विवरण
यूकेरियोट्स mRNA प्रतिलेखन के बाद 5' छोर पर एक विशेष संरचना बनाता है, जिसे कैप संरचना कहा जाता है। कैप संरचना mRNA की स्थिरता, परिवहन और अनुवाद में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है। वैक्सीनिया वायरस कैपिंग एंजाइम एक प्रभावी एंजाइम है जो कैप संरचना के निर्माण को उत्प्रेरित कर सकता है। यह दो सबयूनिट D1 और D12 से बना है। इसमें RNA ट्राइफॉस्फेट गतिविधि, ग्वानिलेट एसाइलट्रांसफेरेज़ गतिविधि और ग्वानिन मिथाइलट्रांसफेरेज़ गतिविधि भी है जो 7-मेथिलगुआनिन कैप संरचना (m7Gppp) को RNA के 5' छोर (m7Gppp5'N) से जोड़ सकती है। वैक्सीनिया वायरस कैपिंग एंजाइम कैपिंग बफर, ग्वानोसिन ट्राइफॉस्फेट (GTP), S-एडेनोसिलमेथियोनीन (SAM), आदि की उपयुक्त सांद्रता पर मौजूद होने पर एक घंटे के भीतर RNA को सही दिशा में कैप कर सकता है।
विशेषता
- पुनः संयोजक स्रोत से पृथक
- एंडोन्यूक्लिऐस, एक्सोन्यूक्लिऐस, आरएनएज़ की अनुपस्थिति के लिए परीक्षण किया गया
आवेदन
- अनुवाद परख/इन विट्रो अनुवाद से पहले mRNA को कैप करना
- mRNA के 5´ सिरे को लेबल करना
विनिर्देश
| स्रोत | पुनः संयोजक ई कोलाई वैक्सीनिया वायरस कैपिंग एंजाइम जीन के साथ |
| इष्टतम तापमान | 37℃ |
| भंडारण बफर | 20 मिमी ट्रिस-एचसीएल पीएच 8.0, 100 मिमी NaCl, 1 मिमी डीटीटी, 0.1 मिमी EDTA, 0.1% ट्राइटन एक्स-100, 50% ग्लिसरीन |
| इकाई परिभाषा | 1 इकाई: 10 pmol GTP (α- 32P) को 1 घंटे के भीतर 37℃ पर 80 न्यूक्लियोटाइड्स (80 nt) वाले प्रतिलेख में शामिल करने के लिए आवश्यक एंजाइम की मात्रा। |
अवयव
| घटक सं. | नाम | 10615ES84 (2,000 यू) | 10615ES92 (10,000 यू) | 10615ES96 (100,000 यू) | 10615ES99 (5 एमयू) |
| 10615 | mRNA वैक्सीनिया कैपिंग एंजाइम (10 यू/μएल) | 200 μएल | 1 एमएल | 10 एमएल | 500 एमएल |
शिपिंग और भंडारण
mRNA वैक्सीनिया कैपिंग एंजाइम जीएमपी-ग्रेड उत्पादों को सूखी बर्फ के साथ भेजा जाता है और उन्हें एक वर्ष के लिए -15℃ ~ -25℃ पर संग्रहीत किया जा सकता है।
आंकड़ों
चित्र 1. YEASEN के वैक्सीनिया कैपिंग सिस्टम द्वारा कैपिंग दक्षता लगभग 100% तक पहुँच गई। कैप प्रतिक्रिया से पहले न्यूक्लिक एसिड मास स्पेक्ट्रोमेट्री को चित्र 1A में दिखाया गया था। कैप प्रतिक्रिया के बाद न्यूक्लिक एसिड मास स्पेक्ट्रोमेट्री को चित्र 1B में दिखाया गया था।
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