विवरण
mRNA कैप 2´-O-मेथिलट्रांसफेरेज़ वैक्सीनिया वायरस से प्राप्त एक पुनः संयोजक प्रोटीन है। एंजाइम RNA के 5´ छोर पर कैप संरचना के पहले न्यूक्लियोटाइड की 2´-O स्थिति पर एक मिथाइल समूह जोड़ सकता है। एंजाइम कैप्ड RNA को मिथाइलेट करने के लिए मिथाइल डोनर के रूप में SAM का उपयोग करता है ताकि Cap1 संरचना बनाई जा सके। Cap1 संरचना mRNA की अनुवाद दक्षता को बढ़ा सकती है, इसलिए यह ट्रांसफ़ेक्शन और माइक्रोइंजेक्शन प्रयोगों में mRNA की अभिव्यक्ति में सुधार कर सकती है। इस एंजाइम को सब्सट्रेट के रूप में m7GpppN, एक 7-मेथिलगुआनोसिन कैप संरचना वाले RNA की आवश्यकता होती है।
यह उत्पाद GMP प्रक्रिया आवश्यकताओं के अनुसार निर्मित किया गया है। यह उत्पाद तरल रूप में उपलब्ध है और इसका उपयोग प्री-एमआरएनए इन विवो/इन विट्रो की कैप1 कैपिंग प्रतिक्रिया के लिए किया जा सकता है।
विशेषता
- पुनः संयोजक स्रोत से पृथक
- एंडोन्यूक्लिऐस, एक्सोन्यूक्लिऐस, आरएनएज़ की अनुपस्थिति के लिए परीक्षण किया गया
आवेदन
- कैप्ड इन विट्रो ट्रांस्क्रिप्ट का 2´-O-मेथिलेशन आरएनए को इन विवो में जन्मजात प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया से बचने में मदद करता है
- mRNA कैप-1 संरचना अभिव्यक्ति में सुधार कर सकती है
विनिर्देश
| स्रोत | पुनः संयोजक कैप 2´-O-मेथिलट्रांसफेरेज़ जीन के साथ ई.कोली |
| इष्टतम तापमान | 37℃ |
| भंडारण बफर | 20 mM ट्रिस-एचसीएल pH8.0, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 100mM NaCl, 50% (v/v) ग्लिसरीन, 0.1% (v/v) ट्रिऑन X-100 |
| इकाई परिभाषा | एक इकाई को 37°C पर 1 घंटे में 80nt कैप्ड RNA प्रतिलेख के 10 pmol को मेथिलेट करने के लिए आवश्यक एंजाइम की मात्रा के रूप में परिभाषित किया गया है। |
अवयव
| घटक सं. | नाम | 10612ES92 (10,000 यू) | 10612ES97 (50,000 यू) | 10612ES98 (250,000 यू) | 10612ES99 (20 एमयू) |
| 10612 | mRNA कैप 2´-O-मेथिलट्रांसफेरेज़ GMP-ग्रेड (50 U/μl) | 200 μएल | 1 एमएल | 5 एमएल | 400 एमएल |
शिपिंग और भंडारण
mRNA कैप 2´-O-मिथाइलट्रांसफेरेज़ जीएमपी-ग्रेड उत्पादों को सूखी बर्फ के साथ भेजा जाता है और उन्हें एक वर्ष के लिए -15℃ ~ -25℃ पर संग्रहीत किया जा सकता है।
आंकड़ों
चित्र 1. कैपिंग दक्षता और 2'-O-मेथिलट्रांसफेरेज़ मात्रा के बीच संबंध
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