विवरण
CRISPR/Cas9 एक ऐसी तकनीक है जिसमें RNA-निर्देशित Cas न्यूक्लिऐस लक्षित जीन में विशिष्ट DNA संशोधन करता है, जो बैक्टीरिया और आर्कबैक्टीरिया द्वारा फेज और विदेशी प्लास्मिड के हमलों के जवाब में विकसित एक अधिग्रहित प्रतिरक्षा रक्षा तंत्र है। इस प्रणाली में, Cas9 न्यूक्लिऐस को कृत्रिम रूप से अनुकूलित सिंगल गाइड RNA (sgRNA) के साथ निर्देशित किया जाता है ताकि लक्ष्य स्थल पर डबल-स्ट्रैंडेड DNA (dsDNA) को काटा जा सके जिससे DNA टूट जाता है। DNA को गैर-समरूप अंत संयोजन या होमोलॉजी निर्देशित मरम्मत तंत्र के साथ इन विवो में मरम्मत की जाती है, जिसके परिणामस्वरूप फ्रेमशिफ्ट उत्परिवर्तन, जीन का प्रतिस्थापन या विलोपन होता है।
हाईफ़ेयरTM प्रेसिजन sgRNA सिंथेसिस किट spCas9 sgRNA को कुशलतापूर्वक ट्रांसक्राइब करने के लिए T7 RNA पॉलीमरेज़ मिश्रण का उपयोग करता है। किट में एक विशिष्ट अनुक्रम होता है जिसे Cas9 प्रोटीन द्वारा पहचाना जाता है और यह एक मचान के रूप में कार्य करता है। अनुक्रम का एक भाग उपयोगकर्ता द्वारा डिज़ाइन किए गए लक्ष्य विशिष्ट अनुक्रम के साथ आंशिक रूप से ओवरलैप किया जा सकता है। अनुलेखन के लिए dsDNA टेम्प्लेट बनाने के लिए पूरक स्ट्रैंड को DNA पॉलीमरेज़ द्वारा भरा जाता है। अपने आपूर्ति किए गए अभिकर्मक और उपयोगकर्ता द्वारा डिज़ाइन किए गए विशिष्ट DNA अनुक्रमों का उपयोग करके, किट 20-100 प्राप्त कर सकता है μएकल ट्यूब अभिक्रिया में 4 घंटे के भीतर कार्यात्मक sgRNA का 100 ग्राम प्राप्त हुआ।
विशेषताएँ
उच्च संश्लेषण उपज: 4 घंटे से अधिक की एकल-ट्यूब प्रतिक्रिया में, sgRNA की उपज 20 - 100 μg तक पहुंच सकती है।
विस्तृत अनुप्रयोग रेंजविभिन्न प्रकार के एसजीआरएनए के लिए उच्च पैदावार प्राप्त की जा सकती है।
उच्च शुद्धतासंश्लेषित sgRNA में एकल बैंड होता है।
उच्च सक्रियतासंश्लेषित sgRNA लक्ष्य डीएनए को विभाजित करने के लिए Cas9 को प्रभावी ढंग से निर्देशित कर सकता है।
अनुप्रयोग
CRISPR/Cas जीन संपादन
अवयव
घटक सं. | नाम | 11355ईएस05 | 11355ईएस25 | 11355ES50 | 11355ES60 |
11355-ए | 10×sgRNA एंजाइम मिश्रण | 10 μएल | 50 μएल | 100 μएल | 200 μएल |
11355-बी | 10×sgRNA प्रतिक्रिया बफर | 10 μएल | 50 μएल | 100 μएल | 200 μएल |
11355-सी | 2×कैनेस एंजाइम मिक्स | 62.5 μएल | 312.5 μएल | 625 μएल | 1.25 एमएल |
11355-डी | पाड़ टेम्पलेट | 6.25 μएल | 31.25 μएल | 62.5 μएल | 125 μएल |
11355-ई | एनटीपी (25 मिमी प्रत्येक) | 40 μएल | 200 μएल | 400 μएल | 800 μएल |
11355-एफ | एसजीआरएनए ओलिगो को नियंत्रित करें (10 μएम) | 2 μएल | 10 μएल | 20 μएल | 40 μएल |
शिपिंग और भंडारण
इस उत्पाद को -25 ~ -15 पर संग्रहित किया जाना चाहिएहेसी के लिए 2 साल।
आंकड़ों
आकृति 1.विभिन्न समय बिंदुओं पर sgRNA की संश्लेषण मात्रा
आकृति 2.विभिन्न अनुक्रमों के साथ sgRNA की संश्लेषण उपज
आकृति 3.संश्लेषित sgRNA की शुद्धता (एजिलेंट 2100 द्वारा निर्धारित)
आकृति 4.एसजीआरएनए का विभाजन दक्षता चार्ट
दस्तावेज़:
सुरक्षा डेटा पत्रक
11355_एमएसडीएस_संस्करण EN20250120.पीडीएफ
नियमावली
11355_मैनुअल_Ver.EN20240710.पीडीएफ
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कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
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