अफ़्रीकी स्वाइन फीवर वायरस - कुल मास्टर मिक्स/प्रत्यक्ष प्रवर्धन qPCR समाधान

अफ़्रीकी स्वाइन फीवर (ASF) एक तीव्र, गंभीर और अत्यधिक संक्रामक संक्रामक रोग है जो अफ़्रीकी स्वाइन फीवर वायरस (ASFV) के कारण होता है जो घरेलू सूअरों या जंगली सूअरों को संक्रमित करता है। इसकी रुग्णता और मृत्यु दर 100% तक पहुँच सकती है, जिससे वैश्विक सुअर उद्योग को गंभीर रूप से खतरा हो सकता है और अपूरणीय आर्थिक नुकसान हो सकता है। विश्व पशु स्वास्थ्य संगठन (OIE) इसे रिपोर्ट करने योग्य पशु रोग के रूप में सूचीबद्ध करता है।

वर्तमान में, अफ्रीकी स्वाइन फीवर के लिए कोई टीका या प्रभावी उपचार नहीं है। प्रयोगशाला निदान विधियों के माध्यम से अफ्रीकी स्वाइन फीवर का तेजी से और सटीक निदान रोग के प्रसार को रोकने के लिए महत्वपूर्ण है। OIE द्वारा ASF के नियमित निदान के लिए मुख्य उपकरण के रूप में qPCR की सिफारिश की जाती है।

येसेन IVD कच्चे माल के अनुसंधान एवं विकास में समृद्ध अनुभव वाला निर्माता है। अफ्रीकी स्वाइन बुखार के मामले में, येसेन सकारात्मक प्रतिक्रिया देता है और अफ्रीकी स्वाइन बुखार वायरस के निष्कर्षण से लेकर पता लगाने तक के तीन संपूर्ण प्रक्रिया समाधान विकसित करने के लिए ग्राहकों के साथ सहयोग करता है। तो तीन समाधान क्या हैं? और इन समाधानों के अनुप्रयोग क्या हैं? पढ़ना जारी रखें...

चित्र 1. येसेन अफ़्रीकी स्वाइन फीवर का पता लगाने के उपाय

समाधान I: टैकमैन मल्टीप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स (UDG प्लस)जाँच करना

येसेन का टैकमैन मल्टीप्लेक्स क्यूपीसीआर मास्टर मिक्स (यूडीजी प्लस) (कैट#13171) एएसएफवी डिटेक्शन के लिए अनुकूलित मास्टर मिक्स है जिसमें एंजाइम मिक्स, एमजी2+, डीएनटीपी और बफर शामिल हैं। मास्टर मिक्स का उपयोग एम्पलीफिकेशन चरण में किया जाता है और प्राइमर और जांच जोड़कर प्री-मिक्स्ड समाधान के रूप में कॉन्फ़िगर किया जाता है। मास्टर मिक्स को ऐसे कारकों के साथ डिज़ाइन किया गया है जो गैर-विशिष्ट पीसीआर प्रवर्धन को प्रभावी ढंग से रोक सकते हैं और 4-प्लेक्स में प्रवर्धन दक्षता में सुधार कर सकते हैं।

उत्पाद की विशेषताएँ

👍यूडीजी प्रदूषण रोधी प्रणाली, एरोसोल संदूषण के जोखिम को प्रभावी ढंग से रोकती है

👍कमरे के तापमान पर पूर्व-मिश्रित पीसीआर समाधान (मास्टर मिक्स + प्राइमर्स + जांच) की दीर्घकालिक स्थिरता, पता लगाने की कठिनाई को बहुत सरल बनाती है

👍उच्च प्रवर्धन दक्षता और अच्छी पुनरावृत्ति

👍बहु-प्लेटफ़ॉर्म और बहु-प्रणाली के लिए उपयुक्त

केस शो

👉पूर्व-मिश्रित पीसीआर समाधान की दीर्घकालिक स्थिरता
कैट#13171 का उपयोग पूर्व-मिश्रित पीसीआर समाधान को कॉन्फ़िगर करने के लिए किया गया था जिसे 7 दिनों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर रखा जा सकता है, और एएसएफ प्लास्मिड सिस्टम के प्रवर्धन में 15 बार दोहराया गया और पिघलाया जा सकता है। परिणामों से पता चला कि पीसीआर समाधान के सीटी मूल्य और संवेदनशीलता में 37 डिग्री सेल्सियस पर 7 दिनों तक रखने के बाद कोई खास अंतर नहीं आया है, और 15 बार दोहराया गया और पिघलाया गया सीटी मूल्य में कोई खास बदलाव नहीं आया।

चित्र 2. कैट#13171 टैकमैन मल्टीप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स (UDG प्लस)(पूछताछ) का उपयोग पूर्व-मिश्रित पीसीआर समाधान में एएसएफ प्लास्मिड प्रणाली के प्रवर्धन में दीर्घकालिक स्थिरता के साथ किया जाता है। 2A-सीटी मान 37 डिग्री सेल्सियस पर 0 दिन और 7 दिनों के लिए 2B-संवेदनशीलता 37 डिग्री सेल्सियस पर 0 दिन और 7 दिनों के लिए 2C-15 बार फ्रीज-थॉ के बाद स्थिरता

👉स्थिर और पुनरुत्पादनीय अभिकर्मक
ASFV प्लास्मिड सिस्टम प्रवर्धन प्रयोग को 20 बार दोहराने के लिए Cat#13171 के चार अलग-अलग बैचों का चयन किया गया। Ct मानों में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था, CV 1% से कम था।

चित्र तीन।येसेन कैट#13171 का पुनरावर्तनीयता परीक्षण

👉बहु-प्लेटफ़ॉर्म बहु-प्रणाली लागू
येसेन कैट#13171 का उपयोग क्रमशः बायो-रेड CFX96, ABI Q5 और स्लान प्लेटफ़ॉर्म पर अफ्रीकी स्वाइन फीवर ASFV/ACT दोहरे प्लास्मिड को बढ़ाने के लिए किया गया था। यह देखा जा सकता है कि येसेन कैट#13171 विभिन्न प्रकार के उपकरणों के लिए उपयुक्त है, और डेटा विश्वसनीय और स्थिर है।

चित्र 4. बायो-रेड CFX96 रियल-टाइम पीसीआर सिस्टम


चित्र 5. एबीआई क्यू5 रियल-टाइम पीसीआर सिस्टम

चित्र 6. स्लान रियल-टाइम पीसीआर सिस्टम

समाधान II:यूनिवर्सल TaqMan मल्टीप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स

येसेन का यूनिवर्सल टैकमैन मल्टीप्लेक्स क्यूपीसीआर मास्टर मिक्स (कैट#11211) एंटीबॉडी-संशोधित हॉट-स्टार्ट टैक डीएनए पॉलीमरेज़ और मिलान किए गए मल्टी-प्लेक्स बफर का उपयोग करके कम सांद्रता वाले टेम्पलेट्स के कुशल प्रवर्धन के लिए गहराई से अनुकूलित है। यह उत्पाद एकल ट्यूब में 4-प्लेक्स पीसीआर प्रतिक्रियाओं का समर्थन करता है और जीनोटाइपिंग और मल्टीप्लेक्स क्यूपीसीआर विश्लेषण के लिए आदर्श है।

उत्पाद की विशेषताएँ

👍रक्त अशुद्धियों के प्रति मजबूत सहनशीलता, येसेन न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण अभिकर्मक कैट#13720 न्यूक्लिक एसिड रिलीज अभिकर्मक V2 के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है, प्रत्यक्ष qPCR के लिए आदर्श
👍3 प्रतियों/प्रतिक्रिया के लिए अति-उच्च संवेदनशीलता, पहचान सटीकता में बहुत सुधार करती है
👍कमरे के तापमान पर पूर्व-मिश्रित पीसीआर समाधान (मास्टर मिक्स + प्राइमर्स + जांच) की दीर्घकालिक स्थिरता, पता लगाने की कठिनाई को बहुत सरल बनाती है

केस शो

👉रक्त अशुद्धियों के प्रति प्रबल सहनशीलता
अन्य ब्रांडों के समान उत्पादों की तुलना में, येसेन कैट#11211 में रक्त के नमूनों में अवरोधकों के प्रति अधिक सहनशीलता है। परिणामों से पता चला कि येसेन कैट#11211 में EDTA और सोडियम साइट्रेट के प्रति उच्च सहनशीलता है, और यह 0.5% पूरे रक्त का सामना कर सकता है।

चित्र 7. कैट#11211 यूनिवर्सल टैकमैन मल्टीप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स और विभिन्न ब्रांडों के मास्टर मिक्स का उपयोग क्रमशः 3 मिमी EDTA (3A), 6 मिमी सोडियम साइट्रेट (3B), 0.5% रक्त (3C) के साथ पूरक ASF qPCR समाधान के लिए किया जाता है।

👉3 प्रतियों/प्रतिक्रिया के प्रति अति-उच्च संवेदनशीलता

विभिन्न ब्रांडों के उत्पादों के आधार पर 20 प्रतिकृतियों के साथ ASFV प्लास्मिड का प्रवर्धन किया गया। प्रयोगों के परिणाम बताते हैं कि येसेन उत्पादों की पहचान दर अधिक है।

चित्र 8. विभिन्न ब्रांडों के समान उत्पादों के बीच पहचान दरों की तुलना (अंतिम प्रणाली में 3 प्रतियां)

👉दीर्घकालिक स्थिरता, कमरे के तापमान पर 7 दिनों तक स्थिर

ASFV/ACT दोहरे प्लास्मिड सिस्टम का पीसीआर समाधान 4℃, 25℃ और 37℃ पर 7 दिनों के बाद स्थिर प्रदर्शन बनाए रख सकता है। यह देखा जा सकता है कि सीटी मूल्य और प्रतिदीप्ति मूल्य में महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं हुआ।

चित्र 9. पीसीआर समाधान की स्थिरता

समाधान III: आइसोथर्मल प्रवर्धन

यीसेन के उत्पाद आइसोथर्मल प्रवर्धन प्रौद्योगिकी का समर्थन करते हैं जो ASF का तेजी से और अधिक कुशलता से पता लगाने में मदद करता है। कैट# 14402 हाईएफ़™ बीएसटी प्लस डीएनए पॉलीमरेज़ (40 यू/μL) थर्मोफिलिक जियोबैसिलस एसपी डीएनए पॉलीमरेज़ I से प्राप्त होता है, जिसमें 5'-3' एक्सोन्यूक्लिअस गतिविधि की कमी होती है। इस उत्पाद में मजबूत 5'-3' डीएनए पॉलीमरेज़ गतिविधि, स्ट्रैंड विस्थापन गतिविधि और dUTP सहनशीलता है, जो प्रदूषण विरोधी आइसोथर्मल प्रवर्धन प्रतिक्रियाओं, जैसे कि LAMP, CPA, आदि के लिए अधिक उपयुक्त है।

उत्पाद की विशेषताएँ

👍उच्च प्रवर्धन दक्षता

👍उच्च उपज प्रवर्धन

👍डीयूटीपी सहनशीलता, कैट#10303 यूरैसिल डीएनए ग्लाइकोसिलेस (यूडीजी/यूएनजी) के साथ संयोजन में इस्तेमाल किया जा सकता है(पूछताछ), ताप-अस्थिर, 1 U/μL एरोसोल संदूषण के जोखिम को रोकने के लिए

केस शो

👉आयातित ब्रांड N* उत्पादों का बेहतर विकल्प

प्रवर्धन प्रक्रिया क्रमशः येसेन और एन* कंपनी के बीएसटी डीएनए पॉलीमरेज़ का उपयोग करके की गई थी। विभिन्न ब्रांडों के बीच सीटी मूल्य और प्रतिदीप्ति तीव्रता में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था।

चित्र 10. विभिन्न ब्रांडों के प्रवर्धन वक्र

उत्पादों का ऑर्डर देना

येसेन उपरोक्त तीन समाधानों में ASFV का पता लगाने के लिए विभिन्न उत्पाद प्रदान करता है। वर्णित उत्पाद और संबंधित उत्पाद नीचे दी गई तालिका में सूचीबद्ध हैं। कृपया अपनी आवश्यकताओं के अनुसार उपयुक्त पता लगाने की विधि और इष्टतम उत्पाद चुनें।

वर्ग

उत्पाद वर्णन

प्रोडक्ट का नाम

एसकेयू

निष्कर्षण

चुंबकीय मनका निष्कर्षण

न्यूक्लिक एसिड रिलीज अभिकर्मक V2 (पूछताछ)

13720ईएस

क्यूपीसीआर मिक्स

प्रीमिक्स स्थिर

Hieff Unicon™ TaqMan मल्टीप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स (UDG प्लस)(पूछताछ)

13171ईएस

उच्च संवेदनशील

Hieff Unicon™ यूनिवर्सल TaqMan मल्टीप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स

11211ईएस

एंजाइम और एंटीबॉडी

ताक़

हाईफ़ यूनिकॉन™ हॉटस्टार्ट डायरेक्ट टैक डीएनए पोलीमरेज़(पूछताछ)

10717ईएस

टैक एंटीबॉडी

Hieff™ डबल-ब्लॉक एंटी-टैक डीएनए पॉलीमरेज़ एंटीबॉडी

31303ईएस

बीएसटी

Hieff™ Bst प्लस डीएनए पॉलीमरेज़ (40 U/μL)

14402ईएस

Hieff™ Bst प्लस डीएनए पॉलीमरेज़ (2000 U/μL)(पूछताछ)

14403ईएस

यूडीजी

यूरैसिल डीएनए ग्लाइकोसिलेस (यूडीजी), हीट-लैबाइल(पूछताछ)

10303ईएस

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