विवरण
SUMO प्रोटीज 100 एमिनो एसिड के साथ संपूर्ण SUMO (स्मॉल यूबिक्विटिन-लाइक मॉडिफायर) लेबल प्रोटीन को पहचानता है और फ्यूजन प्रोटीन से SUMO को कुशलतापूर्वक काटता है। EK और TEV की पहचान साइटों की तुलना में, SUMO प्रोटीज में इसकी लंबी पहचान अनुक्रम के कारण उच्च विशिष्टता है, और प्रतिक्रिया पर्यावरण प्रणालियों की एक विस्तृत श्रृंखला में उच्च गतिविधि बनाए रखता है, जैसे तापमान (4-30 ℃), pH (5.5-9.5), आदि। SUMO प्रोटीज में एक पॉलीमराइज़्ड His लेबल भी होता है, जो SUMO प्रोटीज को हटाने और एफिनिटी क्रोमैटोग्राफी द्वारा लक्ष्य प्रोटीन को शुद्ध करने के लिए सुविधाजनक है।
विशेष विवरण
| कैट.नं. | 20410ES60 / 20410ES70 / 20410ES80 |
| आकार | 100 यू / 500 यू / 1000 यू |
| एंजाइम गतिविधि | 1 यू/μएल |
| इकाई परिभाषा | एंजाइम की आवश्यक मात्रा काटना 1×rTEV बफर (50 mM ट्रिस, pH 8.0, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT) में 3 μg सब्सट्रेट का >85% 30℃ पर 1 घंटे के लिए गतिविधि की एक इकाई के रूप में परिभाषित किया गया था |
| स्रोत | में व्यक्त ई कोलाई |
| लेबल | बहुलकित उसका लेबल |
| प्रोटीन शुद्धता | > 90% |
| आणविक वजन | 26.55 केडीए |
| भंडारण बफर | 25 मिमी ट्रिस-एचसीएल, पीएच 8.0、0.1% इगेपाल (एनपी-40)、250 एमएम NaCl、500μM डीटीटी、50% ग्लिसरीन |
अवयव
टिप्पणी:एंजाइम गतिविधि परिभाषा 10 × प्रोटीएज़ बफर का उपयोग करती है (-नमक)। SUMO प्रोटीएज़ की सक्रियता अपेक्षाकृत उच्च है में 10×प्रोटीएज़ बफर (-नमक), लेकिन अस्थिर सब्सट्रेट के लिए, 10 × प्रोटीएज़ बफर (+ नमक) का चयन किया जाना चाहिए। हम + नमक के साथ प्रतिक्रिया बफर 20410-बी2 भी प्रदान करते हैं।अपने प्रयोग के लिए सही बफर चुनें. 20410-बी2:500 मिमी ट्रिस-एचसीएल, पीएच 8.0, 2% इगेपाल (एनपी-40), 1.5 एम NaCl, 10 मिमी डीटीटी;20410-बी1:500 मिमी ट्रिस-एचसीएल, पीएच 8.0, 2% इगेपाल (एनपी-40), 10 मिमी डीटीटी. | ||||||||||||||||||||
भंडारण
इस उत्पाद को यहां संग्रहित किया जाना चाहिए -85~-65℃ 1 वर्ष के लिए।
निर्देश
- ईपी ट्यूब में निम्नलिखित प्रतिक्रिया प्रणाली तैयार की जाती है:
- 30 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें, एक अलग ईपी ट्यूब में 1, 2, 4 और 6 घंटे पर उपरोक्त प्रतिक्रिया समाधान के 20 μL को चूसें क्रमश।
- 20 μL जोड़ें का 2×एसडीएस बफर को ईपी ट्यूब में लोड करें और इसे -20 डिग्री सेल्सियस पर रखें।
- सभी नमूनों की प्रतिक्रिया पूरी होने के बाद, नमूनों को 5 मिनट तक उबाला गया और SDS-PAGE विश्लेषण के लिए 30 μL लिया गया। इष्टतम प्रतिक्रिया समय निर्धारित करें।
| अवयव | आयतन (μL) (प्रतिक्रिया प्रणाली को समान रूप से छोटा किया जा सकता है) |
| संलयन प्रोटीन | 50 माइक्रोग्राम |
| 10×प्रोटीएज़ बफर | 20 μएल |
| SUMO प्रोटीएज़ (1U/μL) | 10 μएल |
| डीडीएच2हे | 200 μL तक |
टिप्पणी: यदि संलयन प्रोटीन को कम तापमान उपचार की आवश्यकता होती है, तो प्रतिक्रिया समय को लम्बा करने और एंजाइम पाचन के प्रभाव को सुनिश्चित करने के लिए SUMO एंजाइम की मात्रा बढ़ाने के लिए प्रतिक्रिया समाधान को 4 ℃ पर रखा जा सकता है।
मेज़ 1. सूमो प्रोटीज पाचन क्रिया अलग-अलग तापमान पर
| इन्क्यूबेशन समय（एच） | विभिन्न तापमानों पर पाचन क्रिया (%) | |||
| 4℃ | 16℃ | 25℃ | 30℃ | |
| 0.5 | 48 | 73 | 83 | 88 |
| 1 | 60 | 87 | 90 | 93 |
| 2 | 71 | 94 | 94 | 95 |
| 3 | 74 | 95 | 95 | 95 |
नोट्स
1. कृपया अपने स्वास्थ्य और सुरक्षा को सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक पीपीई, जैसे लैब कोट और दस्ताने पहनें।
2. यह प्रॉडक्ट केवल शोध के उपयोग के लिए है।
भुगतान और सुरक्षा
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जाँच करना
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उपवास
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कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।