विवरण
Hieff® रक्त उन्नत प्रत्यक्ष पीसीआर किट एक किट है, जो डीएनए शुद्धिकरण या नमूना पूर्व उपचार के बिना सीधे पूरे रक्त के नमूनों को बढ़ा सकता है, और ताजा रक्त, ठंडा (जमे हुए) रक्त, और पारंपरिक एंटीकोगुलेंट्स जैसे EDTA, हेपरिन, साइट्रेट आदि युक्त वाणिज्यिक सूखे रक्त के दागों के साथ संगत है। किट में उच्च निष्ठा और पीसीआर अवरोधकों के प्रतिरोध के साथ एक आनुवंशिक रूप से इंजीनियर डीएनए पॉलीमरेज़ संयोजन, मजबूत बढ़ाव कारक, प्रवर्धन वृद्धि कारक और अनुकूलित बफर प्रणाली के साथ 2 × Hieff® रक्त उन्नत पीसीआर बफर शामिल है, जो तेजी से विस्तार की स्थिति के तहत 8 केबी जीनोमिक टुकड़ों को कुशलतापूर्वक बढ़ाता है
विशेष विवरण
| फिडेलिटी (बनाम टैक) | 1 × |
| ठोस शुरुआत | हाँ |
| आगे निकलना | 3'-ए |
| पोलीमर्स | टैक डीएनए पॉलीमरेज़ (कैट: 10726) |
अवयव
| नहीं। | नाम | 10188ES20 | 10188ES60 |
| 10188-ए | 2× हाईफ़® रक्त उन्नत पीसीआर बफर | 500 μएल | 2.5 एमएल |
| 10188-बी | हिएफ़® उन्नत उच्च-निष्ठा डीएनए पोलीमरेज़ मिश्रण | 20 μएल | 100 μएल |
| 10188-सी | सकारात्मक नियंत्रण प्राइमर मिश्रण (10 μM प्रत्येक) | 100 μएल | 200 μएल |
| 10188-डी | 10× डीएनए लोडिंग बफर | 1 एमएल | 1 एमएल |
निर्देश
अनुशंसित पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणालियाँ.
| अवयव | आयतन (μL) |
| डीडीएच2हे | 50 μL तक |
| 2× हाईफ़® रक्त उन्नत पीसीआर बफर | 25 μएल |
| फॉरवर्ड प्राइमर (10 μM) | 2 μएल |
| रिवर्स प्राइमर (10 μM) | 2 μएल |
| हिएफ़® उन्नत उच्च-निष्ठा डीएनए पोलीमरेज़ मिश्रण | 1 μएल |
| रक्त नमूना | एक्स |
2. प्रति प्राइमर 0.4 μM की अंतिम सांद्रता की सिफारिश की जाती है, इससे अधिक सांद्रता के परिणामस्वरूप गैर-विशिष्ट प्रवर्धन होगा।
3. इष्टतम संपूर्ण रक्त टेम्पलेट सांद्रता 0.5% से 20% तक होती है, और अनुशंसित उपयोग प्रारंभिक परीक्षण स्थिति के रूप में 10% है, अर्थात, 50 μL प्रतिक्रिया प्रणाली में टेम्पलेट के रूप में 5 μL संपूर्ण रक्त जोड़ा जाता है, रक्त के थक्कों को एस्पिरेट करने से बचने के लिए सावधानी बरती जाती है। व्हाटमैन® फ़िल्टर कार्ड पर संग्रहीत सूखे रक्त के धब्बों के लिए, रक्त के धब्बों के साथ कागज के लगभग 1 मिमी2 गोल टुकड़े लिए जा सकते हैं और बिना किसी पूर्व उपचार के सीधे पीसीआर प्रतिक्रिया में प्रवर्धित किए जा सकते हैं।
प्रतिक्रिया कार्यक्रम
| चक्र कदम | अस्थायी | समय | साइकिल |
| प्रारंभिक विकृतीकरण | 95℃ | 5 मिनट | 1 |
| विकृतीकरण | 95℃ | 15 सेकंड | 30-35 |
| एनीलिंग | 60℃ | 15 सेकंड | |
| विस्तार | 72℃ | 3-10 सेकंड/केबी | |
| अंतिम विस्तार | 72℃ | 5 मिनट | 1 |
एनीलिंग तापमान एक सामान्य Tm मान या प्राइमर Tm मान से 1-2°C कम होता है। यदि प्रवर्धन उत्पाद कम विशिष्ट है, तो इष्टतम एनीलिंग स्थितियों को खोजने के लिए एनीलिंग तापमान ढाल स्थापित किया जा सकता है।
10 सेकंड/केबी का विस्तार समय 8 केबी से नीचे के अधिकांश लक्ष्य टुकड़ों को बढ़ा सकता है, और 3-5 सेकंड/केबी 2 केबी से नीचे के अधिकांश टुकड़ों को बढ़ा सकता है। यदि प्रवर्धन दक्षता कम है, तो समय को उचित रूप से 20-30 सेकंड/केबी तक बढ़ाया जा सकता है, और 60 सेकंड/केबी से अधिक नहीं होना चाहिए।
शिपिंग और भंडारण
उत्पादों को -15℃ तापमान पर संग्रहित किया जाना चाहिए ~ -25℃ के लिए 1 वर्ष
आंकड़ों
नोट्स
1. यह अनुशंसा की जाती है कि रक्त टेम्पलेट को कुल प्रतिक्रिया मात्रा के 10% के रूप में उपयोग किया जाए, अर्थात, 50 μL प्रतिक्रिया प्रणाली में टेम्पलेट के रूप में 5 μL पूरे रक्त को जोड़ा जाता है, रक्त के थक्कों से बचने के लिए सावधानी बरती जाती है।
2. 10 सेकंड/केबी का विस्तार समय 8 केबी से नीचे के अधिकांश लक्ष्य टुकड़ों को बढ़ा सकता है, और 3-5 सेकंड/केबी 2 केबी से नीचे के अधिकांश टुकड़ों को बढ़ा सकता है। यदि प्रवर्धन दक्षता कम है, तो समय को 30 सेकंड/केबी तक बढ़ाया जा सकता है।
3. पीसीआर प्रतिक्रिया के बाद, रक्त कोशिका के टुकड़ों को अवक्षेपित करने के लिए प्रतिक्रिया उत्पाद को 4000 आरपीएम (1000 × जी) पर 1-3 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज करने और डाउनस्ट्रीम विश्लेषण के लिए सतह पर तैरनेवाला लेने की सिफारिश की जाती है।
4. इस उत्पाद का उपयोग सीधे चिकित्सा निदान के लिए नहीं किया जा सकता है।
5. अपनी सुरक्षा और स्वास्थ्य के लिए कृपया लैब कोट पहनें और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनें।
भुगतान और सुरक्षा
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जाँच करना
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उपवास
यह उत्पाद केवल शोध उद्देश्यों के लिए है और मनुष्यों या जानवरों में चिकित्सीय या नैदानिक उपयोग के लिए अभिप्रेत नहीं है। उत्पाद और सामग्री येसेन बायोटेक्नोलॉजी के स्वामित्व वाले पेटेंट, ट्रेडमार्क और कॉपीराइट द्वारा संरक्षित हैं। ट्रेडमार्क प्रतीक मूल देश को इंगित करते हैं, जरूरी नहीं कि सभी क्षेत्रों में पंजीकरण हो।
कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।