एंजियोजेनेसिस घाव भरने, सूजन, रुमेटीइड गठिया, मधुमेह रेटिनोपैथी, मैकुलर डिजनरेशन और ट्यूमर के विकास से निकटता से जुड़ा हुआ है। किसी जीव के विकास के दौरान, एंजियोजेनेसिस नए ऊतक विकास का एक महत्वपूर्ण हिस्सा है। वयस्कता में, विशेष अंगों में सख्ती से विनियमित आवधिक घटनाओं को छोड़कर, लगभग हर सामान्य ऊतक में प्रो-एंजियोजेनिक और एंटी-एंजियोजेनिक अंतर्जात कारकों के बीच संतुलन के कारण बड़ी मात्रा में शारीरिक एंजियोजेनेसिस की कमी होती है। जब संतुलन एंजियोजेनेसिस को बढ़ावा देने की दिशा में बाधित होता है, तो माइक्रोवैस्कुलर एंडोथेलियल कोशिकाएं (ईसी) एक एंजियोजेनिक फेनोटाइप में स्थानांतरित हो जाएंगी, जिससे एक एंजियोजेनिक प्रतिक्रिया शुरू हो जाएगी, जिसे समाप्त या तेज किया जा सकता है।
अध्ययन में, पारंपरिक इन विवो एंजियोजेनेसिस प्रायोगिक विधियों में कॉर्नियल माइक्रोपॉकेट, मेसेंटरी, स्पोंज/मैट्रिक्स इम्प्लांट, डिस्क विश्लेषण (डीएएस), ज़ेब्राफिश आदि शामिल हैं। हालाँकि, ये प्रयोग न केवल तकनीकी रूप से मांग वाले, महंगे और समय लेने वाले हैं, बल्कि इनमें नैतिक मुद्दे भी शामिल हैं। इन विवो एंजियोजेनेसिस प्रयोगों की तुलना में, इन विट्रो में सेल एंजियोजेनेसिस को बनाए रखने के लिए एक विशेष मैट्रिक्स का उपयोग करना अधिक किफायती और व्यावहारिक है। सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला सेल ग्रोथ - मैट्रिक्स बनाए रखना एक घुलनशील बेसमेंट मेम्ब्रेन तैयारी है जिसे EHS माउस ट्यूमर से निकाला जाता है - मैट्रिक्स जेल।
मैट्रिक्स जेल के मुख्य घटक लैमिनिन, टाइप IV कोलेजन, हेपरन सल्फेट प्रोटियोग्लाइकन (HSPG) और नेस्टिन हैं, और इसमें TGF-बीटा, EGF, IGF, FGF, ऊतक प्लास्मिनोजेन एक्टिवेटर और EHS ट्यूमर में पाए जाने वाले अन्य वृद्धि कारक जैसे वृद्धि कारक भी होते हैं। यह ऊतकों और कोशिकाओं के लिए समर्थन, तन्य शक्ति और मचान समर्थन प्रदान करता है, और कोशिका आसंजन और गति के लिए एक त्रि-आयामी उपसंरचना के रूप में भी काम कर सकता है, साथ ही वृद्धि कारकों, केमोकाइन और साइटोकाइन के लिए एक जलाशय के रूप में भी काम कर सकता है। यह कोशिका रूपजनन और विभेदन के लिए एक संकेत के रूप में भी काम कर सकता है। येसेन ने सेट्यूरजेल का विकास और उत्पादन किया हैटीएम मैट्रिक्स जेल, जो एलडीईवी (लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज - एलिवेटिंग वायरस) से मुक्त है, में बहुत कम एंडोटॉक्सिन सामग्री है, और माइकोप्लाज्मा के लिए इसका परीक्षण किया गया है ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि माइकोप्लाज्मा संदूषण नहीं है। इसमें विभिन्न प्रकार के मैट्रिक्स जेल शामिल हैं जैसे कि मूल सांद्रता, उच्च सांद्रता और कम वृद्धि कारक।
उत्पाद की विशेषताएँ
उच्च सुरक्षा: एलडीईवी (लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज एन्हांसमेंट वायरस) मुक्त
एकाग्रता बहुमुखी प्रतिभा: सांद्रता सीमा 8~20 mg/mL
अच्छा बैच स्थिरता: बैचों के बीच स्थिर प्रदर्शन सुनिश्चित करने के लिए सख्त उत्पादन और गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रिया
कम एंडोटॉक्सिन: एंडोटॉक्सिन सामग्री ≤4 ईयू/एमएल
संदूषक का पता लगाना: कोई माइकोप्लाज्मा, बैक्टीरिया और कवक अवशेष नहीं पाया गया।
एंजियोजेनेसिस प्रयोग
- मैट्रिक्स जेल की तैयारी
1) प्रयोग से एक दिन पहले, सीट्योरजेल को हटा देंटीएम मैट्रिक्स जेल को फ्रीजर से निकालें और पिघलने के लिए इसे 4°C पर रात भर रेफ्रिजरेटर में रखें, और उपयोग की जाने वाली उपभोग्य सामग्रियों को पहले से ठंडा कर लें।
2) सेट्यूरजेल को रखेंटीएम प्रयोग से पहले मैट्रिक्स जेल को हमेशा बर्फ के डिब्बे में रखें।
3) एंजियोजेनिक स्लाइडों के स्टेरलाइजेशन पैकेज को खोलें और स्लाइडों को बाहर निकालें।
4) 10 μl सेट्योरजेल मिलाएंटीएम मैट्रिक्स जेल को प्रत्येक वेल में डालें, ध्यान रखें कि सेट्योरजेल डालते समय बंदूक की नोक आंतरिक वेल के शीर्ष के लंबवत होनी चाहिएटीएम मैट्रिक्स जेल किसी भी मैट्रिक्स जेल को ऊपरी कुँए से प्रवाहित होने और अवशिष्ट जेल छोड़ने से रोकने के लिए।
- जेल
1) सबसे पहले स्लाइड को ढक्कन से ढक दें और गीले बॉक्स बनाने के लिए पानी से भिगोया हुआ कागज़ का तौलिया रखकर 10 सेमी का पेट्री डिश तैयार करें।
2) स्लाइड को पेट्री डिश में रखें और ढक्कन से ढक दें।
3) पूरी पेट्री डिश को CO . में डालें2 इनक्यूबेटर में लगभग 30 मिनट के लिए छोड़ दें ताकि जेल के संघनित होने तक प्रतीक्षा की जा सके, जबकि सेल सस्पेंशन तैयार किया जा रहा है।
- कोशिका प्रसार
1) पचे हुए कोशिकाओं को 2×10 घनत्व वाले सेल सस्पेंशन में तैयार करें5 कोशिकाओं/एमएल और अच्छी तरह से मिश्रण।
2) रक्त वाहिकाओं की स्लाइडों को निकालें जिनमें रक्त वाहिकाएं जम कर जेल में बदल गई हैं।
3) प्रत्येक वेल में 50μl सेल सस्पेंशन डालें, ध्यान रखें कि गन की नोक ऊपरी वेल के शीर्ष पर लंबवत रहे तथा निचले वेल में जेल को न छुए।
4) सेल कल्चर माध्यम डालें, ढक दें और इसे ऐसे ही रहने दें, कुछ समय बाद, सभी कोशिकाएं नीचे डूब जाएंगी और मैट्रिक्स जेल की सतह पर गिर जाएंगी।
- छवि अधिग्रहण
कोशिका वृद्धि दर के अनुसार नियमित रूप से फोटो लें और चित्र रखें।
- परिणामों की प्रस्तुति
टिप्पणी:एंजियोजेनेसिस और प्रतिदीप्ति परिणाम
उत्पाद अनुशंसा
| स्यूडोलरिक एसिड | मैंटेम नंबर | एनओआरएम |
| 40183ईएस08/10 | 5/10 एमएल | |
| 40184ईएस08/10 | 5/10 एमएल | |
| 40185ईएस08/10 | 5/10 एमएल | |
| 40186ईएस08/10 | 5/10 एमएल | |
| 40187ईएस08/10 | 5/10 एमएल | |
| सेट्यूरजेलTM मैट्रिक्स उच्च सांद्रता，फिनोल रेड-फ्री，LDEV-मुक्त | 40188ईएस08/10 | 5/10 एमएल |
| 40190ईएस08/10 | 5/10 एमएल | |
| सेट्यूरजेलTM ऑर्गेनोइड संस्कृति के लिए मैट्रिक्स，फिनोल रेड-फ्री，LDEV-मुक्त | 40191ईएस08/10 | 5/10 एमएल |