विवरण
हाईफेयर™ एडवांस्ड वन स्टेप RT-qPCR किट SYBR ग्रीन I डाई पर आधारित फ्लोरोसेंस क्वांटिफिकेशन के लिए एक किट है। जीन-विशिष्ट प्राइमरों का उपयोग करके, रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और qPCR अभिक्रियाएँ एक ट्यूब में पूरी की जाती हैं, जिससे बार-बार कैप खोलने और पाइपिंग ऑपरेशन की आवश्यकता समाप्त हो जाती है, जिससे परख दक्षता में बहुत सुधार होता है और संदूषण का जोखिम कम होता है। RNA नमूनों के लिए, किट में ऊष्मा-प्रतिरोधी हाईफ़ेयर का उपयोग किया जाता है™ कुशल सीडीएनए संश्लेषण और यूनिकॉन के लिए वी रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस™ मात्रात्मक प्रवर्धन के लिए हॉटस्टार्ट टैक डीएनए पोलीमरेज़। अनुकूलित बफर सिस्टम के तहत, किट की संवेदनशीलता अत्यधिक व्यक्त लक्ष्यों के लिए 0.1 पीजी जितनी अधिक हो सकती है और मध्यम रूप से व्यक्त लक्ष्यों के लिए 1 पीजी जितनी अधिक हो सकती है, और किट डीएनए नमूनों के प्रवर्धन और परिमाणीकरण के लिए भी उपयुक्त है। किट डीएनए नमूनों के प्रवर्धन और परिमाणीकरण के लिए उपयुक्त है। यह विभिन्न पौधों और जानवरों के नमूनों, कोशिकाओं और सूक्ष्मजीवों से न्यूक्लिक एसिड का संवेदनशील पता लगाने और परिमाणीकरण करने में सक्षम बनाता है।
विशेष विवरण
| कैट.नं. | 11175ES20 / 11175ES70 |
| आकार | 20 टी/200 टी |
अवयव
| घटक सं. | नाम | 11175ईएस20 | 11175ES70 |
| 11175-ए | 2× हाईफेयर™ उन्नत एसजी बफर | 250 μएल | 2×1.25 एमएल |
| 11175-बी | हाईफेयर™ उन्नत यूएच एंजाइम मिश्रण | 20 μएल | 200 μएल |
| 11175-सी | आरएनसे फ्री एच2हे | 250 μएल | 2×1.25 एमएल |
भंडारण
इस उत्पाद को -25~-15℃ तापमान पर संग्रहित किया जाना चाहिए दूर से रोशनी के लिए 1 वर्ष।
निर्देश
- प्रतिक्रिया प्रणाली विन्यास*****
| अवयव | आयतन (μL)**** | आयतन (μL) | अंतिम सांद्रता |
| 2× हाईफेयर™ उन्नत एसजी बफर* | 12.5 | 25 | 1× |
| हाईफेयर™ उन्नत यूएच एंजाइम मिश्रण | 1 | 2 | - |
| फॉरवर्ड प्राइमर (10 μmol/L)** | 0.5 | 1 | 0.2 μमोल/एल |
| रिवर्स प्राइमर (10 μmol/L)** | 0.5 | 1 | 0.2 μमोल/एल |
| आरएनए*** | एक्स | एक्स | - |
| आरएनसे फ्री एच2हे | से 25 | को 50 | - |
* कम रॉक्स मॉडल और रॉक्स सुधार के बिना मॉडल सीधे उपरोक्त प्रतिक्रिया प्रणाली के अनुसार तैयार किए जाते हैं। हाई रॉक्स मॉडल का उपयोग करते समय, 2 x हाईफ़ेयर™ एडवांस्ड एसजी बफर में 1:250 v/v पर Hieff™ SP हाई रॉक्स डालें, अच्छी तरह मिलाएँ और सेंट्रीफ्यूज करें। 2× हाईफ़ेयर™ हाईफ™ एसपी हाई रॉक्स के साथ उन्नत एसजी बफर, लो रॉक्स और नो रॉक्स सुधार मॉडल के उपयोग को प्रभावित नहीं करता है।
** अंतिम प्राइमर सांद्रता 0.2 μmol/L थी, जिसे आवश्यकतानुसार 0.1 और 1 μmol/L के बीच भी समायोजित किया जा सकता था।
*** अभिकर्मक अत्यंत संवेदनशील है, जिसमें कुल आरएनए 1 पीजी-1 माइक्रोग्राम की सीमा में है, तथा मानव नमूनों के परीक्षण से 1 पीजी-100 एनजी का इष्टतम इनपुट प्राप्त हुआ है, जिसमें 15-30 की सीमा में समग्र सीटी मान को नियंत्रित किया गया है।
**** लक्ष्य जीन प्रवर्धन की वैधता और पुनरुत्पादकता सुनिश्चित करने के लिए 20 μL या 50 μL का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।
***** कृपया अल्ट्रा-क्लीन बेंच में तैयारी करें और न्यूक्लिऐस अवशेष-मुक्त टिप्स और रिएक्शन ट्यूब का उपयोग करें; फ़िल्टर कार्ट्रिज वाले टिप्स की सिफारिश की जाती है। क्रॉस संदूषण और एरोसोल संदूषण से बचें।
2）प्रतिक्रिया कार्यक्रम
| चक्र कदम | अस्थायी | समय | साइकिल |
| रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन | 50℃* | 6 मिन | 1 |
| प्रारंभिक विकृतीकरण | 95℃ | 5 मिन | 1 |
| प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95℃ | 15 सेकंड | 40 |
| 60℃** | 30 सेकंड | ||
| पिघलने वक्र चरण | उपकरण डिफ़ॉल्ट | 1 | |
*प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के अनुसार रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन तापमान 50-55 डिग्री सेल्सियस के बीच चुना जा सकता है। डीएनए नमूनों के लिए, रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन प्रक्रिया को छोड़ा जा सकता है।
** विशेष मामलों में एनीलिंग/विस्तार तापमान को प्राइमर Tm मान के अनुसार समायोजित किया जा सकता है, 60°C की अनुशंसा की जाती है।
3) लागू मॉडल
उपकरण मॉडल जिन्हें रॉक्स अंशांकन की आवश्यकता नहीं होती है:
बायो-रेड: सीएफएक्स96, सीएफएक्स384, आईसाइक्लर आईक्यू, आईक्यू5, माईआईक्यू, मिनीऑप्टिकॉन, ऑप्टिकॉन, ऑप्टिकॉन 2, क्रोमो4;
एप्पेनडॉर्फ: मास्टरसाइक्लर एप रियलप्लेक्स, रियलप्लेक्स 2 एस;
क्यूइगेन: कॉर्बेट रोटर-जीन क्यू, रोटर-जीन 3000, रोटर-जीन 6000;
रोश एप्लाइड साइंस: लाइटसाइक्लर 480, लाइटसाइक्लर2.0, लाइटसाइक्लर 96;
थर्मो साइंटिफिक: पिकोरियल साइक्लर; सेफिड: स्मार्टसाइक्लर; इल्लुमिना: इको क्यूपीसीआर;
कम रॉक्स लागू मॉडल:
ABI 7500, 7500 फास्ट, ViiA7, क्वांटस्टूडियो 3 और 5, क्वांटस्टूडियो 6, 7, 12k फ्लेक्स;
स्ट्रैटेजेन एमएक्स3000पी, एमएक्स3005पी, एमएक्स4000पी;
उच्च रॉक्स लागू मॉडल*:
एबीआई 5700, 7000, 7300, 7700, 7900एचटी फास्ट, स्टेपवन, स्टेपवन प्लस।
* हाई रॉक्स मॉडल के लिए, ध्यान रखें कि Hieff™ SP हाई रॉक्स को 2 x हाईफेयर के अनुपात में जोड़ा जाना चाहिए™ उपयोग से पहले उन्नत एसजी बफर.
नोट्स
- यह प्रॉडक्ट केवल शोध के उपयोग के लिए है।
- कृपया अपनी सुरक्षा के लिए लैब कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनकर काम करें।
दस्तावेज़:
सुरक्षा डेटा पत्रक
11175ईएस-ए-एमएसडीएस-HB230927.पीडीएफ
11175ईएस-बी-एमएसडीएस-HB230927.पीडीएफ
11175ईएस-सी-एमएसडीएस-एचबी230927.पीडीएफ
नियमावली
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उपवास
यह उत्पाद केवल शोध उद्देश्यों के लिए है और मनुष्यों या जानवरों में चिकित्सीय या नैदानिक उपयोग के लिए अभिप्रेत नहीं है। उत्पाद और सामग्री येसेन बायोटेक्नोलॉजी के स्वामित्व वाले पेटेंट, ट्रेडमार्क और कॉपीराइट द्वारा संरक्षित हैं। ट्रेडमार्क प्रतीक मूल देश को इंगित करते हैं, जरूरी नहीं कि सभी क्षेत्रों में पंजीकरण हो।
कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।