विवरण
T4 RNA लाइगेज 1, जिसे T4 RNA लाइगेज के नाम से भी जाना जाता है, एक ATP-निर्भर एंजाइम है जो सिंगल-स्ट्रैंडेड RNA (ssRNA), सिंगल-स्ट्रैंडेड DNA (ssDNA), या मोनोन्यूक्लियोटाइड अणुओं के 5'-P टर्मिनस और 3'-OH टर्मिनस के बीच फॉस्फोडाइस्टर बॉन्ड के निर्माण को उत्प्रेरित करता है। T4 RNA लाइगेज 1 ssRNA अणुओं के बीच (सबसे अधिक कुशलता से), ssDNA और ssRNA के बीच (कम दक्षता के साथ) लिगेशन कर सकता है, और ssDNA अणुओं के बीच लिगेशन के लिए भी इस्तेमाल किया जा सकता है (बहुत कम दक्षता के साथ)। यह ssRNA अणुओं के लिगेशन और NGS के लिए miRNA लाइब्रेरी निर्माण में 5' एडेप्टर के अटैचमेंट के लिए उपयुक्त है।
चित्र 1. T4 RNA लाइगेस 1 की क्रियाविधि
विशेषताएँ
एकल-रज्जुक आरएनए (एसएसआरएनए), एकल-रज्जुक डीएनए (एसएसडीएनए), या मोनोन्यूक्लियोटाइड अणुओं के 5'-पी टर्मिनस और 3'-ओएच टर्मिनस के बीच फॉस्फोडाइएस्टर बंध के गठन को उत्प्रेरित करता है।
अनुप्रयोग
आरएनए क्लोनिंग
एनजीएस के लिए miRNA लाइब्रेरी निर्माण में 5' एडेप्टर
परिपत्र आरएनए तैयारी
विशेष विवरण
| इकाई परिभाषा | एक इकाई को 5-[32P] rA16 के 1 नैनोमोल को 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट में फॉस्फेट-प्रतिरोधी रूप में परिवर्तित करने के लिए आवश्यक एंजाइम की मात्रा के रूप में परिभाषित किया गया है।हेसी |
| स्रोत | पुनः संयोजक प्रोटीन द्वारा व्यक्त इशरीकिया कोली T4 बैक्टीरियोफेज से प्राप्त होता है |
| प्रतिक्रिया की स्थितियाँ | 10×टी4 आरएल1 प्रतिक्रिया बफर: 500 एमएम ट्रिस-एचसीएल (25 पर पीएच 7.5)हेसी), 100 एमएम एमजीसीएल2, 20 mM DTT; 37 पर इष्टतम ऊष्मायनहेसी |
| निष्क्रियता की स्थितियाँ | 65 पर तापनहेसी 15 मिनट तक उबालने या 2 मिनट तक उबालने से T4 RNA लाइगेज 1 निष्क्रिय हो सकता है। वैकल्पिक रूप से, 50 mM EDTA pH 8.0 की अंतिम सांद्रता जोड़ने से T4 RNA लाइगेज 1 की प्रतिक्रिया समाप्त हो सकती है |
अवयव
| अवयव नहीं। | नाम | 14651ES80 | 14651ES90 |
| 14651-ए | टी4 आरएनए लाइगेस 1 (10 यू/μएल) | 500 μएल | |
| 14651-बी | 10×T4 RL1 प्रतिक्रिया बफर | 200 μएल | 1 एमएल |
शिपिंग और भंडारण
इस उत्पाद को -25 ~ -15 पर संग्रहित किया जाना चाहिएहेसी दो वर्षों के लिए।
दस्तावेज़:
सुरक्षा डेटा पत्रक
14651_एमएसडीएस_संस्करण EN20241209.पीडीएफ
नियमावली
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