पीसीआर के लिए पारंपरिक हाई-फिडेलिटी एंजाइम का उपयोग करते समय, कुछ कठिन मुद्दों का सामना करना अपरिहार्य है। उदाहरण के लिए, फिडेलिटी पर्याप्त नहीं हो सकती है, जिससे प्रवर्धित टुकड़ों को अनुक्रमित करने के बाद भी लक्ष्य आधारों में उत्परिवर्तन या विलोपन हो सकता है। प्रवर्धन समय भी अपेक्षाकृत लंबा है; कभी-कभी, 5kb टुकड़े को प्रवर्धित करने में लगभग 2 घंटे लग सकते हैं। अब, XiaoYi आपकी समस्याओं को हल करने के लिए एक तेज़ हाई-फिडेलिटी पीसीआर पेश करता है! - Hieff Canace™ एडवांसफास्ट पीसीआर मास्टर मिक्स (अल्ट्रा-फास्ट हाई-फिडेलिटी पीसीआर प्रीमिक्स)।

2× हिएफ़ कैनेस™ एडवांसफास्ट पीसीआर मास्टर मिक्स (डाई के साथ) इसमें एक प्री-एडेड इलेक्ट्रोफोरेसिस इंडिकेटर होता है, जिससे पीसीआर उत्पादों को सीधे इलेक्ट्रोफोरेसिस के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। प्रवर्धित उत्पादों में कुंद सिरे होते हैं। यह उच्च-निष्ठा एंजाइम मिश्रण तेज़, सरल, अत्यधिक संवेदनशील, दृढ़ता से विशिष्ट और स्थिर होने के लाभ प्रदान करता है। प्रतिक्रिया प्रणाली में, केवल प्राइमर और टेम्प्लेट को जोड़ने की आवश्यकता होती है। इसके अतिरिक्त, उत्पाद में एक विशिष्ट संरक्षक भी होता है, जो यह सुनिश्चित करता है कि उच्च-निष्ठा पीसीआर प्रीमिक्स बार-बार जमने और पिघलने के बाद भी स्थिर गतिविधि बनाए रखता है।

उत्पाद की विशेषताएँ

  • उच्च निष्ठा: कम बेमेल दर, साथ ए आधार बेमेल अनुपात का 231/300,000 में उच्च जीसी उत्परिवर्तन-प्रवण अनुक्रम;
  • तेज़ विस्तारण रफ़्तार: विस्तार दर जैसा तेज़ जैसा 5 सेकंड प्रति केबी;
  • चौड़ा प्रयोज्यता: काबिल का कवर जीन साथ 20-80% जीसी सामग्री, बर्दाश्त चूहा लाइसेट्स और 20% खून;
  • अच्छा स्थिरता: कर सकना होना संग्रहित पर 37° सेल्सियस के लिए 7 दिन बिना प्रभावित उत्पाद प्रदर्शन;
  • तेज़ और सुविधाजनक: केवल जोड़ना प्राइमरों और खाका के लिए प्रवर्धन, आता है साथ लोड हो रहा है डाई के लिए प्रत्यक्ष वैद्युतकणसंचलन.

उत्पाद प्रदर्शन प्रदर्शन

उच्च निष्ठा, कम बेमेल दर

विभिन्न प्रजातियों के जीनोम को टेम्पलेट के रूप में उपयोग करते हुए, छह GC-समृद्ध अंशों को प्रवर्धन के लिए चुना गया जो आधार उत्परिवर्तन/हानि के लिए अत्यधिक प्रवण हैं। संबंधित PCR उत्पादों को वेक्टर में क्लोन किया गया, और आधार बेमेल/उत्परिवर्तन घटनाओं की पुष्टि करने के लिए प्रत्येक अनुक्रम के लिए 100 एकल क्लोन अनुक्रमण के लिए चुने गए। परिणामों से पता चला कि घरेलू और अंतर्राष्ट्रीय ब्रांड अभिकर्मकों की तुलना में तेज़ उच्च-निष्ठा PCR मास्टर मिक्स (10164ES) में आधार बेमेल/उत्परिवर्तन की बेहतर दर थी।

विस्तार समय 5 सेकंड तक पहुंच सकता है/केबी

रैपिड हाई-फ़िडेलिटी एंजाइम प्रीमिक्स (10164ES) और उत्पाद T का उपयोग करके, 100 एनजी मानव जीनोमिक डीएनए टेम्पलेट से अलग-अलग लंबाई के टुकड़ों (0.4-10 केबी) को 5 सेकंड/केबी की विस्तार दर पर बढ़ाया गया, जिसमें विस्तार समय 5 सेकंड/केबी होना आवश्यक था। परिणामों से पता चला कि रैपिड हाई-फ़िडेलिटी एंजाइम प्रीमिक्स (10164ES) 5 सेकंड/केबी की विस्तार दर पर 10 केबी के भीतर के टुकड़ों को बढ़ा सकता है।

विभिन्न जीसी सामग्री वाले जीन टुकड़ों को बढ़ाया जा सकता है

मानव जीनोमिक डीएनए टेम्प्लेट से 23-76% जीसी सामग्री वाले जीन टुकड़ों को बढ़ाने के लिए तेज़ हाई-फ़िडेलिटी एंजाइम प्रीमिक्स (10164ES) का उपयोग करना, जिसमें विस्तार समय 5 सेकंड/केबी पर सेट किया गया है। परिणामों से पता चला कि उत्पाद में अच्छी प्रवर्धन विशिष्टता है और यह अलग-अलग जीसी सामग्री वाले टुकड़ों को बढ़ाने में सक्षम है।

भिन्न-भिन्न GC सामग्री वाले जीन अंशों को प्रवर्धित करने में सक्षम

विभिन्न नमूनों से अलग-अलग लंबाई के टुकड़ों को बढ़ाने के लिए तेज़ हाई-फ़िडेलिटी एंजाइम प्रीमिक्स (10164ES) का उपयोग करना, जिसमें प्रति किलोबेस 5-10 सेकंड का विस्तार समय निर्धारित किया गया है। परिणाम दर्शाते हैं कि यह उत्पाद उत्कृष्ट प्रवर्धन विशिष्टता प्रदर्शित करता है और विभिन्न टेम्पलेट्स से विभिन्न टुकड़ों के प्रवर्धन के साथ संगत है।

नोट: 1. माउस जीनोमिक डीएनए 1 केबी; 2. माउस जीनोमिक डीएनए 2 केबी; 3. माउस जीनोमिक डीएनए 6 केबी; 4. मक्का जीनोमिक डीएनए 1 केबी; 5. चावल जीनोमिक डीएनए 2 केबी-ए; 6. चावल जीनोमिक डीएनए 2 केबी-बी; 7. मानव 293 कोशिका सीडीएनए 1 केबी; 8. मानव 293 कोशिका सीडीएनए 2 केबी; 9. मानव 293 कोशिका सीडीएनए 3 केबी; 10. मानव 293 कोशिका सीडीएनए 12 केबी; 11. ई. कोली शोरबा 8 केबी; 12. ई. कोली शोरबा 16 केबी; 13. चावल जीनोमिक डीएनए 10 केबी-ए; 14. चावल जीनोमिक डीएनए 10 केबी-बी; 15. चावल जीनोमिक डीएनए 10 केबी-सी; 16. चावल जीनोमिक डीएनए 20 केबी-ए; 17. चावल जीनोमिक डीएनए 20 केबी-बी; 18. मानव रक्त प्रत्यक्ष प्रवर्धन 3 केबी।

विभिन्न प्रजातियों में टेम्पलेट प्रवर्धन की उच्च पहचान दर

रैपिड हाई-फ़िडेलिटी एंजाइम प्रीमिक्स (10164ES) का उपयोग करके, अरेबिडोप्सिस, रेपसीड और आलू में 0.5-10 kb तक के विभिन्न GC सामग्री अंशों को 5 सेकंड/kb के विस्तार समय के साथ प्रवर्धित किया गया। परिणामों से पता चला कि रैपिड हाई-फ़िडेलिटी एंजाइम प्रीमिक्स (10164ES) सफल प्रवर्धन सुनिश्चित कर सकता है।

रैपिड हाई-फ़िडेलिटी एंजाइम प्रीमिक्स (10164ES) का उपयोग करते हुए, अरेबिडोप्सिस, रेपसीड, फ्रूट फ़्लाइज़, कैनोरहैबडाइटिस एलिगेंस और ज़ेब्राफ़िश से यादृच्छिक अनुक्रम (यादृच्छिक रूप से चुने गए), 0.5-10 केबी से लेकर 20-80% जीसी सामग्री को कवर करने वाले टुकड़ों के आकार के साथ, प्रवर्धित किए गए। विस्तार समय 5 सेकंड/केबी पर सेट किया गया था। परिणामों से पता चला कि रैपिड हाई-फ़िडेलिटी एंजाइम प्रीमिक्स (10164ES) में उच्च पहचान दर है।

अच्छी स्थिरता

100 एनजी मानव जीनोमिक डीएनए से 3 केबी और 5 केबी डीएनए टुकड़ों को बढ़ाने के लिए, क्रमशः 3 दिन और 7 दिन के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किए गए तेज उच्च-निष्ठा एंजाइम प्रीमिक्स (10164ES) का उपयोग किया गया, जिसमें 5 सेकंड/केबी पर विस्तार समय निर्धारित किया गया। परिणाम बताते हैं कि उत्पाद में अच्छी स्थिरता है।

ग्राहक परीक्षण प्रतिक्रिया

जानवर जीडीएनए-120बीपी-50%जीसी

ग्राहक मूल्यांकन: पीसीआर प्रक्रिया तेज़ है, बैंड उपयुक्त हैं, और इसे सीधे एगरोज़ जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस में लोड किया जा सकता है। एन ब्रांड के बैंड ऊपर की ओर पक्षपाती हैं, जो इसके अपने बफर के प्रभाव के कारण हो सकता है, और चूंकि कोई लोडिंग बफर नहीं जोड़ा गया था, इसलिए यह उत्पाद मेरे वर्तमान प्रायोगिक प्रोटोकॉल में उच्च-निष्ठा एंजाइम को प्रतिस्थापित कर सकता है।

पौधा सीडीएनए-729बीपी-45.13%जीसी

ग्राहक मूल्यांकन: टी ब्रांड की तुलना में, क्लोनिंग बैंड अधिक स्पष्ट और अधिक समान हैं, और पूरी पीसीआर प्रक्रिया तेज है। जेल चलाते समय अतिरिक्त डाई जोड़ने की आवश्यकता नहीं है, जो बहुत सुविधाजनक और समय बचाने वाला है।

माइक्रोबियल जीडीएनए-1158、1953बीपी-58.8%、52.9%जीसी

ग्राहक मूल्यांकन: वी ब्रांड की तुलना में, प्रभाव तुलनीय है, लेकिन व्यक्तिगत रूप से, मुझे यह और भी बेहतर लगता है।

पौधा सीडीएनए-2000बीपी-40%जीसी

ग्राहक मूल्यांकन: प्रभाव बहुत अच्छा है, और पट्टी स्पष्ट है।

उच्च-निष्ठा पी.सी.आर. चयन गाइड

उत्पाद स्थिति

प्रोडक्ट का नाम

बिल्ली#

5s/kb, निष्ठा और गति सुनिश्चित करता है (के साथ रंग)

2× हिएफ़ कैनेस™ एडवांसफास्ट पीसीआर मास्टर मिक्स (डाई के साथ)

10164ईएस

5s/kb, निष्ठा और गति सुनिश्चित करता है (डाई के बिना)

2× हिएफ़ कैनेस™ एडवांसफास्ट पीसीआर मास्टर मिक्स

10163ईएस

83×Taq, उच्च पहचान दर (डाई के साथ)

2×हिएफ कैनेस™ प्लस पीसीआर मास्टर मिक्स (डाई के साथ)

10154ईएस

83×Taq एकल एंजाइम + बफर अलग

हिएफ़ कैनेस™ प्लस हाई-फिडेलिटी डीएनए पॉलीमरेज़

10153ईएस

जाँच करना