चित्र 3. अति लंबे टुकड़ों का बंधन। परिणाम दर्शाते हैं कि 10923ES में कॉलोनियों की संख्या अधिक है, जिसकी सकारात्मक दर 100% है।A: रिकॉम्बिनेंट ट्रांसफॉर्मेशन प्लेट। वेक्टर (21 kb) से इन्सर्ट फ़्रैगमेंट (4.5 kb) का मोलर अनुपात 1:2 है।B: इन्सर्ट फ़्रैगमेंट का PCR पहचान वैद्युतकणसंचलन, M: येसेन 10505ES।वेक्टर मात्रा: 20 μL प्रतिक्रिया प्रणाली में 200 ng, प्रतिक्रिया की स्थिति: 50°C, 40 मिनट।
विवरण
हाईफ़ क्लोन™ यूनिवर्सल II वन स्टेप क्लोनिंग किट एक नव उन्नत क्लोनिंग किट है।
सावधानीपूर्वक अनुकूलित दूसरी पीढ़ी का 2× Hieff क्लोन™ यूनिवर्सल II एन्जाइम प्रीमिक्स, पुनः संयोजक एंजाइम और पुनः संयोजक प्रतिक्रिया के लिए आवश्यक बफर को एक अद्वितीय पुनः संयोजक वर्धक के साथ संयोजित करता है, जिससे पुनः संयोजक क्लोनिंग की दक्षता में उल्लेखनीय सुधार होता है।
किट को किसी भी वेक्टर के किसी भी स्थान पर पीसीआर उत्पादों को क्लोन करने के लिए निर्देशित किया जा सकता है, यह अनप्यूरिफाइड पीसीआर उत्पादों के साथ संगत है, सीधे पुनर्प्राप्त पीसीआर उत्पाद, रबर पुनर्प्राप्त उत्पादों की कम सांद्रता, यह उत्पाद संयुक्त टुकड़े के 30% -70% के समजातीय भुजा जीसी सामग्री को फिर से इकट्ठा कर सकता है। वेक्टर पूरी तरह से रैखिककृत था, और 15-25 बीपी के रैखिककृत वेक्टर के अंत के समजातीय अनुक्रमों को सम्मिलित टुकड़े के सकारात्मक और रिवर्स पीसीआर प्राइमरों के 5 'छोर में पेश किया गया था, ताकि सम्मिलित टुकड़े के पीसीआर उत्पादों के 5' और 3 'छोरों में क्रमशः रैखिककृत वेक्टर के दो सिरों के अनुरूप समान अनुक्रम हो। पुनः संयोजक एंजाइम की क्रिया के तहत, पीसीआर उत्पाद और रैखिककृत वेक्टर की पुनः संयोजक प्रतिक्रिया
विशेषताएँ
सरल: एक ही प्रतिक्रिया में छह डीएनए खंडों तक क्लोन बनाएं।
लचीला: डिजाइन दिशानिर्देश आपकी पसंद के किसी भी वेक्टर में संयोजन की अनुमति देते हैं।
कुशल: एक से सात टुकड़ों के बंधन के लिए कुशल।
अनुप्रयोग
तेज़ क्लोनिंग: यह एक चरण, 5-50 मिनट की समतापी प्रतिक्रिया में कई अतिव्यापी डीएनए टुकड़ों को निर्बाध रूप से जोड़ने की अनुमति देता है।
निर्देशित क्लोनिंग; साइट-निर्देशित उत्परिवर्तन.
विशेष विवरण
| बंधाव | अधिकतम 7 टुकड़े |
| उत्पाद का प्रकार | डीएनए असेंबली |
अवयव
| घटक सं. | नाम | 10923ES05（5 टी） | 10923ES20（20 टी） | 10923ES50（50 टी） |
| 10923-ए | 2 × हिएफ़ क्लोनटीएम यूनिवर्सल II एन्ज़ाइम प्रीमिक्स | 50 μएल | 200 μएल | 500 μएल |
| 10923-बी | 500 बीपी नियंत्रण इंसर्ट (25 एनजी/μएल) | 5 μएल | 5 μएल | 5 μएल |
| 10923-सी | pUC 19 नियंत्रण वेक्टर, रैखिककृत (50 एनजी/μएल) | 5 μएल | 5 μएल | 5 μएल |
भंडारण
इस उत्पाद को -25~-15℃ तापमान पर 1 घंटे तक संग्रहित किया जाना चाहिए साल।
आंकड़ों
एफचित्रांकन 1. 10 एनजी कम-इनपुट एकल टुकड़ों को 6μL छोटे सिस्टम की गैर-पुनर्जीवन ग्रहणशील स्थिति में जोड़ा गया। परिणामों से पता चला कि 10923ES का प्रदर्शन प्रतिस्पर्धी उत्पादों की तुलना में बेहतर था, जिसमें उच्च कनेक्शन दक्षता, अधिक कॉलोनियाँ और 100% की सकारात्मक दर थी। AB: क्लोनी प्लेट। वाहक (10 kb) से सम्मिलित खंड (1 kb) का मोलर अनुपात 1:2 था। C: सम्मिलित खंड PCR द्वारा पहचाना गया इलेक्ट्रोफोरेसिस मानचित्र, M: YEASEN 10505ईएस.
चित्र 2. छह टुकड़ों (कुल लंबाई 7.6 केबी) को 11.6 केबी प्लास्मिड में क्लोन किया गया। परिणामों से पता चला कि 10923ES का प्रदर्शन प्रतिस्पर्धी उत्पादों की तुलना में बेहतर था, जिसमें अधिक कॉलोनियाँ और 100% की सकारात्मक दर थी। AB: कॉलोनी प्लेट। वाहक (11.6 kb) से सम्मिलित टुकड़ों का मोलर अनुपात 1:2 था। C: सम्मिलित टुकड़े का वैद्युतकणसंचलन विश्लेषण, M: YEASEN 10505ES। प्लास्मिड इनपुट:200 एनजी/20 μL, 50°C, 50 मिनट।
संबंधित उद्धरण और संदर्भ:
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