क्या आप अभी भी बहु-खंड या अति-लंबे खंड के समजातीय पुनर्योजन की कम दक्षता और कॉलोनियों की छोटी संख्या से परेशान हैं?
फिर भी वाहक या टुकड़ा अधिक कीमती है, कम उपज, कच्चे माल को बचाने के लिए, छोटे सिस्टम कम एकाग्रता बंधाव का उपयोग करें, लेकिन बंधाव दक्षता कम और परेशान है?
येसेन उत्पाद: उल्लेखनीय रूप से सुधार, कम सांद्रता, छोटी प्रणाली और बंधाव दक्षता के अल्ट्रा-लंबे टुकड़े, उच्च सकारात्मक क्लोनिंग दर, आपको आसानी से पूरा करने में मदद करते हैं बंधाव.
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पारंपरिक एंजाइम-प्रतिबंध क्लोनिंग विधियों के साथ एक-चरण क्लोनिंग की तुलना
तरीका | सम्मिलन खंड की तैयारी | प्रतिबंध स्थलों पर प्रतिबंध | सार्वभौमिक संपत्ति | कनेक्ट समय | सकारात्मक दर |
एक-चरणीय तीव्र पुनर्संयोजक-क्लोनिंग तकनीक | चरण 1 शुद्धिकरण | कोई नहीं | ★★★★★ | सबसे तेज़ समय 5 मिनट था | 95% तक |
प्रतिबंध पाचन और बंधन क्लोनिंग तकनीक | चरण 2 शुद्धिकरण | हाँ | ★★ | रात गुजारो | विभिन्न जीन बहुत भिन्न होते हैं |
उत्पाद लाभ
अभिविन्यास: 1-7 डीएनए खंड एक-चरण क्लोनिंग।
सरल: एक ट्यूब में कई टुकड़ों को जोड़ा जा सकता है।
तेज़: 5 मिनट में सबसे तेज़ बंधन।
उच्च दक्षता: उच्च सकारात्मक क्लोनिंग दर.
छोटी प्रणाली: कुल बंधाव प्रणाली 6 μL जितनी कम हो सकती है।
अधिक लम्बाई: बंधाव के लिए 25 केबी से अधिक (वाहक+खंड लम्बाई)।
प्रदर्शन प्रदर्शन
- एकल खंड 6 μL लघु प्रणाली का कुशल पुनर्संयोजन
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चित्र .1 10 एनजी कम-इनपुट एकल टुकड़े बंधे हुए थे 6 μL छोटे सिस्टम की गैर-पुनर्जीवन ग्रहणशील कोशिकाओं की स्थिति में.परिणामों से पता चला कि 10923ES का प्रदर्शन प्रतिस्पर्धी उत्पादों की तुलना में बेहतर था, जिसमें उच्च बंधन दक्षता, अधिक कॉलोनियाँ और 100% की सकारात्मक दर थी। AB: पुनर्गठित रूपांतरण प्लेट। वाहक (10 kb) से सम्मिलित खंड (1 kb) का मोलर अनुपात 1:2 था। C: सम्मिलित खंड की PCR पहचान। M: YEASEN 10505ES। वाहक आयतन: 40 ng/6 μL प्रतिक्रिया प्रणाली, प्रतिक्रिया की स्थिति: 50℃, 15 मिनट।
- बहु-खंड कुशल पुनर्संयोजन
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अंक 2 छः खंड (7.6 केबी) लिगेटिड। परिणामों से पता चला कि 10923ES का प्रदर्शन प्रतिस्पर्धी उत्पादों की तुलना में बेहतर था, जिसमें अधिक कॉलोनियाँ और 100% की सकारात्मक दर थी। AB: पुनर्गठित रूपांतरण प्लेट। वाहक (11.6 kb) से सम्मिलित खंड (7.6 kb) का मोलर अनुपात 1:2 था। C: सम्मिलित खंड की PCR पहचान। M: YEASEN 10505ES, PCR लंबाई 2.6 kb। वाहक आयतन: 200 ng/20 μL प्रतिक्रिया प्रणाली, प्रतिक्रिया की स्थिति: 50℃, 50 मिनट।
- कम सांद्रता बहु खंड कुशल पुनर्संयोजन
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चित्र 3 कम सांद्रता वाले पांच और छह टुकड़ों को अलग-अलग बांधें। परिणामों से पता चला कि 10923ES ने कम सांद्रता पर स्थिर कनेक्टिविटी प्रदर्शित की, जिसमें उच्च जीवाणु गणना और 100% सकारात्मकता दर थी। AB: रिकॉम्बिनेंट कन्वर्जन प्लेट। CD: सम्मिलन खंड PCR पहचान वैद्युतकणसंचलन छवि, M: YEASEN 10505ES, PCR लंबाई 2.6 kb।
- अभिकर्मक स्थिरता
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चित्र 4 7 दिनों तक 37 डिग्री सेल्सियस पर रखे जाने के बाद, परिणामों से पता चला कि 10923ES कम सांद्रता पर पांच और छह टुकड़ों को जोड़ने में स्थिर रहा। AF: रिकॉम्बिनेंट कन्वर्जन प्लेट। GH: इंसर्शन फ्रैगमेंट PCR पहचान वैद्युतकणसंचलन छवि, M: YEASEN 10505ES, PCR लंबाई 2.6 kb.
ग्राहक मामला
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लघु प्रणालियों का कुशल पुनर्गठन
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चित्र 5 10923ES को एक एकल खंड से जोड़ा गया था 10 μL छोटी प्रतिक्रिया प्रणाली, 100% की सकारात्मक दर के साथ। A: पुनर्गठित रूपांतरण प्लेट। B: सम्मिलित टुकड़े की पीसीआर पहचान। वाहक आकार: 5,631 बीपी; लक्ष्य टुकड़े का आकार: 1,384 बीपी।
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चित्र 6 10 μL लघु प्रणाली एकल खंड जंक्शन और बिंदु उत्परिवर्तन क्लोन, 100% सकारात्मक दर। ए और सी: पुनर्संयोजन परिवर्तन प्लेटें। बी: सम्मिलित टुकड़ों की पीसीआर पहचान, लेन 1-5 कॉलोनी 1, कॉलोनी 2, नकारात्मक नियंत्रण, सकारात्मक नियंत्रण (टेम्पलेट के रूप में जीनोम), सकारात्मक नियंत्रण (टेम्पलेट के रूप में पीसीआर शुद्ध टुकड़ा) हैं। डी: सम्मिलित टुकड़ों की पीसीआर पहचान का इलेक्ट्रोफोरेग्राम।
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कम सांद्रता वाले छोटे टुकड़ों का कुशल पुनर्संयोजन
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चित्र 7 10923ES को जोड़ता हुआ कम सांद्रता वाले टुकड़ेप्रतिस्पर्धी उत्पादों की तुलना में, कॉलोनियों की संख्या अधिक थी, और सकारात्मक दर (10/11)> 90.9% थी। AB: पुनर्गठित रूपांतरण प्लेट। C: सम्मिलित टुकड़े की पीसीआर पहचान। वाहक आकार: 3,000 बीपी; लक्ष्य टुकड़े का आकार: 441 बीपी।
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कुशल और तेज बहु खंड बंधाव
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अंजीर।8 10923ES चार खंड बंधन, उच्च GC और लघु खंड संयोजन कनेक्शन, S ब्रांड की तुलना में, 10923ES की उच्च जीवाणु गणना और 100% की सकारात्मक दर है। D: पुनः संयोजक रूपांतरण टैबलेट। E: सम्मिलित खंड अनुक्रमण पहचान मानचित्र। F: सेंगर अनुक्रमण ने वेक्टर और खंडों के बीच सफल कनेक्शन की पुष्टि की, और कनेक्शन साइट पर अनुक्रमण सही था।
स्ट्रेंथ स्टार उत्पाद अनुशंसा
10923ES ऑर्डर चैनल
उत्पाद अभिविन्यास | एनए एम इ | कला.सं. | एसविशिष्टताएँ |
एक चरण में 1 - 7 टुकड़ों को जोड़ा गया और पुनर्संयोजन प्रतिक्रिया सबसे तेज़ 5 मिनट में पूरी हुई | हिएफ़ क्लोनटीएम यूनिवर्सल II वन स्टेप क्लोनिंग किट | 20 टी/50 टी |
आरउत्तेजित पीउत्पादों
उत्पाद अभिविन्यास | एनए एम इ | कला.सं. | एसविशिष्टताएँ |
उच्च-निष्ठा पी.सी.आर. | 2× हिएफ़ कैनेसटीएम एडवांसफास्ट पीसीआर मास्टर मिक्स (डाई के साथ) | 1 एमएल/5×1 एमएल | |
रैपिड पीसीआर अपग्रेड, कॉलोनी पीसीआर हो सकता है और जटिल टेम्पलेट प्रवर्धन के लिए उपयुक्त है | 2×हिएफ़टीएम अल्ट्रा-रैपिड II हॉटस्टार्ट पीसीआर मास्टर मिक्स | 1 एमएल/5×1 एमएल |