्ट्री, 2020, 83। आईएफ=6.048
2020 से पहले
[1] ओहेलर्स एसएच, फ्लोरेस एमवी, हॉल सीजे, क्रोसियर केई, क्रोसियर पीएस। रेटिनोइक एसिड आंतों के बलगम उत्पादन को दबाता है और प्रायोगिक एंटरोकोलाइटिस को बढ़ाता है। डिस मॉडल मैकेनिज्म। 2012 जुलाई;5(4):457-67। आईएफ=4.973
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पढ़ने के संबंध में
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