फ्लोरोसेंट क्वांटिटेटिव पीसीआर एक अत्यधिक संवेदनशील प्रयोग है जिसके लिए प्रयोगशाला कर्मियों द्वारा संचालन में उच्च स्तर की सटीकता की आवश्यकता होती है। इसलिए, qPCR प्रयोग प्रक्रिया के दौरान, हम अनिवार्य रूप से समस्याओं का सामना करते हैं:
I. गैर-प्रयोगात्मक कारकों से संबंधित मुद्दे
- प्रयोगशाला में कई qPCR प्रयोग परियोजनाएं हैं, तथा उपकरण व्यस्त हैं, जिसके कारण सावधानीपूर्वक तैयार किए गए प्रतिक्रिया मिश्रणों के निपटान की कोई स्पष्ट विधि नहीं है।
- मात्रात्मक नमूने असंख्य हैं, नमूनों को जोड़ने का कार्य कठिन है, तथा चक्कर आने के कारण नमूना जोड़ने में त्रुटि होने का जोखिम रहता है, जिसके कारण प्रयोगात्मक परिणाम अविश्वसनीय हो सकते हैं।
- मशीनों को लंबे समय तक चलाना, प्रयोगात्मक कार्यों की सीमित संख्या, तथा प्रयोगात्मक कार्यों को नियमित आधार पर योजना के अनुसार पूरा नहीं किया जा सकता।
- प्रयोगशाला उपकरणों को नए उपकरणों से प्रतिस्थापित किया जा रहा है, प्रयोगशाला में अनेक मात्रात्मक उपकरण हैं, तथा मात्रात्मक अभिकर्मक उपकरणों के अनुकूल नहीं हैं।
II. प्रायोगिक कारकों द्वारा सीमित मुद्दे
कम-प्रचुरता वाले जीन के साथ परिमाणीकरण संबंधी मुद्दे। जटिल प्राइमर डिजाइन और स्क्रीनिंग प्रक्रियाएँ, संवेदनशीलता, और प्रतिकृति कुओं की पुनरुत्पादकता...
क्यूपीसीआर अभिकर्मकों के अनुसंधान और विकास के लिए समर्पित एक अनुभवी निर्माता के रूप में, YEASEN ने सावधानीपूर्वक एक उच्च-प्रदर्शन qPCR प्रीमिक्स समाधान विकसित किया है – हाईफ़ यूनिकॉन™ यूनिवर्सल ब्लू qPCR SYBR ग्रीन मास्टर मिक्स, जो एक ही बार में उपर्युक्त प्रयोगात्मक समस्याओं को हल कर सकता है। इस उत्पाद में उपयोग किया जाने वाला यूनिवर्सल ROX पारंपरिक ROX की जगह लेता है, जो विभिन्न उपकरण प्लेटफ़ॉर्म पर ऑप्टिकल पथ अंतरों की भरपाई करता है, जिससे यह सभी qPCR उपकरणों के लिए उपयुक्त हो जाता है। इसके अतिरिक्त, उत्पाद एंटीबॉडी संशोधन विधि का उपयोग करता है और इसमें ऐसे योजक शामिल होते हैं जो जीन प्रवर्धन को बढ़ाते हैं, जिससे उत्पाद के प्रवर्धन प्रदर्शन में काफी सुधार होता है। यह वैज्ञानिक समुदाय में शोधकर्ताओं की उच्च-प्रदर्शन आवश्यकताओं को औद्योगिक उद्यमों की उच्च-दक्षता आवश्यकताओं के साथ पूरी तरह से संतुलित करता है।
उत्पाद की विशेषताएँ
- चौड़ा यंत्र अनुकूलता: प्रीमिक्स रोकना ए विशिष्ट प्रकार का संदर्भ रंग, को दूर ज़रूरत को समायोजित करना रॉक्स एकाग्रता।
- आसान अनुरेखण: नीला प्रीमिक्स अनुमति देता है के लिए प्रत्यक्ष VISUALIZATION को अंतर करना चाहे नमूना है गया जोड़ा गया, केवल द्वारा अवलोकन रंग।
- उच्च स्थिरता: प्रणाली है तैयार पर कमरा तापमान, और मिश्रित प्रणाली कर सकना होना संग्रहित पर 4 डिग्री सेल्सियस के लिए ऊपर को 24 घंटे बिना कोई परिवर्तन में परीक्षा परिणाम।
- तेज़ स्थापित करना: अनुकूल साथ दोनों मानक और तेज़ कार्यक्रम, अनुमति मात्रात्मक प्रयोग को होना पुरा होना में जैसा तेज़ जैसा 46 मिनट।
- उत्कृष्ट विस्तारण प्रदर्शन: उच्च विस्तारण क्षमता, अच्छा विशिष्टता, काबिल का का पता लगाने जीन पर अकेला कॉपी संख्या।
आदेश की जानकारी
| उत्पाद स्थिति | प्रोडक्ट का नाम | बिल्ली# |
| उच्च संवेदनशीलता सार्वभौमिक मात्रात्मक प्रीमिक्स | 11184ईएस | |
| रंग-ट्रैकिंग उच्च संवेदनशीलता रोशनी मात्रात्मक प्रीमिक्स | 11188ईएस | |
| 11189ईएस | ||
| 11190ईएस |
उत्पाद प्रदर्शन
1.उच्च संवेदनशीलता: एकल प्रतिलिपि तक का पता लगाने में सक्षम
चित्र 1. हाईफ़ यूनिकॉन™ यूनिवर्सल ब्लू प्रीमिक्स 7 ऑर्डर ऑफ़ मैग्नीट्यूड में टेम्पलेट राशि रेंज को प्रभावी ढंग से पहचान सकता है, जिसमें उच्च प्रवर्धन दक्षता और एक व्यापक रैखिक रेंज के भीतर एक अच्छा रैखिक संबंध है। इस्तेमाल किया गया टेम्पलेट 10^6 से 10^0 प्रतियों की सांद्रता के साथ 2 µL प्लास्मिड था, जो मानव IL23R जीन को बढ़ाता है।
2. का पता लगाने दर और विशेषता हैं अच्छा: व्यापक रूप से उपयुक्त को एम्प्लीमर्स साथ 30-70% जीसी सामग्री
चित्र 2. हाईफ़ यूनिकॉन™ यूनिवर्सल ब्लू प्रीमिक्स 30-70% GC सामग्री वाले एम्प्लीमर पर व्यापक रूप से लागू होता है, जो अत्यधिक उच्च विशिष्टता पहचान दर सुनिश्चित करता है। टेम्पलेट के रूप में 293T cDNA के 2 µL का उपयोग करते हुए, 200 bp एम्प्लीमर (GC% सामग्री 30%-70%) के लिए प्राइमर के 1000 जोड़े प्राइमर5 सॉफ़्टवेयर के साथ डिज़ाइन किए गए थे, और इनमें से 27 एम्प्लीमर को यादृच्छिक रूप से प्रवर्धित किया गया था।
3. उच्च रिज़ॉल्यूशन: 2-गुना के टेम्पलेट सांद्रता में अंतर को सटीक रूप से पहचान सकता है
चित्र तीन। हाईफ़ यूनिकॉन™ यूनिवर्सल ब्लू प्रीमिक्स 2-गुना के टेम्पलेट सांद्रता में अंतर को सटीक रूप से पहचान सकता है। इस्तेमाल किया गया टेम्पलेट 293T cDNA स्टॉक समाधान के 2 µL का 2-गुना ग्रेडिएंट कमजोरीकरण था, जो GAPDH जीन को बढ़ाता है।
4. डुप्लिकेट कुओं की अच्छी पुनरुत्पादकता: 90 डुप्लिकेट कुएँ
चित्र 4. हाईफ़ यूनिकॉन™ यूनिवर्सल ब्लू प्रीमिक्स उत्कृष्ट पुनरुत्पादकता प्रदर्शित करता है, जिसमें 90 डुप्लिकेट कुओं के प्रवर्धन वक्र उच्च संयोग दिखाते हैं, और सीटी मानों का मानक विचलन 0.2 से कम है। टेम्पलेट के रूप में 293T cDNA के 1 µL का उपयोग करके, GAPDH जीन को प्रवर्धित किया गया।
5.अच्छी स्थिरता: प्रीमिक्स को 50 बार जमाए जाने और पिघलाए जाने के बाद भी प्रवर्धन प्रदर्शन में कोई प्रभाव नहीं पड़ता है
| हिमीकरण-विगलन चक्र | 0 समय | 10 बार | 30 बार | 50 बार |
| औसत सीटी | 23.11 | 23.17 | 23.18 | 23.25 |
| ▲सीटी | - | 0.06 | 0.07 | 0.14 |
चित्र 5. हाईफ़ यूनिकॉन™ यूनिवर्सल ब्लू प्रीमिक्स 50 बार जमने और पिघलने के बाद प्रवर्धन प्रदर्शन में कोई बदलाव नहीं दिखाता है। टेम्पलेट के रूप में 293T cDNA के 1 µL का उपयोग करते हुए, C2orf68 जीन को प्रीमिक्स के साथ प्रवर्धित किया गया था जो अलग-अलग संख्या में फ्रीज-थॉ चक्रों से गुजरा था।
ग्राहक एफईडबैक
नमूना स्रोत: माउस डिम्बग्रंथि कैंसर सेल लाइन ID8, HM1
नमूना स्रोत: माउस एपिडीडिमल एडीपोज आरएनए
नमूना स्रोत: अरेबिडोप्सिस थालियाना पत्ती आरएनए
YEASEN qPCR मिक्स का उपयोग करके आंशिक रूप से प्रकाशित उच्च प्रभाव कारक वाला साहित्य
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