नि: शुल्क गाइड: स्वस्थ सेल संस्कृतियों के लिए 5 टिप्स

सेल कल्चर दवा विकास से लेकर जीन थेरेपी तक कई शोध अनुप्रयोगों की आधारशिला है। हालाँकि, सही दृष्टिकोण और उपकरणों के बिना स्वस्थ, बढ़ते कल्चर को बनाए रखना चुनौतीपूर्ण हो सकता है। चाहे आप एक अनुभवी वैज्ञानिक हों या सेल कल्चर के लिए नए हों, प्रक्रिया के हर चरण को अनुकूलित करने से बहुत फ़र्क पड़ सकता है। इस गाइड में, हम आपको पाचन से लेकर संदूषण की रोकथाम तक, आपकी सेल कल्चर को पनपने के लिए पाँच आवश्यक सुझाव देंगे।

1. अपने सेल पाचन को बेहतर बनाना

सेल पाचन सेल संस्कृति प्रयोगों में एक महत्वपूर्ण कदम है, जो संस्कृति सतह से कोशिकाओं को अलग करने और उपसंस्कृति और बाद के विश्लेषण के लिए एकल-कोशिका निलंबन में उनके पृथक्करण की सुविधा प्रदान करता है। सही पाचन एंजाइम का चयन सेल पृथक्करण दक्षता में सुधार कर सकता है, सेल क्षति को कम कर सकता है, और सुचारू प्रयोगात्मक प्रगति सुनिश्चित कर सकता है। आपकी ज़रूरतों के लिए सबसे उपयुक्त पाचन एंजाइम का चयन करने में आपकी मदद करने के लिए, हमने कई सामान्य रूप से उपयोग किए जाने वाले एंजाइम उत्पादों और उनकी विशेषताओं पर एक गाइड संकलित की है। आप सेल प्रकार, प्रयोगात्मक आवश्यकताओं और डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों के आधार पर सबसे उपयुक्त उत्पाद चुन सकते हैं।

सामान्य पाचन एंजाइम

• ट्रिप्सिन (अंतरकोशिकीय प्रोटीन को हाइड्रोलाइज करने के लिए प्रयुक्त)
• पुनः संयोजक ट्रिप्सिन (पशु-मूल संदूषण से मुक्त, बायोफार्मास्युटिकल अनुप्रयोगों के लिए उपयुक्त)
• कोलेजनेज़ (कोलेजन फाइबर को विघटित करने के लिए प्रयुक्त, ऊतक पाचन के लिए आदर्श)
• मिश्रित ट्रिप्सिन (जैसे एक्यूटेस, जो कोशिका सतह प्रतिजनों को बेहतर ढंग से संरक्षित करता है)
• ट्रिप्सिन के विकल्प (जैसे ट्रिपले™, सीरम-मुक्त कोशिका संवर्धन के लिए उत्तम)
• डिस्पैस II (विभिन्न ऊतकों और कोशिकाओं को अलग करने के लिए)।

प्रत्येक एंजाइम के अपने विशिष्ट अनुप्रयोग और लाभ होते हैं, तथा सही एंजाइम का चयन करने से प्रयोगात्मक दक्षता और आपके परिणामों की गुणवत्ता में उल्लेखनीय सुधार हो सकता है।

प्रोडक्ट का नाम	बिल्ली संख्या	विनिर्देश
पर्फसेल™l ट्रिप्सिन-EDTA (0.25%), नहीं फिनोल लाल	40123ES60	100 एमएल
परफसेल™ ट्रिप्सिन-कोई EDTA नहीं (0.25%), कोई फिनोल रेड नहीं	40124ES60	100 एमएल
परफसेल™ ट्रिप्सिन (0.25%), फिनोल रेड	40126ES60	100 एमएल
परफसेल™ ट्रिप्सिन-EDTA (0.25%), फिनोल लाल	40127ES60	100 एमएल
ट्रिप्सिन 1:250(पाउडर)	40101ईएस25	25 ग्राम
परफसेल™ पुनः संयोजक ट्रिप्सिन（पाउडर）	40512ईएस10/60	10 मिलीग्राम/100 मिलीग्राम
पुनः संयोजक ट्रिप्सिन（एमएस-सेफ）	20416ईएस60	100 μजी
पर्फसेल ट्राइज़ाइम™ एक्सप्रेस एंजाइम (1X), फिनोल रेड	40134ES60	100 एमएल
पर्फसेल ट्राइज़ाइम™ एक्सप्रेस एंजाइम (1X), नहीं फिनोल रेड	40135ईएस60	100 एमएल
ACCUTASE सेल पृथक्करण समाधान	40506ES60	100 एमएल
डिस्पैस II	40104ईएस60/80	100 मिलीग्राम/1 ग्राम

2. आदर्श सांस्कृतिक वातावरण का निर्माण

एक स्वस्थ संस्कृति सही वातावरण से शुरू होती है। इसमें आपके सेल प्रकार के लिए उपयुक्त तापमान, पीएच और इष्टतम मीडिया शामिल है। येसेन सेल कल्चर मीडिया की एक श्रृंखला प्रदान करता है जो विशेष रूप से विभिन्न प्रकार की सेल लाइनों का समर्थन करने के लिए तैयार की जाती है, जो उन्हें आवश्यक पोषक तत्व और विकास कारक प्रदान करती है।

सीरम-मुक्त कोशिका संवर्धन जैविक अनुसंधान में एक महत्वपूर्ण प्रौद्योगिकी के रूप में उभरी है, जो पुनरावृत्ति, स्थिरता और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करती है। पारंपरिक सेल कल्चर भ्रूण गोजातीय सीरम (FBS) पर निर्भर करते हैं, जो प्रयोगात्मक परिणामों और पशु मूल के नैतिक जोखिमों में भिन्नता लाता है। इन चुनौतियों का समाधान करने के लिए, कई शोधकर्ता तेजी से सीरम-मुक्त कल्चर मीडिया का विकल्प चुन रहे हैं।

प्रतिरक्षाविज्ञान अनुसंधान में, लिम्फोसाइट संस्कृति प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, वैक्सीन विकास और कैंसर इम्यूनोथेरेपी के क्षेत्रों में विशेष रूप से महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। प्रतिरक्षा प्रणाली के केंद्रीय घटकों के रूप में, लिम्फोसाइट्स को इन विट्रो में प्रसार और सक्रिय होने के लिए विशिष्ट संस्कृति स्थितियों की आवश्यकता होती है। येसेन लिम्फोसाइट प्रसार और सक्रियण के लिए विशेष रूप से डिज़ाइन किए गए संस्कृति मीडिया प्रदान करता है, जो विवो प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं में सटीक रूप से अनुकरण कर सकता है और शोधकर्ताओं को टी सेल सक्रियण, एंटीबॉडी उत्पादन और सेलुलर इम्यूनोलॉजी अनुसंधान में अधिक विश्वसनीय डेटा प्राप्त करने में मदद करता है।

इसके अलावा, ऑर्गेनोइड संस्कृति सेल कल्चर तकनीक में एक और महत्वपूर्ण प्रगति का प्रतिनिधित्व करता है। ऑर्गेनोइड्स तीन आयामी सेलुलर संरचनाएं हैं जो इन विट्रो में मानव ऊतकों और अंग कार्यों का अनुकरण कर सकती हैं, जो रोग मॉडलिंग, दवा स्क्रीनिंग और पुनर्योजी चिकित्सा के लिए एक नया शोध मंच प्रदान करती हैं। ऑर्गेनोइड्स की त्रि-आयामी संरचना मानव अंगों की जटिलता और शारीरिक कार्यों को बेहतर ढंग से दोहराती है और अंग विकास, रोग तंत्र और चिकित्सीय प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण बन गई है।

प्रोडक्ट का नाम	बिल्ली संख्या	विनिर्देश
CelCulSF™ कीट कोशिका संवर्धन माध्यम（सीरम-मुक्त）	40140ईएस	1000 एमएल
CelCulSF™ 293 सेल कल्चर मीडियम（सीरम-मुक्त）	40141ईएस	1000 एमएल
CelCulSF™ लिम्फोसाइट कल्चर माध्यम（सीरम-मुक्त）	40142ईएस	1000 एमएल
CelCulSF™ हाइब्रिडोमा सेल कल्चर माध्यम（सीरम-मुक्त）	40143ईएस	1000 एमएल
सेलकुलएसएफ मेसेनकाइमल स्टेम सेल（एमएससी）संस्कृति माध्यम（सीरम-मुक्त）	40144ईएस	500 एमएल
CelCulSF™ एडहेरेंट सेल कल्चर माध्यम（सीरम-कम）	40145ईएस	1000 एमएल
सेब्रेरी® आंत्रीय ऑर्गेनोइड वृद्धि माध्यम (माउस)	41426ईएस60/76	100/500 एमएल
सेब्रेरी® आंत्र कैंसर ऑर्गेनोइड ग्रोथ माध्यम (मानव)	41427ईएस50/60/76	50/100/500 एमएल
सेब्रेरी® गैस्ट्रिक कैंसर ऑर्गेनोइड ग्रोथ मीडियम (मानव)	41428ईएस50/60/76	50/100/500 एमएल
सेब्रेरी® लिवर कैंसर ऑर्गेनोइड ग्रोथ मीडियम (मानव)	41429ईएस50/60/76	50/100/500 एमएल
सेब्रेरी® स्तन कैंसर ऑर्गेनोइड ग्रोथ मीडियम (मानव)	41430ईएस50/60/76	50/100/500 एमएल
सेब्रेरी® फेफड़े के कैंसर ऑर्गेनोइड वृद्धि माध्यम (मानव)	41431ईएस50/60/76	50/100/500 एमएल
सेब्रेरी® esophageal कैंसर ऑर्गेनोइड ग्रोथ मीडियम (मानव)	41432ईएस50/60/76	50/100/500 एमएल
सेब्रेरी® डिम्बग्रंथि कैंसर ऑर्गेनोइड ग्रोथ माध्यम (मानव)	41433ईएस50/60/76	50/100/500 एमएल
सेबरारी® अग्नाशय कैंसर ऑर्गेनोइड ग्रोथ मीडियम (मानव)	41434ईएस50/60/76	50/100/500 एमएल

3.उच्च गुणवत्ता वाले जीन अभिव्यक्ति के लिए कुशल ट्रांसफ़ेक्शन

सेल ट्रांसफ़ेक्शन बायोमेडिकल रिसर्च में एक महत्वपूर्ण तकनीक है, जो जीन अभिव्यक्ति, साइलेंसिंग या कार्यात्मक अध्ययनों के लिए कोशिकाओं में बहिर्जात न्यूक्लिक एसिड (जैसे डीएनए, mRNA, siRNA और miRNA) को पेश करने में सक्षम बनाती है। विविध प्रकार की कोशिकाओं और न्यूक्लिक एसिड के साथ, सफल प्रयोगों के लिए सही ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक का चयन करना आवश्यक है।

रासायनिक अभिकर्मक अभिकर्मक, जिनमें शामिल हैं लिपोसोमल, पीईआई, और कैल्शियम फॉस्फेट-आधारित फॉर्मूलेशन, प्रत्येक अद्वितीय लाभ प्रदान करते हैं। येसेन बायोलॉजी ने विभिन्न ट्रांसफ़ेक्शन अनुप्रयोगों के लिए अनुकूलित एक विविध उत्पाद लाइन विकसित की है, जिसमें डीएनए, siRNA, miRNA और mRNA के लिए उच्च दक्षता वाले ट्रांसफ़ेक्शन शामिल हैं, जिसमें 40 से अधिक सेल लाइनों में सत्यापित सफलता है। ये अभिकर्मक उच्च ट्रांसफ़ेक्शन दक्षता, व्यापक अनुप्रयोग परिदृश्य और वाणिज्यिक उत्पादन के लिए GMP-ग्रेड उत्पाद प्रदान करते हैं, जो अनुसंधान और औद्योगिक अनुप्रयोगों में विश्वसनीय और प्रभावी परिणाम सुनिश्चित करते हैं।

बिल्ली संख्या	प्रोडक्ट का नाम	न्यूक्लिक अम्ल	आवेदन
40802ईएस	हिएफ़ ट्रांस® लिपोसोमल ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक	डीएनए	उच्च प्रदर्शन लिपोसोम ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक
40804ईएस	हिएफ़ ट्रांस®पॉलीब्रीन(हेक्साडीमेथरिन ब्रोमाइड) (10 मिलीग्राम/एमएल)	एल.वी.	लेंटिवायरल संक्रमण क्षमता को बढ़ाना।
40806ईएस	Hieff Trans® इन विट्रो siRNA/miRNA ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक	siRNA, miRNA, ASO	उच्च नॉकडाउन दक्षता वाले siRNA और miRNA-विशिष्ट ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक।
40808ईएस	Hieff Trans® यूनिवर्सल ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक	डीएनए, siRNA, miRNA	उन्नत लिपोसोम अभिकर्मक अभिकर्मक जो विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं में डीएनए और आरएनए अभिकर्मक कर सकता है, तथा अभिकर्मण में कठिनाई वाले कोशिकाओं पर भी अच्छा प्रभाव दिखा रहा है।
40809ईएस	Hieff Trans® mRNA ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक	एमआरएनए	विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं में उच्च अभिकर्मक दक्षता वाला mRNA-विशिष्ट अभिकर्मक।
40815ईएस	हिएफ़ ट्रांस®पॉलीएथिलीनिमाइन लीनियर(पीईआई) एमW25000	डीएनए	प्रोटीन अभिव्यक्ति और वायरल पैकेजिंग (पाउडर रूप) के लिए व्यापक रूप से लागू।
40816ईएस	हाईफ़ ट्रांस®पॉलीएथिलीनिमाइन लीनियर (पीईआई) एमW40000（तीव्र अपघटन）	डीएनए
40820ईएस	पीईआई ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक	डीएनए	वायरल पैकेजिंग के लिए समर्पित ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक, जो AAV और LV वायरल पैकेजिंग के लिए उच्च पैदावार प्राप्त करने में सक्षम हैं
40821ईएस	पीईआई-जीएमपी ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक	डीएनए
40823ईएस	अल्ट्रा पीईआई-एएवी ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक	डीएनए	उच्चतम ट्रांसफ़ेक्शन दक्षता। सस्पेंशन कल्चर में AAV के उत्पादन के लिए विशेष रूप से उपयुक्त, जिससे उच्च आउटपुट प्राप्त होता है।

4. दीर्घकालिक उपयोग के लिए अपनी कोशिकाओं को क्रायोप्रिजर्व करना

सेल फ्रीजिंग कोशिकाओं के दीर्घकालिक संरक्षण के लिए एक महत्वपूर्ण तकनीक है, जो संदूषण को रोकने, प्रयोगात्मक स्थिरता बनाए रखने, शिपिंग की सुविधा प्रदान करने और सेल बैंक स्थापित करने जैसे उद्देश्यों की पूर्ति करती है। फ्रीजिंग के दौरान होने वाले प्राथमिक जोखिमों में शामिल हैं बर्फ क्रिस्टल गठन और समाधान क्षतिइन जोखिमों को कम करने के लिए, धीमी गति से जमने और तेजी से पिघलने के प्रोटोकॉल को अपनाना आवश्यक है। ग्लिसरोल या डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड (DMSO) जैसे क्रायोप्रोटेक्टेंट्स का इस्तेमाल आमतौर पर बर्फ के क्रिस्टल बनने और आसमाटिक तनाव को कम करने के लिए किया जाता है।

येसेन दो विशेष क्रायोप्रिजर्वेशन समाधान प्रदान करता है: स्तनधारी कोशिकाओं के लिए सेलस्टोर फ्रीजिंग और कीट कोशिकाओं के लिए कीट सेल स्टोर फ्रीजिंग। दोनों उत्पादों में अद्वितीय फॉर्मूलेशन हैं जो जटिल शीतलन प्रक्रियाओं के बिना -70 डिग्री सेल्सियस पर सीधे फ्रीजिंग की अनुमति देते हैं और पिघलने पर उच्च कोशिका उत्तरजीविता दर प्रदान करते हैं, खासकर उन कोशिकाओं के लिए जो DMSO के प्रति संवेदनशील हैं या गुच्छों में बदल जाती हैं। ये समाधान सीरम या प्रोटीन घटकों से मुक्त हैं, जो गोजातीय स्रोतों से कोई संदूषण सुनिश्चित नहीं करते हैं और सीरम-मुक्त संस्कृतियों के लिए आदर्श हैं।

प्रोडक्ट का नाम	बिल्ली संख्या	विनिर्देश
स्तनधारी कोशिकास्टोर फ्रीजिंग	40128ईएस50	5×10 एमएल
स्तनधारी कोशिकास्टोर फ्रीजिंग	40128ईएस60	100 एमएल
कीट कोशिका भण्डारण फ्रीजिंग	40129ईएस50	5×10 एमएल
कीट कोशिका भण्डारण फ्रीजिंग	40129ES60	100 एमएल
सीरम-मुक्त सेल फ़्रीज़िंग माध्यम	40151ईएस	50 एमएल/100 एमएल
सीरम-मुक्त सेल फ़्रीज़िंग माध्यम (DMSO-मुक्त)	40152ईएस	100 एमएल
सीरम-मुक्त सेल फ्रीजिंग माध्यम (स्टेम कोशिकाओं के लिए)	40153ईएस	100 एमएल
सीरम-मुक्त सेल फ्रीजिंग माध्यम (स्टेम कोशिकाओं के लिए, डीएमएसओ-मुक्त)	40154ईएस	100 एमएल

5. स्वस्थ संस्कृतियों के लिए संदूषण को रोकना

सेल कल्चर में संदूषण एक प्रचलित समस्या है, जिसके कारण अक्सर परिणाम खराब होते हैं और शोध का समय बर्बाद होता है। प्रभावी रोकथाम और उपचार के लिए विभिन्न प्रकार के संदूषण को पहचानना आवश्यक है।

सामान्य कोशिका दूषित पदार्थों

• जीवाणु
• कवक
• माइकोप्लाज़्मा
• प्रोटोजोआ
• काले धब्बे
• वायरस
• पार प्रजातियों

निवारक उपायों में एंटीबायोटिक्स का उपयोग, उपकरणों का नियमित रूप से कीटाणुशोधन, बाँझ तकनीकों का पालन और स्वच्छ कार्य क्षेत्र बनाए रखना शामिल है। संदूषण का पता चलने पर, आमतौर पर प्रभावित संस्कृतियों को त्यागने की सलाह दी जाती है, जब तक कि वे दुर्लभ या मूल्यवान न हों; ऐसे मामलों में, संदूषक को खत्म करने के लिए कदम उठाए जाने चाहिए। बैकअप सेल लाइनों की स्थापना या नई संस्कृतियों को प्राप्त करने की सिफारिश की जाती है।कुछ स्थितियों में, विशिष्ट संदूषकों को लक्षित करने वाले विशेष उपचार सेल कल्चर को बहाल करने में सहायता कर सकते हैं। उचित स्वच्छता बनाए रखना, उपकरणों का सख्त पृथक्करण सुनिश्चित करना, और एक बाँझ वातावरण बनाए रखना संदूषण को रोकने और सफल सेल कल्चर प्रयोगों को सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण है।

प्रकार	प्रोडक्ट का नाम	बिल्ली संख्या	विनिर्देश
जीवाणुरोधी	पेनिसिलिन-स्ट्रेप्टोमाइसिन (100×), सेल कल्चर के लिए उपयुक्त	60162ES76	100 एमएल
	टिमेंटिन	60230ईएस07/60	3.2/100 ग्राम
	जेंटामाइसिन सल्फेट नमक	60214ईएस03/08/25	1/5/25 ग्राम
	metronidazole	60223ईएस25/60	25/100 मिलीग्राम
ऐंटिफंगल	एम्फोटेरिसिन बी	60238ईएस01/03	100 मिलीग्राम/1 ग्राम
	निस्टैटिन	60219ES08	5 ग्राम
	ऑरियोबैसिडिन ए	60231ईएस03/08	1/5 मिलीग्राम
माइकोप्लाज्मा का पता लगाना	जीमाइक-पीसीआर माइकोप्लाज्मा टेस्ट किट	40601ईएस10/20	10/20 परख
	MycAway™ प्लस-कलर वन-स्टेप माइकोप्लाज्मा डिटेक्शन किट	40612ईएस25/60	25/100 टी
माइकोप्लाज्मा हटाना	मायकअवे™ स्प्रे (उपयोग हेतु तैयार)	40605ईएस02/03/08	1/2/10×500 एमएल
	मायकअवे™ उपचार (1000×) - माइकोप्लाज्मा उन्मूलन अभिकर्मक	40607ईएस03/08	1/5 एमएल
माइकोप्लाज्मा की रोकथाम	मायकअवे™ प्रोफिलैक्टिक (2000)×) - माइकोप्लाज्मा रोकथाम अभिकर्मक	40608ईएस03/08	1/5 एमएल
	माइकगार्ड™-1 समाधान (100×)	40609ES60	100 एमएल
	माइकगार्ड™-2 समाधान (500×)	40610ES60	100 एमएल

निष्कर्ष

विश्वसनीय, पुनरुत्पादनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए कोशिका संवर्धन प्रक्रियाओं का अनुकूलन महत्वपूर्ण है।पाचन के लिए सही एंजाइम चुनने से लेकर संदूषण को रोकने तक, कार्यप्रवाह में प्रत्येक चरण महत्वपूर्ण है। येसेन से उच्च गुणवत्ता वाले अभिकर्मकों और तकनीकों को शामिल करके, आप स्वस्थ, अधिक उत्पादक सेल कल्चर प्राप्त कर सकते हैं, जिससे अधिक सफल प्रयोग और शोध परिणाम प्राप्त हो सकते हैं।

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