न्यूक्लिक एसिड सभी आणविक जीव विज्ञान अनुसंधान की नींव के रूप में कार्य करता है। इसके अलावा, निकाले गए न्यूक्लिक एसिड की गुणवत्ता भी डाउनस्ट्रीम प्रयोगों की सफलता या विफलता को निर्धारित करने वाले प्रमुख कारकों में से एक है। न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण अभिकर्मकों को विकसित करते समय, पारंपरिक रासायनिक घटकों के अलावा, कुछ छोटे अणु न्यूक्लिक एसिड या एंजाइम निष्कर्षण दक्षता में काफी सुधार कर सकते हैं या गैर-लक्ष्य पदार्थों के हस्तक्षेप को दूर कर सकते हैं और न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण में महत्वपूर्ण घटक बन सकते हैं।
न्यूक्लिक एसिड अवक्षेपण के लिए सहायक पदार्थों पर
वाहक आरएनए
- अवधारणा और कार्य वाहक आरएनए
वाहक आरएनए, जिसे चीनी में न्यूक्लिक एसिड अवक्षेपण सहायता के रूप में भी जाना जाता है। न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण प्रक्रिया में, निष्कर्षण के लिए उपयोग की जाने वाली अपकेंद्रित्र ट्यूब ज्यादातर पॉलीप्रोपाइलीन से बनी होती हैं। ट्यूब की दीवार पर स्थैतिक बिजली होती है, जो न्यूक्लिक एसिड को सोख लेगी। निष्कर्षण और शुद्धिकरण प्रक्रिया में वाहक आरएनए का उपयोग करने से न्यूक्लिक एसिड को इलेक्ट्रोस्टैटिक प्रभाव को हटाने में मदद मिल सकती है, यह सुनिश्चित किया जा सकता है कि न्यूक्लिक एसिड को शुद्धिकरण स्तंभ पर अच्छी तरह से अवशोषित किया जा सकता है, क्षालन दक्षता में सुधार किया जा सकता है, और इस प्रकार नमूने में न्यूक्लिक एसिड की यथासंभव पुनर्प्राप्ति प्राप्त की जा सकती है।
- वाहक आरएनए के सामान्य प्रकार
न्यूक्लिक एसिड वर्षण के लिए सहायक पदार्थ के रूप में, वाहक आरएनए के कई प्रकार होते हैं, जैसे पॉलीए पोटेशियम नमक, कुल ई. कोली आरएनए, कुल यीस्ट आरएनए, टीआरएनए, आदि।
- उपयोग में आम समस्याएं वाहक आरएनए
क्या कैरियर आरएनए को कुछ समय के लिए कमरे के तापमान पर रखने के बाद भी इस्तेमाल किया जा सकता है? क्या कैरियर आरएनए के क्षरण से इसके उपयोग पर असर पड़ता है? क्या कैरियर आरएनए डाउनस्ट्रीम प्रयोगों को प्रभावित करता है?
वाहक आरएनए को आरएनए प्रोटेक्टेंट में घोला जाता है। तरल वाहक आरएनए का 37 डिग्री सेल्सियस या कमरे के तापमान पर थोड़े समय (7 दिनों के भीतर) के लिए रखे जाने पर बहुत कम प्रभाव पड़ता है। अनिवार्य रूप से, वाहक आरएनए 500 एनटी से 1000 एनटी की सीमा में एक टुकड़ा है। मामूली गिरावट सामान्य उपयोग को प्रभावित नहीं करती है। फ्लोरोसेंट क्वांटिटेटिव पीसीआर जैसे डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों के लिए, वाहक आरएनए का सीटी मूल्य पर कोई प्रभाव नहीं पड़ता है। एनजीएस जैसे डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों के लिए, इसे वास्तविक जरूरतों के अनुसार जोड़ा जा सकता है।
- उत्पाद परिचय वाहक आरएनए
येसेन का कैरियर आरएनए यीस्ट से प्राप्त आरएनए है। इसमें कोई अवशिष्ट डीएनएस या आरएनस एंजाइम नहीं है, और प्रोटीन और डीएनए की अवशिष्ट सामग्री बेहद कम है। इसका उपयोग वायरल न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और ट्रेस डीएनए निष्कर्षण जैसे प्रयोगों में किया जा सकता है। निकाले गए न्यूक्लिक एसिड का उपयोग आरटी-पीसीआर और आरटी-क्यूपीसीआर जैसे बाद के प्रयोगों में किया जा सकता है। यह उत्पाद सुविधाजनक प्रत्यक्ष उपयोग, लंबी दूरी के परिवहन और भंडारण के लिए तरल और लाइओफिलाइज्ड पाउडर फॉर्मूलेशन में उपलब्ध है।
प्रोडक्ट का नाम | उत्पाद संख्या | विनिर्देश | भंडारण की स्थिति और शेल्फ लाइफ |
वाहक आरएनए, 6 μg/μL | 19701ईएस | 1 एमएल / 5 एमएल / 100 एमएल | -25 से -15 °C पर भण्डारित। शेल्फ लाइफ 2 वर्ष है। |
वाहक आरएनए पाउडर, 216 μg/ट्यूब | 19703ईएस | 1 ट्यूब / 100 ट्यूब / 1000 ट्यूब | कमरे के तापमान पर संग्रहीत. शेल्फ जीवन 2 साल है. |
19704ईएस | 1 ट्यूब / 100 ट्यूब / 1000 ट्यूब | कमरे के तापमान पर संग्रहीत. शेल्फ जीवन 2 साल है. |
रैखिक एक्रिलामाइड विलयन
- रैखिक एक्रिलामाइड समाधान की अवधारणा और कार्य
लीनियर एक्रिलामाइड, जिसका अंग्रेजी नाम लीनियर एक्रिलामाइड (लीनियर पॉलीएक्रिलामाइड, संक्षिप्त रूप में एलपीए) है, एक सहअवक्षेपक है जो न्यूक्लिक एसिड शोधन प्रक्रिया के दौरान न्यूक्लिक एसिड को अवक्षेपित करने में मदद करता है।
- रैखिक एक्रिलामाइड विलयन की विशेषताएं
यह एक तटस्थ वाहक है और गैर-जैविक मूल का है। इसलिए, इसमें संभावित न्यूक्लिक एसिड या न्यूक्लिऐस संदूषण नहीं होता है।
यह A260/A280 रीडिंग में हस्तक्षेप नहीं करेगा तथा पॉलीमरेज़ और प्रतिबंधन एंडोन्यूक्लिऐस गतिविधियों को बाधित नहीं करेगा।
यह अन्य आणविक जीव विज्ञान अनुप्रयोगों जैसे पीसीआर और एंजाइमेटिक पाचन के साथ संगत है।
यह पिकोग्राम-स्तर या उससे ऊपर के डीएनए और आरएनए (ओलिगो सहित) को अवक्षेपित करने में सहायता कर सकता है। पुनर्प्राप्त करने योग्य खंड की लंबाई 20 न्यूक्लियोटाइड से ऊपर है, और दोनों एकल-स्ट्रैंडेड और डबल-स्ट्रैंडेड न्यूक्लिक एसिड लागू होते हैं।
- उत्पाद परिचय
प्रोडक्ट का नाम | उत्पाद संख्या | विनिर्देश | भंडारण की स्थिति और शेल्फ लाइफ |
रैखिक एक्रिलामाइड समाधान(5 मिलीग्राम/एमएल) | 10408ईएस | 1 एमएल | 4 पर संग्रहीत °C. शेल्फ लाइफ 3 है साल। |
न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण सहायक एंजाइम
आरएनएसे ए
- आरएनएएस ए की अवधारणा और कार्य
राइबोन्यूक्लिअस ए (RNase A), एक एंडोरिबोन्यूक्लिअस के रूप में, विशेष रूप से एकल-स्ट्रैंडेड RNA पर साइटोसिन (C) या यूरैसिल (U) अवशेषों को नष्ट करता है। राइबोन्यूक्लिअस ए (RNase A) का सबसे आम अनुप्रयोग प्लास्मिड DNA या जीनोमिक DNA की तैयारी के दौरान RNA को हटाना है। इसके अलावा, इस उत्पाद का उपयोग आणविक जीव विज्ञान प्रयोगों जैसे RNase सुरक्षा परख और RNA अनुक्रम विश्लेषण में भी किया जा सकता है।
- आरएनेज़ ए की विशेषताएँ
आरएनेज ए बोवाइन अग्न्याशय से प्राप्त होता है। इसमें एंडो- और एक्सोन्यूक्लिएज डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिएज का कोई संदूषण नहीं है। इसे बिना प्रीहीटिंग के सीधे इस्तेमाल किया जा सकता है और यह उच्च तापमान वाले वातावरण के लिए प्रतिरोधी है।
- उत्पाद परिचय
प्रोडक्ट का नाम | उत्पाद संख्या | विनिर्देश | भंडारण की स्थिति और शेल्फ लाइफ |
आरएनसे ए(100 मिलीग्राम/एमएल) | 10406ईएस | 1 एमएल | -20°C पर भण्डारित। शेल्फ लाइफ 2 वर्ष है। |
आरएनएसे ए(10 मिलीग्राम/एमएल) | 10405ईएस | 1एमएल | कमरे के तापमान पर भंडारित करें।शेल्फ जीवन 1 है साल। |
10407ईएस | 100मिग्रा/1 ग्राम | कमरे के तापमान पर संग्रहीत. शेल्फ जीवन 2 साल है. |
डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिऐस I (DNase I)
डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिअस I (DNase I), विभिन्न कोशिकाओं और ऊतकों में पाया जाने वाला एक एंडोन्यूक्लिअस है, जो पाइरीमिडीन के समीप फॉस्फोडाइस्टर बॉन्ड को लक्षित करता है और उसे तोड़ता है, जिससे 5' छोर पर फॉस्फेट समूह और 3' छोर पर हाइड्रॉक्सिल समूह वाले पॉलीन्यूक्लियोटाइड बनते हैं। औसत न्यूनतम पाचन उत्पाद एक टेट्रा-न्यूक्लियोटाइड बहुलक है। DNase DNA के विभिन्न रूपों को उत्प्रेरित कर सकता है, जैसे कि सिंगल-स्ट्रैंडेड DNA, डबल-स्ट्रैंडेड DNA और यहां तक कि क्रोमेटिन (जिसकी दरार दर हिस्टोन से प्रभावित होती है)। आणविक जीव विज्ञान प्रयोगों में, इसका उपयोग अक्सर प्रोटीन से DNA को हटाने या DNA में लेबल किए गए बेस को डालने के लिए DNA में निक्स डालने के लिए किया जाता है।
2.डीएनएज़ I की विशेषताएँ
DNase I की इष्टतम कार्य सीमा pH 7-8 है, और इसकी गतिविधि Ca पर निर्भर करती है2+ और इसे Co जैसे द्विसंयोजी धातु आयनों द्वारा सक्रिय किया जा सकता है2+, एमएन2+, जेडएन2+, आदि 5 मिमी सीए2+ एंजाइम को हाइड्रोलाइज्ड होने से बचा सकता है। Mg की उपस्थिति में2+यह एंजाइम डीएनए के किसी भी स्ट्रैंड पर किसी भी स्थान को बेतरतीब ढंग से पहचान सकता है और काट सकता है; जबकि Mn की उपस्थिति में2+यह डीएनए के दोनों धागों को एक साथ पहचान सकता है और लगभग एक ही स्थान पर काट सकता है।
3.उत्पाद परिचय
प्रोडक्ट का नाम | उत्पाद संख्या | विनिर्देश | भंडारण की स्थिति और शेल्फ लाइफ |
गोजातीय अग्न्याशय से डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिऐस I(DNase I) | 10607ईएस | 15 केयू/10×15केयू | -20°C पर भण्डारित। शेल्फ लाइफ 2 वर्ष है। |
गोजातीय अग्न्याशय से डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिऐस I(DNase I) | 10608ईएस | 25 मिलीग्राम/100 मिलीग्राम/1 ग्राम | -20°C पर भण्डारित। शेल्फ लाइफ 2 वर्ष है। |
प्रोटीनेज़ K
1.प्रोटीनेज K की अवधारणा और कार्य
प्रोटीनेज K (प्रोटीनेज K) एक सीरीन प्रोटीज है जिसमें दरार गतिविधियों की एक विस्तृत श्रृंखला है। इसका सापेक्ष आणविक भार लगभग 29.3 kDa है और यह एलिफैटिक अमीनो एसिड और एरोमैटिक अमीनो एसिड के कार्बोक्सिल-टर्मिनल पेप्टाइड बॉन्ड को तोड़ सकता है। प्रोटीनेज K के अनुप्रयोगों की एक विस्तृत श्रृंखला है और इसका उपयोग स्पंदित-क्षेत्र जेल वैद्युतकणसंचलन, वेस्टर्न ब्लॉटिंग और डीएनए और आरएनए तैयारियों में न्यूक्लिअस को हटाने के लिए गुणसूत्र डीएनए तैयार करने जैसे प्रयोगों में किया जा सकता है। एसडीएस (1%) जैसे डीनेचुरिंग एजेंट इसकी गतिविधि को बढ़ा सकते हैं।
2.प्रोटीनेज K की विशेषताएँ
आनुवंशिक रूप से पुनः संयोजक खमीर उपभेद से व्युत्पन्न।
RNase और DNase से मुक्त.
यूरिया और एसडीएस में सक्रिय और स्थिर।
विस्तृत pH श्रेणी (pH 4.0 - 12.0) में सक्रिय, तथा इष्टतम pH श्रेणी pH 7.5 - 9.0 है।
प्रोडक्ट का नाम | उत्पाद संख्या | विनिर्देश | भंडारण की स्थिति और शेल्फ लाइफ |
10401ईएस | 100मिग्रा/1ग्राम/5 ग्राम/100ग्राम | 4°C पर संग्रहीत। शेल्फ जीवन 3 है साल। | |
प्रोटीनेज़ K सोल्यूशन(20 mg/mL) | 10412ईएस | 1एमएल/10एमएल/25एमएल/500एमएल | 4°C पर संग्रहीत। शेल्फ जीवन 2 है साल। |
प्रोटीनेज़ K सॉल्यूशन(20 mg/mL) | 10410ईएस | 1एमएल/10एमएल/25एमएल/500एमएल | 4°C पर संग्रहीत। शेल्फ जीवन 2 है साल। |
आरएनए स्टेबलाइजर
पशु और पौधों के ऊतकों के लिए आरएनए स्टेबलाइजर समाधान
1.पशु और पादप ऊतकों के लिए आरएनए स्टेबलाइजर समाधान का कार्य
आरएनएज़ पर्यावरण में व्यापक रूप से मौजूद हैं और जानवरों और पौधों के ऊतकों, रक्त, शरीर के तरल पदार्थ आदि के ताजा एकत्र नमूनों में आरएनए को ख़राब करने की बहुत संभावना है। जानवरों और पौधों के ऊतकों के लिए आरएनएसेफ टिशू स्टेबलाइज़र (आरएनएसेफ टिशू स्टेबलाइज़र) विशेष रूप से एकत्र नमूनों में आरएनए को स्थिर और संरक्षित करने के लिए विकसित किया गया है। एक गैर-विषाक्त समाधान के रूप में, यह ऊतकों में तेज़ी से प्रवेश कर सकता है और अंतर्जात आरएनएज़ को निष्क्रिय कर सकता है।
2.पशु और पौधे के ऊतकों के लिए आरएनए स्टेबलाइजर समाधान की विशेषताएं
संचालित करने में बेहद आसान: बस ताजा ऊतकों को उचित आकार (≤0.5 सेमी) के ऊतक ब्लॉकों में काटें और उन्हें आरएनएसेफ की मात्रा से 5 से 10 गुना अधिक मात्रा में डुबोएं।
लंबी स्थिरीकरण अवधि: आरएनएसेफ से संक्रमित ऊतकों/कोशिकाओं को 37°C पर 1 दिन, कमरे के तापमान पर 1 सप्ताह, 4°C पर 4 सप्ताह तथा लंबी अवधि के लिए -20°C/-80°C पर संग्रहित किया जा सकता है।
विस्तृत डाउनस्ट्रीम अनुकूलता: यह लगभग सभी आरएनए अलगाव विधियों के साथ संगत है, जैसे कि हाईएफ़टीएम कुल आरएनए निष्कर्षण अभिकर्मक (कैटलॉग संख्या: 10606ES60), और लगभग सभी वाणिज्यिक आरएनए निष्कर्षण किट, जिसमें केन्द्रापसारक स्तंभ निष्कर्षण विधि और चुंबकीय मनका शुद्धिकरण विधि शामिल हैं।
सामग्रियों का व्यापक अनुप्रयोग: इसका उपयोग विभिन्न जानवरों और पौधों के ऊतकों (जैसे मस्तिष्क, हृदय, यकृत, अग्न्याशय, गुर्दे, प्लीहा, वृषण, मांसपेशियों, पौधों के तने और पत्तियों आदि) के संरक्षण के लिए किया जा सकता है, और खमीर, ऊतक संवर्धन कोशिकाओं आदि के लिए भी किया जा सकता है।
3.उत्पाद परिचय
प्रोडक्ट का नाम | उत्पाद संख्या | विनिर्देश | भंडारण की स्थिति और शेल्फ लाइफ |
आरएनएसेफ टिशू स्टेबलाइजर आरएनएसेफ | 10604ES60 | 100 एमएल | कमरे के तापमान पर संग्रहीत. शेल्फ जीवन 5 है साल। |
संबंधित उत्पाद
प्रोडक्ट का नाम | उत्पाद संख्या | विनिर्देश | भंडारण की स्थिति और शेल्फ लाइफ |
लाइसोजाइम | 10402ईएस | 5/50 जी | -20°C पर संग्रहीत। शेल्फ लाइफ 3 है साल। |
लाइटिकेज़ (10 U/μL) | 10403ईएस | 1500/3000/10000 यू | संग्रहित स्थान -20° सेल्सियस. |
स्नेलेज | 10404ईएस | 5/10 जी | 2-8°C पर संग्रहीत। शेल्फ लाइफ 2 है साल। |
आरएनएसेफ-आईसीई | 10605ईएस | 100 एमएल | कमरे के तापमान पर संग्रहीत.शेल्फ जीवन 2 है साल। |