विवरण
LZCap AU (3'Acm) एक cap1 एनालॉग है। उत्पाद का उपयोग 5'AU3' के प्रारंभिक अनुक्रम के साथ प्रतिलेखन के लिए किया जाता है, और प्राकृतिक कैप1 संरचना कैप1 प्रतिलेखन कैपिंग द्वारा निर्मित होती है। पारंपरिक कैपिंग विधि द्वारा उत्पादित कैप0 की तुलना में, कैपएयू (3'एसीएम) द्वारा उत्पादित कैप1 संरचना SaRNA को विवो में उच्च गतिविधि और अनुवाद दक्षता प्रदान करने में सक्षम बनाती है।
अमेरिकी पेटेंट स्वीकृत.
अवयव
| बिल्ली नं. | नाम | आकार |
| 10685 | एलजेडकैप एयू (3'एसीएम) (100एमएम) | 100 μएल |
| 1 एमएल |
उत्पाद विवरण
| आणविक सूत्र | सी34एच47एन13हे25पी4 (मुक्त अम्ल) |
| आणविक वजन | 1161.71(मुक्त अम्ल) |
| एकाग्रता | 100± 3 मिमी |
| पवित्रता | एचपीएलसी ≥95% |
एलजेडकैप® डीएनए टेम्पलेट डिजाइन
एलजेडकैप®AU(3'Acm) AG-आरंभिक अनुक्रमों के लिए उपयुक्त है। जैसा कि नीचे दिए गए चित्र में दिखाया गया है, AG अनुक्रम के बाद T7 प्रमोटर (रेखांकित) प्रभावी रूप से प्रतिलेखन आरंभ कर सकता है।
शिष्टाचार
1. प्रयोग के लिए आवश्यक घटकों को बर्फ पर पिघलाएं।
2. कमरे के तापमान पर प्रतिलेखन प्रणाली को कॉन्फ़िगर करने के लिए निम्नलिखित प्रतिक्रिया प्रणाली का संदर्भ लें।
संशोधित N1-Me-pUTP का उपयोग वाइल्ड-टाइप UTP के स्थान पर किया जा सकता है। संशोधित N1-Me-pUTP mRNA की प्रतिरक्षाजनकता को कम करता है। हेनोवकॉम संशोधित न्यूक्लियोटाइड N1-Me-pUTP (कैट. नं.: HN1002) भी प्रदान कर सकता है।
टिप्पणियाँ:
1) एलजेडकैप®AU(3'Acm) 5 'AU 3' आरंभित अनुक्रमों के साथ T7 प्रमोटर प्रतिलेखन वेक्टर के लिए उपयुक्त है, जिसे वेक्टर का निर्माण करते समय ध्यान में रखना आवश्यक है।
2) प्रयोग में प्रयुक्त अभिकर्मक, उपभोग्य वस्तुएं और कंटेनर RNase संदूषण से मुक्त हैं।
3) प्रतिलेखन के लिए रेखीयकृत डीएनए टेम्पलेट का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।
4) जब वाइल्ड-टाइप न्यूक्लियोटाइड के स्थान पर संशोधित न्यूक्लियोटाइड का उपयोग किया गया, तो प्रतिक्रिया की अंतिम सांद्रता अपरिवर्तित रही।
5) यदि पीसीआर उत्पाद को प्रतिलेखन आरंभ डीएनए टेम्पलेट के रूप में उपयोग किया जाता है, तो डीएनए टेम्पलेट की मात्रा आधी से भी कम की जा सकती है।
3. तैयार प्रतिक्रिया समाधान को मिलाएं, थोड़ी देर के लिए सेंट्रीफ्यूज करें, और 2-3 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। यदि ट्रांसक्रिप्ट की लंबाई 100 एनटी से कम है, तो प्रतिक्रिया समय को 4-8 घंटे तक बढ़ाएँ।
सामान्य सुरक्षा प्रोफ़ाइल
| परिणाम और निष्कर्ष | |
| cytotoxicity परीक्षा | नहीं cytotoxicity था देखा साथ संशोधित न्यूक्लीओसाइड में एकाधिक कक्ष पंक्तियां |
| पोलीमर्स निषेध अध्ययन | संशोधित न्यूक्लीओसाइड है कोई भी नहीं एक अवरोधक और न ए सब्सट्रेट का इंसान शाही सेना और डीएनए पोलिमेरासिज़ और है इसलिए नहीं एकीकृत में जीनोम |
| एम्स परीक्षा* | नहीं genotoxicity था देखा में एम्स परीक्षा |
भंडारण
इस उत्पाद को -25~-15 ℃ तापमान पर दो वर्षों तक भंडारित किया जा सकता है।
सावधानियां
- अपनी सुरक्षा और स्वास्थ्य के लिए, कृपया इस उत्पाद के साथ काम करते समय व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण (पीपीई) पहनें, जैसे प्रयोगशाला कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने।
- केवल अनुसंधान उपयोग के लिए.
एफ एंड क्यू
1. आप LZCap को कैसे डिज़ाइन करते हैं?
एंजाइमों में सब्सट्रेट की अपेक्षाकृत "विशिष्ट" पहचान होती है। इसलिए, एक नई कैप संरचना को डिज़ाइन करते समय, एक तरफ, हमें पेटेंट उद्देश्यों के लिए नए संरचनात्मक संशोधनों की आवश्यकता होती है, लेकिन दूसरी ओर, हम यथासंभव प्राकृतिक/ज्ञात संरचनाओं के साथ समानता बनाए रखने का प्रयास करते हैं। प्राकृतिक संरचना में राइबोज 3' OH होता है, जिसे संशोधित किया जा सकता है (उदाहरण के लिए, मिथाइलेशन)। इस विचार के आधार पर, हमने पेटेंट नवीनता के लिए 3' स्थिति पर एक कार्बन जोड़ने का फैसला किया, उसके बाद OH के हाइड्रोजन बॉन्डिंग की नकल करने के लिए एक NH, और फिर NH की क्षारीयता को कम करने और इसकी हाइड्रोजन बॉन्डिंग क्षमता को बढ़ाने के लिए एक एसिटाइल समूह जोड़ा। की गतिविधि एलज़कैप मिथाइलैट से बेहतर हैएड प्राकृतिक टोपीसंभवतः हाइड्रोजन बॉन्डिंग में वृद्धि के कारण। मिथाइल और मेथॉक्सी समूहों की तुलना में, एसिटाइल एमिनो समूह सब्सट्रेट (कैप) और आरंभिक कारक (एंजाइम) के बीच वैन डेर वाल्स इंटरैक्शन को भी बढ़ा सकता है।
2. क्या एसिटाइल अमीनो समूह स्थिर है?
एसिटाइल एमिनो समूह पहले से ही पर्याप्त रूप से स्थिर है। यह 7-मेथिलेटेड स्थिति और फॉस्फोडाइस्टर बॉन्ड की तुलना में बहुत अधिक स्थिर है, जो कैप के सबसे कम स्थिर भाग हैं।
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