विवरण
हिएफ़ कैनेसटीएम यूरैसिल+ हाई-फिडेलिटी डीएनए पॉलीमरेज़, की एक नई पीढ़ी है उच्च-निष्ठा डीएनए Pfu DNA पॉलीमरेज़ पर आधारित पॉलीमरेज़। हाइफ़ कैनेसटीएम यूरेसिल+ हाई-फिडेलिटी डीएनए पॉलीमरेज़ जटिल टेम्पलेट्स के लिए तेज़ और सटीक पीसीआर प्रतिक्रियाओं को सक्षम बनाता है। इसकी निष्ठा में उल्लेखनीय सुधार हुआ है, और यह dUTP-युक्त प्राइमर/टेम्प्लेट/dNTPs का उपयोग करने के कारण होने वाली प्रवर्धन विफलता से पूरी तरह से बचता है। उत्पाद एक अनुकूलित एंजाइम बफर और पीसीआर बढ़ाने वाले घटकों के अतिरिक्त से सुसज्जित है, जो एंजाइम को जटिल टेम्पलेट्स के प्रवर्धन के लिए उपयुक्त, टेम्पलेट्स की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए अत्यधिक कुशल और अनुकूलनीय बनाता है।
उत्पाद घटक
| घटक संख्या | अवयव | बिल्ली#/आकार | |
| 10145ईएस60 | 10145ES76 | ||
| 10145-ए | हिएफ़ कैनेस™ यूरैसिल+ हाई-फ़िडेलिटी डीएनए पॉलीमरेज़ (1 U/μL) | 100 μएल | 500 μएल |
| 10145-बी | 2×कैनेस™ यूरैसिल+ पीसीआर बफर (Mg2+, dNTPs युक्त) | 1 एमएल×3 | 1 एमएल×15 |
शिपिंग और भंडारण
घटकों को बर्फ के पैक के साथ भेजा जाता है और इन्हें -20°C पर 1 वर्ष तक संग्रहीत किया जा सकता है।
उत्पाद व्यवहार्यता
डीयूटीपी-युक्त प्राइमर्स/टेम्पलेट्स/डीएनटीपी का उपयोग करके उच्च-निष्ठा लाइब्रेरी प्रवर्धन।
चेतावनी
1. अपनी सुरक्षा और स्वास्थ्य के लिए, कृपया ऑपरेशन के समय लैब कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनें।
2. केवल अनुसंधान के लिए उपयोग!
निर्देश
हिएफ़ कैनेसटीएम यूरेसिल+ हाई-फ़िडेलिटी डीएनए पॉलीमरेज़ का इस्तेमाल पारंपरिक हाई-फ़िडेलिटी एंजाइम की तुलना में थोड़े अलग तरीके से किया जाता है। कृपया उपयोग से पहले निर्देशों को ध्यान से पढ़ें।
1. अनुशंसित प्रतिक्रिया प्रणाली
सभी ऑपरेशन बर्फ पर किए जाने चाहिए। 2×कैनेसटीएम यूरेसिल+ पीसीआर बफर को पिघलने के बाद अच्छी तरह से मिलाया जाना चाहिए। सिस्टम कॉन्फ़िगरेशन से पहले, कृपया पीसीआर उपकरण को पहले से गरम करें। घटकों को जोड़ने के बाद, एक पिपेट द्वारा नमूने को अच्छी तरह से मिलाएं और इसे ट्यूब के नीचे तक घुमाएं, फिर इसे प्रवर्धन के लिए पहले से गरम किए गए पीसीआर उपकरण में रखें। उपयोग के बाद, सभी घटकों को भंडारण के लिए -20 °C पर वापस कर दें।
तालिका 1. पीसीआर प्रवर्धन प्रतिक्रिया
| अवयव | आयतन |
| टेम्पलेट या बंधाव उत्पाद | एक्स µएल |
| 2×कैनेसTM यूरैसिल+ पीसीआर बफर (Mg2+, dNTPs युक्त) | 25 µएल |
| फॉरवर्ड प्राइमर (10-25 μM) | 1-2.5 µएल |
| रिवर्स प्राइमर (10-25 μM) | 1-2.5 µएल |
| हाईफ़ कैनेसेTM यूरेसिल+ हाई-फ़िडेलिटी डीएनए पॉलीमरेज़ (1 U/µL) | 1 µएल |
| डीडीएच2ओ | कुल 50 µL |
[नोट्स]:
1) अभिकर्मक: उपयोग से पहले प्रत्येक घटक को पर्याप्त रूप से पिघलाएं;
2) टेम्पलेट्स: शुद्ध उच्च गुणवत्ता वाले डीएनए टेम्पलेट्स के उपयोग से प्रवर्धन की दक्षता और सफलता दर में काफी सुधार हो सकता है;
3)dNTPs: अनुशंसित अंतिम dNTPs सांद्रता 200 μM है। किट में दिए गए dNTPs में dUTP नहीं होता है। यदि विशेष परिस्थितियों में dUTP युक्त टेम्पलेट तैयार करने की आवश्यकता होती है, तो 400 μM की अंतिम सांद्रता में अतिरिक्त dUTP मिलाया जा सकता है।
4) पॉलीमरेज़ सांद्रता: 1 U/50 μL अनुशंसित है। इसे 0.5-2 U/50 μL के बीच अनुकूलित किया जा सकता है, 2 U/50 μL से अधिक न करें। 3 '→5' एक्सोन्यूक्लिड गतिविधि के कारण प्राइमर को खराब करने से पॉलीमरेज़ को रोकने के लिए, अंतिम चरण में प्रतिक्रिया प्रणाली में पॉलीमरेज़ को जोड़ने का सुझाव दिया जाता है।
5) Mg2+ अंतिम सांद्रता: सिस्टम की अंतिम सांद्रता 2 mM है। यदि आपकी विशेष ज़रूरतें हैं, तो कृपया हमारी कंपनी से कम Mg2+ सांद्रता या बिना Mg2+ के बफर उपलब्ध कराने के लिए कहें।
2. अनुशंसित प्रतिक्रिया प्रक्रिया
तालिका 2. पीसीआर प्रवर्धन प्रतिक्रिया प्रक्रिया
| कदम | तापमान | अवधि | चक्रों की संख्या |
| प्रारंभिक विकृतीकरण | 98° सेल्सियस | 1 मिनट | 1 |
| विकृतीकरण | 98° सेल्सियस | 10 सेकंड | 1~15 |
| एनीलिंग | 60 डिग्री सेल्सियस | 30 सेकंड | |
| विस्तार | 72° सेल्सियस | 30 सेकंड | |
| अंतिम विस्तार | 72° सेल्सियस | 5 मिनट | 1 |
| पकड़ना | 4 डिग्री सेल्सियस | - | - |
[नोट्स]:
1) प्रारंभिक विकृतीकरण तापमान और समय: 98 डिग्री सेल्सियस अनुशंसित है। प्लास्मिड डीएनए जैसे सरल टेम्पलेट्स के लिए अनुशंसित समय 30 सेकंड है, लाइब्रेरी के लिए 1 मिनट, सीडीएनए और जीनोमिक डीएनए जैसे जटिल टेम्पलेट्स के लिए 3 मिनट और उच्च जीसी सामग्री वाले टेम्पलेट्स के लिए 5-10 मिनट है।
2) एनीलिंग तापमान और समय: 60 डिग्री सेल्सियस की सिफारिश की जाती है, या ज़रूरतों के हिसाब से प्राइमर एनीलिंग के लिए इष्टतम तापमान खोजने के लिए तापमान ढाल निर्धारित किया जा सकता है। अनुशंसित एनीलिंग समय 20 सेकंड है और इसे 10-30 सेकंड के भीतर समायोजित किया जा सकता है। बहुत लंबा एनीलिंग समय जेल पर प्रवर्धित उत्पादों के फैलाव का कारण बन सकता है।
3) विस्तार तापमान और समय: 72℃ अनुशंसित है। विस्तार समय वास्तविक आवश्यकताओं के अनुसार समायोजित किया जाता है।
भुगतान और सुरक्षा
आपकी भुगतान जानकारी सुरक्षित रूप से संसाधित की जाती है। हम क्रेडिट कार्ड के विवरण को संग्रहीत नहीं करते हैं और न ही आपके क्रेडिट कार्ड की जानकारी तक पहुंच है।
जाँच करना
आपको यह भी पसंद आ सकता हैं
उपवास
यह उत्पाद केवल शोध उद्देश्यों के लिए है और मनुष्यों या जानवरों में चिकित्सीय या नैदानिक उपयोग के लिए अभिप्रेत नहीं है। उत्पाद और सामग्री येसेन बायोटेक्नोलॉजी के स्वामित्व वाले पेटेंट, ट्रेडमार्क और कॉपीराइट द्वारा संरक्षित हैं। ट्रेडमार्क प्रतीक मूल देश को इंगित करते हैं, जरूरी नहीं कि सभी क्षेत्रों में पंजीकरण हो।
कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।