विवरण
हाईफेयर™ सुपीरियर यूनिवर्सल मल्टीप्लेक्स वन स्टेप आरटी-क्यूपीसीआर जांच किट (यूडीजी प्लस) एक मल्टीप्लेक्स क्वांटिटेटिव पीसीआर किट है जो टेम्पलेट के रूप में आरएनए पर आधारित है। प्रयोग की प्रक्रिया में, रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और क्वांटिटेटिव पीसीआर को एक ही ट्यूब में किया गया, जिससे प्रयोगात्मक संचालन सरल हो गया और संदूषण का जोखिम कम हो गया।
इस किट में, पहले स्ट्रैंड cDNA को गर्मी प्रतिरोधी हाईफ़ेयर™ द्वारा कुशलतापूर्वक संश्लेषित किया गया था रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस और UNICON™ द्वारा मात्रात्मक रूप से प्रवर्धित हॉटस्टार्ट टैक डीएनए पॉलीमरेज़। किट में मुख्य रूप से अनुकूलित एमपी बफर, एंजाइम मिश्रण शामिल हैं। बफर समाधान में पहले से ही Mg शामिल है2+ और dNTP मिक्स। इसके अलावा, ऐसे कारक जो गैर-विशिष्ट पीसीआर प्रवर्धन को प्रभावी ढंग से रोक सकते हैं और कई qPCR प्रतिक्रियाओं की प्रवर्धन दक्षता में सुधार कर सकते हैं, जो प्रवर्धन दक्षता सुनिश्चित कर सकते हैं और कई प्रवर्धन प्रतिक्रिया तक ले जा सकते हैं। एयरोसोल संदूषण के जोखिम को प्रभावी ढंग से रोकने के लिए dUTP/UDG प्रणाली को जोड़ा गया था।
विशेषता
विशेषताएँ
1. जीअच्छी बहुमुखी प्रतिभा: यह रोगजनक सूक्ष्मजीवों, मानव जीनोम, पौधों और अन्य प्रजातियों के न्यूक्लिक एसिड के qPCR प्रवर्धन और पता लगाने के लिए उपयुक्त है.
2. उच्च संवेदनशीलता: सावधानीपूर्वक अनुकूलित बफर प्रणाली 250 प्रतियों/एमएल तक कम सांद्रता वाले टेम्पलेट्स की पहचान संवेदनशीलता में सुधार करती है.
3. डीयूपी/यूडीजी प्रणाली: डीयूटीपी/हीट-लैबाइल यूडीजी प्रदूषण रोधी प्रणाली को उत्पादों के एरोसोल प्रदूषण को कुशलतापूर्वक कम करने, झूठे सकारात्मक परिणामों को कम करने और प्रामाणिक परिणाम सुनिश्चित करने के लिए पेश किया गया है।.
4. सहायताइंग तेज़ कार्यक्रम: 40 मिनट के तेज कार्यक्रम के साथ संगत.
5. सुपर स्थिरता: स्थिरई 37 डिग्री सेल्सियस पर 14 दिनों तक, 10 बार दोहराया गया जमाना और पिघलना।
विशेष विवरण
| घटक सं. | 16901तों60 / 16901तों80 / 16901ES92 |
| आकार | 100 टी / 1000 टी / 10000 टी |
अवयव
| नाम | 16901ईएस60 (100टी) | 16901ईएस80 (1,000टी) | 16901ईएस92 (10,000टी) | |
| 16901-ए | 500 μएल | 5 एमएल | 50 एमएल | |
| 16901-बी | हाईफेयर™ एंजाइम मिश्रण | 100 μएल | 1 एमएल | 10 एमएल |
टिप्पणी: 1) 5×हाईफ़ेयर™ एमपी बफर हाईफेयर™ का संक्षिप्त नाम है सुपीरियर मल्टीप्लेक्स वन स्टेप आरटी-क्यूपीसीआर जांच बफर, जिसमें डीएनटीपी, डीयूटीपी, एमजी शामिल हैं2+, स्टेबलाइजर्स और अधिक।
2) हाईफेयर™ एंजाइम मिश्रण मुख्य रूप से शामिल है हाईफेयर™ रिवर्स ट्रांस्क्रिप्टेज़, UNICON™ हॉटस्टार्ट टैक डीएनए पॉलीमर्स, आरएनसे अवरोधक, और UDGase और इतने पर.
भंडारण
उत्पाद को 1 वर्ष के लिए -25℃ ~ -15℃ तापमान पर संग्रहित किया जाना चाहिए। इसे बार-बार जमने और पिघलने से बचाना चाहिए।
निर्देश
| आयतन (μएल) | अंतिम एकाग्रता | |
| 5×हाईफेयर™ एमपी बफर | 5 | 1× |
| हाईफेयर™ एंजाइम मिश्रण | 1 | - |
| प्राइमर मिश्रण (10 μM) | 0.4 प्रत्येक | 0.16 माइक्रोएम |
| जांच मिश्रण (10 μM) | 0.2 प्रत्येक | 0.08 माइक्रोएम |
| 1-5 | - | |
| आरएनसे फ्री एच2हे | से 25 | - |
1. प्रतिक्रिया संरचना:
टिप्पणी:उपयोग से पहले अच्छी तरह मिश्रण तैयार कर लें, तथा तीव्र कंपन के कारण उत्पन्न अत्यधिक बुलबुले से बचें।
ए) प्राइमर सांद्रता: भजन की पुस्तक मल्टीप्लेक्स प्राइमर सहित मिश्रण, स्थिति के आधार पर इष्टतम प्राइमर सांद्रता 0.1 और 1.0 μM के बीच हो सकती है।
बी) जांच सांद्रता: मल्टीप्लेक्स जांच लेबलिंग अंतर फ्लोरोसेंट समूह सहित जांच मिश्रण, स्थिति के आधार पर इष्टतम जांच सांद्रता 0.05 और 0 के बीच हो सकती है।5 μएम.
सी) टेम्पलेट कमजोरीकरण: qPCR अत्यधिक संवेदनशील है और टेम्पलेट को पतला करने की सिफारिश की जाती है। नियंत्रण Ct मान 20 और 35 के बीच उपयुक्त है।
डी) सिस्टम की तैयारी: फ़िल्टर तत्व के साथ अन हेड। क्रॉस संदूषण और एरोसोल संदूषण से बचें।
2. अनुकूलित साइक्लिंग प्रोटोकॉल
(1) मानक प्रवर्धन प्रक्रिया
| प्रतिक्रिया चरण | तापमान | समय | चक्र | |
| 1 | रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन | 50 डिग्री सेल्सियसए | 1 | |
| 2 | प्रारंभिक विकृतीकरण | 95° सेल्सियस | 5 मिन | 1 |
| 3 | प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95° सेल्सियस | 15 सेकंड | 45 चक्र |
| 60 डिग्री सेल्सियसबी | 30 सेकंडसी |
टिप्पणी:
a) रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन: तापमान का चयन किया जा सकता है 50°C या 55डिग्री सेल्सियस 10-15 मिनट के लिए.
बी) प्रवर्धन प्रतिक्रिया: तापमान को डिज़ाइन किए गए प्राइमरों के Tm मान के अनुसार समायोजित किया जाता है।
ग) प्रतिदीप्ति संकेत अधिग्रहण: कृपया प्रयोगात्मक प्रक्रिया को आवश्यकताओं के अनुसार निर्धारित करें यंत्र नियमावली.
(2) तीव्र प्रवर्धन कार्यक्रम
|
| प्रतिक्रिया चरण | तापमान | समय | चक्र |
| 1 | रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन | 50 डिग्री सेल्सियस | 5 मिन | 1 |
| 2 | प्रारंभिक विकृतीकरण | 95° सेल्सियस | 30 सेकंड | 1 |
| 3 | प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95° सेल्सियस | 5 सेकंड | 45 चक्र |
| 60 डिग्री सेल्सियस | 20 सेकंड |
टिप्पणी:यदि वास्तविक qPCR डिटेक्टर तीव्र प्रवर्धन का समर्थन करता है, तो कृपया पुष्टि के लिए पूर्व-परीक्षण करें।
3. अनुप्रयोग उपकरण
एबीआई 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT फ़ास्ट, स्टेपवन™, स्टेपवन प्लस™，एबीआई 7500, 7500 फास्ट, वीआईए™7, क्वांटस्टूडियो™ 3 और 5, क्वांटस्टूडियो™ 6,7,12k फ्लेक्स;
स्ट्रेटेजीन एमएक्स3000पी™, एमएक्स3005पी™, एमएक्स4000पी™;
जैव रेड सीएफएक्स96™, सीएफएक्स384™, आईसाइक्लर आईक्यू™, आईक्यू™5, माईआईक्यू™, मिनीऑप्टिकॉन™, ऑप्टिकॉन®, ऑप्टिकॉन® 2, क्रोमो4™;
एप्पेनडॉर्फ़ मास्टरसाइक्लर® ईपी रियलप्लेक्स, रियलप्लेक्स 2 एस;
Qiagen कॉर्बेट रोटर-जीन® क्यू, रोटर-जीन® 3000, रोटर-जीन® 6000;
रॉश एप्लाइड साइंस लाइटसाइक्लर® 480, लाइटसाइक्लर® 2.0; लाइटसाइक्लर® 96;
थर्मामीटरों वैज्ञानिक पिकोरियल साइक्लर; सेफीड स्मार्टसाइक्लर®; Illumina इको क्यूपीसीआर; स्लैन 96एस, 96पी.
नोट्स
कृपया अपने स्वास्थ्य और सुरक्षा को सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक PPE, जैसे लैब कोट और दस्ताने पहनें।!
कृपया RNasefree उपभोग्य सामग्रियों का उपयोग करें के लिए प्रयोग.
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कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।