विवरण
यूरेसिल-विशिष्ट एक्सीजन अभिकर्मक (जिसे USER के रूप में संदर्भित किया जाता है) यूरेसिल डीएनए ग्लाइकोसिलेज (UDG) और एंडोन्यूक्लिअस VIII (एंडो VIII) से युक्त एक एंजाइम कॉकटेल है। यह विशेष रूप से यूरेसिल स्थानों पर एकल-न्यूक्लियोटाइड अंतराल उत्पन्न करने में सक्षम है। UDG यूरेसिल बेस के विभाजन की सुविधा प्रदान करता है, जिसके परिणामस्वरूप फॉस्फोडाइस्टर शुगर-फॉस्फेट बैकबोन की अखंडता को बनाए रखते हुए AP साइट (एपुरिनिक/एपिरिमिडिनिक साइट) का निर्माण होता है। एंडो VIII की एंडोन्यूक्लिअस गतिविधि फॉस्फोडाइस्टर बोन को विभाजित करती हैदोनों 3 पर डी एस′ और 5′ एपूरिनिक साइट के सिरों पर, जिससे डीऑक्सीराइबोस शर्करा निकलती है जिसमें आधार की कमी होती है।
विशेषताएँ
कोई अवशिष्ट न्यूक्लिऐसेस या आर.एन.ए.सेज़ नहीं
उच्च छांटना दक्षता
अनुप्रयोग
आरएनए स्ट्रैंड-विशिष्ट लाइब्रेरी निर्माण
यूरैसिल-विशिष्ट एक्सीजन-मध्यस्थ क्लोनिंग (यूजर-एलआईसी)
डीएनए असेंबली, जैसे कि टेल मोनोमर्स की असेंबली
एकल कोशिकाओं से अनेक cDNA पुस्तकालयों का क्रमिक निर्माण
विशेष विवरण
एकाग्रता | 1 यू/µएल |
इकाई डीपरिभाषा | एक इकाई को 10 μ में एकल यूरैसिल बेस वाले 34-मेर डबल-स्ट्रैंडेड ऑलिगोन्युक्लियोटाइड को निक करने के लिए आवश्यक एंजाइम की मात्रा के रूप में परिभाषित किया गया हैएल प्रतिक्रिया प्रणाली को 37°C पर 15 मिनट तक रखा गया, जो सब्सट्रेट के 10 pmol के विभाजन के अनुरूप है। |
मैंनिष्क्रियण सीशर्तें | 75℃, 10 मिन |
अवयव
घटक सं. | नाम | 14537ES50 | 14537ES72 |
14537-ए | यूरैसिल-विशिष्ट एक्सीशन अभिकर्मक (1 यू/μएल) | 50 μएल | 250 μएल |
14537-बी | 10×यूरेसिल-विशिष्ट एक्सिशन अभिकर्मक प्रतिक्रिया बफर | 1.25 एमएल | 1.25 एमएल |
शिपिंग और भंडारण
उत्पादों को निम्न स्थानों पर संग्रहित किया जाना चाहिए -25℃ ~ -15℃ के लिए 1 वर्ष।
आंकड़ों
चित्र 1. छांटने के प्रभावों की तुलना
नोट: 10 pmol डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए युक्त dUTP को येसन के USER एंजाइम और आपूर्तिकर्ता A के एक तुलनीय उत्पाद का उपयोग करके निकाला गया। एगरोज़ जेल वैद्युतकणसंचलन के परिणामों से पता चला कि येसन के USER एंजाइम के निष्कासन प्रभाव आपूर्तिकर्ता A के साथ सुसंगत थे।
आकृति2यूजर-एलआईसी क्लोनिंग के लिए कॉलोनी गणना की तुलना
नोट: एक 600 बीपी डीएनए खंड को येसन के यूजर एंजाइम और आपूर्तिकर्ता ए के एक तुलनीय उत्पाद का उपयोग करके एक वेक्टर का निर्माण करने के लिए लिगेट किया गया था, जिसे फिर एक वेक्टर में बदल दिया गया था। ई कोलाई और संवर्धित किया गया। कल्चर प्लेट पर कॉलोनियों की संख्या देखी गई, और परिणामों ने संकेत दिया कि येसेन के यूज़र एंजाइम का उपयोग करके यूज़र-एलआईसी क्लोनिंग दक्षता आपूर्तिकर्ता ए की तुलना में बेहतर थी।
दस्तावेज़:
सुरक्षा डेटा पत्रक
14537_एमएसडीएस_संस्करण.EN20241210.पीडीएफ
नियमावली
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उपवास
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कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।