विवरण
हाईफ़ एनजीएस® आरएनए इल्युमिना के लिए लिब प्रेप 384 सीडीआई प्राइमर इल्युमिना हाई-थ्रूपुट सीक्वेंसिंग प्लेटफ़ॉर्म के आरएनए लाइब्रेरी निर्माण के लिए एक समर्पित लिंकर प्राइमर किट है, जिसे 2 सेटों में विभाजित किया गया है, प्रत्येक सेट में दूसरी पीढ़ी की सीक्वेंसिंग लाइब्रेरी में उपयोग किए जाने वाले पीई एडाप्टर और i5 इंडेक्स प्राइमर के 8 और i7 इंडेक्स प्राइमर के 12 शामिल हैं। कुल 16 i5 इंडेक्स प्राइमर और 24 i7 इंडेक्स प्राइमर 2 सेट में उपलब्ध हैं, जिससे डबल-एंडेड इंडेक्स-लेबल लाइब्रेरी के 384 अलग-अलग संयोजनों का निर्माण किया जा सकता है। किट में दिए गए सभी अभिकर्मकों को लाइब्रेरी निर्माण स्थिरता और दोहराव को अधिकतम करने के लिए कठोर गुणवत्ता नियंत्रण और कार्यात्मक सत्यापन से गुजरना पड़ता है।
अवयव
| नहीं। | नाम | आयतन |
| 12414ES02 | पीई एडाप्टर | 320 μएल |
| आरपी 501-508 | 60 μL प्रत्येक | |
| आरपी 701-712 | 40 μL प्रत्येक | |
| 12415ES02 | पीई एडाप्टर | 320 μएल |
| आरपी 509-516 | 60 μL प्रत्येक | |
| आरपी 713-724 | 40 μL प्रत्येक |
शिपिंग और भंडारण
सभी घटकों को सूखे के साथ भेज दिया जाता है बर्फ और -15℃~-25℃ तापमान पर 18 महीने तक संग्रहीत किया जा सकता है।
टिप्पणी:
2) इस किट के साथ दिया गया PE एडाप्टर एक सामान्य प्रयोजन वाला छोटा एडाप्टर है जिसे पूर्ण लाइब्रेरी प्राप्त करने के लिए PCR एम्पलीफिकेशन की आवश्यकता होती है। इंडेक्स प्राइमर हाई-थ्रूपुट सीक्वेंसिंग के दौरान नमूनों को अलग करने के लिए बारकोड अनुक्रम टैग प्रदान करता है।
3) इस किट के प्रत्येक सेट में 8 i5 इंडेक्स प्राइमर (RP 5xx) और 12 i7 इंडेक्स प्राइमर (RP 7xx) होते हैं, जिन्हें एक दूसरे के साथ मिलाकर डबल-एंडेड इंडेक्स लेबल लाइब्रेरी के 96 अलग-अलग संयोजनों का निर्माण किया जा सकता है। 2 सेट कुल 16 प्रदान करते हैं i5 इंडेक्स प्राइमर्स का 24 और i7 इंडेक्स प्राइमर्स का 24. आप कैट#12414 से i5 इंडेक्स प्राइमर (या i7 इंडेक्स प्राइमर) और कैट#12415 में i7 इंडेक्स प्राइमर (या i5 इंडेक्स प्राइमर) का उपयोग करके डबल-एंडेड इंडेक्स लेबल लाइब्रेरीज़ के 384 अलग-अलग संयोजन बना सकते हैं.
4) एडाप्टर को गर्म न करें, इसे कमरे के तापमान पर धीरे-धीरे घुलने दें, और प्रयोगशाला का तापमान 20-25 डिग्री सेल्सियस पर सेट करना सबसे अच्छा है। बार-बार जमने-पिघलने से बचने के लिए एडाप्टर की आवश्यकता होती है, और इसे अलग-अलग हिस्सों में संग्रहित करने तथा थोड़े समय के लिए 4°C पर संग्रहीत करने की सिफारिश की जाती है।
5) इल्युमिना® किट के लिए हाईफ़ एनजीएस® आरएनए 384 सीडीआई प्राइमर का उपयोग करके निर्मित अनुक्रमण लाइब्रेरी संरचना निम्नानुसार है:
6) अपनी सुरक्षा और स्वास्थ्य के लिए कृपया लैब कोट पहनें और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनें।
7) यह उत्पाद केवल वैज्ञानिक अनुसंधान उद्देश्यों के लिए है!
निर्देश
1. एडाप्टर का उपयोग: प्रयुक्त लाइब्रेरी निर्माण मैनुअल में विभिन्न इनपुट मात्राओं के लिए अनुशंसित खुराक के अनुसार उचित सांद्रता तक पतला करें।
2. इंडेक्स प्राइमर का उपयोग: लाइब्रेरी निर्माण मैनुअल चीनी लाइब्रेरी प्रवर्धन प्रणाली (जैसा कि नीचे दी गई तालिका में दिखाया गया है) के अनुसार प्रतिक्रिया प्रणाली तैयार करें, और प्रतिक्रिया प्रक्रिया लाइब्रेरी निर्माण मैनुअल में प्रक्रिया के अनुसार सेट की गई है।
| नाम | आयतन (μL) |
| 2× उच्च निष्ठा डीएनए पीसीआर मिश्रण | 25 |
| आरपी 5xx | 2.5 |
| आरपी 7xx | 2.5 |
| एडेप्टर लिगेटेड डीएनए | 20 |
| टीओटल | 50 |
अनुक्रम जानकारी
इल्युमिना के लिए पीई एडाप्टर：
5´-/5फॉस/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*सी -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*टी-3´
Illumina के लिए i5 इंडेक्स प्राइमर：
5´-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC[i5 सूचकांक]ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT -3´
Illumina के लिए i7 इंडेक्स प्राइमर：
5'-सीएएजीसीजीएजीएजीसीजीसीएटीसीएजीजीएटी[i7 सूचकांक]जीटीजीएसीटीजीजीएजीटीटीसीएजीएजीटीजीटीजीसीटीसीटीटीसीसीजीएटीसी-3´
[i5 सूचकांक]8 बी.पी. आई5 सूचकांक अनुक्रम,[i7 सूचकांक]8 बी.पी. i7 सूचकांक अनुक्रम.
प्रत्येक प्राइमर से संबंधित सूचकांक नाम, प्राइमर में निहित सूचकांक अनुक्रम, तथा अनुक्रमण के दौरान संबंधित सूचकांक अनुक्रम जानकारी निम्नलिखित तालिका में दर्शाई गई है:
| आई5 मैंएनडेक्स नाम | आई5 मैंएनडेक्स अनुक्रम | अनुक्रमण के दौरान सूचकांक अनुक्रम जानकारी | |
| नोवासेक 6000 v1.0 अभिकर्मक, MiSeq, हाईसेक 2000/2500 | नोवासेक 6000 v1.5 अभिकर्मकों， मिनीसेक, नेक्स्टसेक, | ||
| आरपी501 | टाटाजीसीसीटी | टाटाजीसीसीटी | एजीजीसीटाटा |
| आरपी502 | एटीएजीएजीजीसी | एटीएजीएजीजीसी | जीसीसीटीसीटीएटी |
| आरपी503 | सीसीटीएटीसीसीटी | सीसीटीएटीसीसीटी | अग्गाताग |
| आरपी504 | जीजीसीटीसीटीजीए | जीजीसीटीसीटीजीए | टीसीएजीएजीसीसी |
| आरपी505 | एजीजीसीजीएजी | एजीजीसीजीएजी | सीटीटीसीजीसीसीटी |
| आरपी506 | TAATCTTA | TAATCTTA | तागाट्टा |
| आरपी507 | सीएजीजीएसीजीटी | सीएजीजीएसीजीटी | एसीजीटीसीसीटीजी |
| आरपी508 | जीटीएसीटीजीएसी | जीटीएसीटीजीएसी | जीटीसीएजीटीएसी |
| आरपी509 | जीएसीटीसीजीटीए | जीएसीटीसीजीटीए | टीएसीएजीजीटीसी |
| आरपी510 | एटीजीटीएएक्ट | एटीजीटीएएक्ट | एजीटीटीएकैट |
| आरपी511 | जीटीटीटीसीएजीए | जीटीटीटीसीएजीए | टीसीटीजीएएएसी |
| आरपी512 | कैकगगट | कैकगगट | एटीसीसीटीजीटीजी |
| आरपी513 | टैगसीटीजीसीसी | टैगसीटीजीसीसी | जीजीसीएजीसीटीए |
| आरपी514 | एजीसीजीएएटीजी | एजीसीजीएएटीजी | सीएटीटीसीजीसीटी |
| आरपी515 | टीएटीजीसीटीजीसी | टीएटीजीसीटीजीसी | जीसीएजीसीएटीए |
| आरपी516 | एगाआगएक्ट | एगाआगएक्ट | एजीटीसीटीटीसीटी |
| आई7 मैंएनडेक्स नाम | आई7 मैंएनडेक्स अनुक्रम | अनुक्रमण के दौरान सूचकांक अनुक्रम जानकारी |
| आरपी701 | सीजीएजीटीएएटी | हमला |
| आरपी702 | टीसीटीसीसीजीजीए | टीसीसीजीजीएजीए |
| आरपी703 | एएटीजीएजीसीजी | सीजीसीटीसीएटीटी |
| आरपी704 | जीजीएएटीसीटीसी | GAGATTCC |
| आरपी705 | टीटीसीटीजीएएटी | अटकागा |
| आरपी706 | एसीजीएएटीटीसी | जीएएटीटीसीजीटी |
| आरपी707 | एजीसीटीटीसीएजी | सीटीजीएएजीसीटी |
| आरपी708 | जीसीजीसीएटीटीए | टीएएटीजीसीजीसी |
| आरपी709 | कैटाजीसीसीजी | सीजीजीसीटीएटीजी |
| आरपी710 | टीटीसीजीसीजीजीए | टीसीसीजीसीजीए |
| आरपी711 | जीसीजीसीजीएजीए | टीसीटीसीजीसीजीसी |
| आरपी712 | सीटीएटीसीजीसीटी | एजीसीजीएटीएजी |
| आरपी713 | सीसीटीएसीएजी | सीजीटीजीटीएजीजी |
| आरपी714 | जीटीएजीटीजीटीसी | जीएसीएक्टैक |
| आरपी715 | टीजीटीएटीजीसीए | टीजीसीएटीएसीए |
| आरपी716 | सीसीएजीएजीएक्टीजी | सीएजीटीसीटीजीजी |
| आरपी717 | एजीजीटीजीसीसीए | टीजीजीसीएसीसीटी |
| आरपी718 | टीसीएसीसीटीटीजी | सीएएजीजीटीजीए |
| आरपी719 | जीटीएटीसीटीटीटी | आआगताक |
| आरपी720 | सीएजीसीटीसीसीए | टीजीजीएजीसीटीजी |
| आरपी721 | टीसीजीसीसीटीटीए | TAAGGCGA |
| आरपी722 | सीटीएजीटीएजीजी | सीजीटीएसीटीएजी |
| आरपी723 | एजीसीजीटीएजीसी | जीसीटीएसीजीसीटी |
| आरपी724 | जीएजीसीटीसीजी | सीजीएजीजीसीटीसी |
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