विवरण
यह वाइल्ड-टाइप T7 RNA पॉलीमरेज़ से प्राप्त एक इंजीनियर्ड T7 RNA पॉलीमरेज़ वैरिएंट (कम dsRNA) है और एस्चेरिचिया कोली में उत्पादित होता है। यह कैप एनालॉग्स को कुशलतापूर्वक शामिल करते हुए डबल-स्ट्रैंडेड RNA (dsRNA) के उत्पादन को महत्वपूर्ण रूप से कम करता है, और वाइल्ड-टाइप टी7 आरएनए पॉलीमरेज़ की तुलना में अत्यधिक कुशल इन विट्रो ट्रांसक्रिप्शन (आईवीटी) प्रदर्शित करता है। यह अपने T7 प्रमोटर अनुक्रम (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') से दोहरे-रज्जुक वाले DNA पर RNA के 5'→3' संश्लेषण को उत्प्रेरित करता है तथा सब्सट्रेट के रूप में NTPs का उपयोग करता है।
नोट: G* RNA प्रतिलेख का प्रथम आधार है।
विशेषता
- डीएसआरएनए स्तर लगभग 1/100000 तक कम
- ट्रिलिंक क्लीनकैप एजी के साथ संगत
- WT के बराबर उच्च पैदावार
- लोअर कैप इनपुट
- पशु मूल-मुक्त (AOF)
कृपया इस एंजाइम के विकास पर जानकारी प्राप्त करें।
अवयव
| घटक सं. | नाम | 10628ES10 | 10628ES60 | 10628ES72 | 10628ES86 |
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| (10 केयू) | (100 केयू) | (250 केयू) | (2,500 केयू) |
| 10628 | क्लीस्क्रिप™ टी7 आरएनए पॉलीमरेज़ (कम डीएसआरएनए, 250 यू/μएल) | 40 μएल | 400 μएल | 1 एमएल | 10 एमएल |
विशेष विवरण
| स्रोत | पुनः संयोजक ई कोलाई टी7 आरएनए पॉलीमरेज़ जीन के साथ |
| इष्टतम तापमान | 37℃ |
| भंडारण बफर | 50 मिमी ट्रिस-एचसीएल, 1 मिमी ईडीटीए, 10 मिमी डीटीटी, 100 मिमी NaCl, 0.1% ट्राइटन एक्स-100，50% (v/v) ग्लिसरीन, pH7.9 पर 25℃ |
| इकाई परिभाषा | 1 एनएमओएल को शामिल करने के लिए आवश्यक एंजाइम की मात्रा [3एच] जीएमपी को 37 डिग्री सेल्सियस और पीएच 8.0 पर 1 घंटे के भीतर एसिड-अघुलनशील अवक्षेप में मिलाएं 1 इकाई के रूप में परिभाषित किया गया है. |
| अनुशंसित Mg2+ | 30mM मैग्नीशियम एसीटेट |
क्यूसी मानक
| मैंटेम्स | विशिष्टता/मानक |
| एनजाइम गतिविधि | 250-300यू/μएल |
| प्रोटीन शुद्धता | ≥95% |
| अन्तर्जीवविष | <20 ईयू/एमजी |
| प्रोटीज | नकारात्मक |
| एक्सोन्यूक्लिऐस | नकारात्मक |
| निकेस | नकारात्मक |
| आरएनएसे | नकारात्मक |
| ई.कोली होस्ट प्रोटीन | <50पीपीएम |
| इ.कोली होस्ट डीएनए | <10 एफजी/यू |
| माइकोप्लाज्मा परीक्षण | नकारात्मक |
संबंधित उत्पाद
आंकड़ों
चित्र 2. म्यूरिन आरए में आईवीटी उत्पादों की प्रतिरक्षाजनन क्षमता का मूल्यांकनW264.7 कोशिकाएं (आंकड़े 2A और 2B)। RA में IFN-β mRNA और प्रोटीन का स्तर कम हो गया थाW264.7 कोशिकाओं को म्यूटेंट द्वारा उत्पादित mRNA से संक्रमित किया गया, जिसकी तुलना वाइल्ड-टाइप से की गई, जिससे यह संकेत मिलता है कि वाइल्ड-टाइप T7 RNA द्वारा संश्लेषित mRNA ने सबसे मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया उत्पन्न की, जबकि म्यूटेंट से प्राप्त mRNA ने काफी कम प्रतिक्रिया दिखाई।
चित्र 3. क्लीस्क्रिप्ट™ टी7 आरएनए पॉलीमरेज़ के साथ संश्लेषित mRNA में dsRNA की मात्रा, सेल्यूलोज उपचार के बाद वाइल्ड-टाइप एंजाइम के साथ संश्लेषित mRNA की तुलना में कम है।
शिपिंग और भंडारण
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