विवरण
राइबोन्यूक्लिऐस आर (RNase R) ई कोलाई, एक मैग्नीशियम-निर्भर 3′→5′ एक्सोरिबोन्यूक्लिऐस है जो कर सकना सभी रैखिक आरएनए को पचाता है लेकिन लैरिएट या गोलाकार आरएनए संरचनाओं को पचाता नहीं है। अधिकांश सेलुलर आरएनए को आरएनएसे आर द्वारा पूरी तरह से पचाया जाएगा, टीआरएनए, 5 एस आरएनए और इंट्रोन लैरिएट के अपवाद के साथ। आरएनएसे आर का उपयोग जैविक नमूनों में सर्कआरएनए के संवर्धन, इंट्रॉनिक लैरिएट अनुक्रमों की पहचान, एक्सोनिक सर्कआरएनए की पहचान, वैकल्पिक स्प्लिसिंग का अध्ययन करने के लिए किया जाता है।
विशेषताएँ
आईएसओ 13485 प्रमाणीकरण के साथ प्रभावकारिता और गुणवत्ता की गारंटी।
थोक या अनुरूप विन्यास में उपलब्ध।
लैरिएट लूप और वृत्ताकार आरएनए को संरक्षित करते हुए, रैखिक आरएनए को प्रभावी ढंग से तोड़ता है।
रेखीय आरएनए का चयनात्मक पाचन, प्रोटीन उत्पादन या इंट्रॉनिक सीडीएनए लाइब्रेरी निर्माण के लिए वृत्ताकार आरएनए के पृथक्करण को बढ़ाता है।
जीएमपी-ग्रेड आरएनएएस आर (14615)
विशिष्टताएँ
| स्रोत | एक पुनः संयोजक ई कोलाई RNAse R जीन ले जाने वाला स्ट्रेन ई कोलाई |
| इष्टतम तापमान | 37℃ |
| भंडारण बफर | 50 मिमी ट्रिस-एचसीएल,100 मिमी NaCl, 0.1 मिमी EDTA, 0.1% ट्राइटॉन® X-100, 1 मिमी डीटीटी, 50% ग्लिसरॉल, pH7.5 पर 25℃ |
| इकाई परिभाषा | एक इकाई 20 mM ट्रिस-एचसीएल (पीएच 8.0), 100 mM KCl और 0.1 mM MgCl में 37°C पर 10 मिनट में 1 μg पॉली-आर (ए) को एसिड-घुलनशील न्यूक्लियोटाइड में परिवर्तित करती है2. |
आवेदन
RNase R सर्कुलर RNA संश्लेषण (circRNA) में एक बुनियादी घटक के रूप में कार्य करता है। CircRNA में फार्मास्यूटिकल स्थिरता और जैव स्थिरता को बढ़ाने की संभावना है। अपनी सहसंयोजक रूप से बंद संरचनाओं के साथ, circRNAs RNA एक्सोन्यूक्लिअस का सामना करते हैं। [1,2] RNase R को वैकल्पिक स्प्लिसिंग, इंट्रोन cDNA उत्पादन और स्प्लिसिंग इंटरमीडिएट और लैरीएट के अलगाव सहित विभिन्न अध्ययनों में व्यापक अनुप्रयोग मिलता है।
अवयव
| घटक सं. | नाम | 14606ES72 | 14606ES86 | 14606ES92 |
| 14606-ए | आरएनसे आर (20 यू/μL) | 12.5 μएल | 125 μएल | 500 μएल |
| 14606-बी | 10×RNase आर रिएक्शन बफर | 250 μएल | 3 × 1 एमएल | 10 एमएल |
भंडारण
इस उत्पाद को 2 वर्षों तक -25~-15℃ तापमान पर संग्रहित किया जाना चाहिए।
निर्देश
एक स्टेराइल माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूब में निम्नलिखित प्रतिक्रिया प्रणाली तैयार करें
| अवयव | आयतन |
| 10×RNase आर रिएक्शन बफर | 2 μएल |
| आरएनए नमूना | 1 माइक्रोग्राम |
| आरएनसे आर (20 यू/μL) | 2-4 यू |
| आरएनेज़-मुक्त डीडीएच2हे | 20 तक μएल |
37 डिग्री सेल्सियस पर 10 से 15 मिनट तक रखें। 30 मिनट।
आंकड़ों
चित्र 1: रेखीय आरएनए अणुओं को येसेन आरएनएसी आर द्वारा पचाया जा सकता है।
चित्र 2: CircRNA को येसेन RNAse R द्वारा पचाया नहीं जा सकता।
नोट्स
- RNase R की सक्रियता के लिए 0.1-1.0 mM Mg की आवश्यकता होती है2+;
- आरएनए की वृद्धि के साथ, प्रतिक्रिया समय बढ़ाया जा सकता है और एंजाइम की मात्रा उचित रूप से बढ़ाई जा सकती है;
- आरएनए नमूनों में EDTA सामग्री RNase R की गतिविधि को प्रभावित कर सकती है।
- 70 डिग्री सेल्सियस पर 10 मिनट तक रखने से एंजाइम निष्क्रिय हो सकता है।
संदर्भ
- क्यू एल, यी जेड, शेन वाई, एट अल। SARS-CoV-2 और उभरते वेरिएंट के खिलाफ सर्कुलर RNA टीके। सेल. 2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
- चेन एल, वांग सी, सन एच, एट अल. सर्कआरएनए खोज और विश्लेषण के लिए जैव सूचना विज्ञान टूलबॉक्स। संक्षिप्त बायोइनफॉर्म. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001
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कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।