प्राकृतिक प्रोटीन ए एक कोशिका भित्ति सतह प्रोटीन है जो स्टैफिलोकोकस ऑरियस में पाया जाता है, यह प्रोटीन जी के समान है जिसे स्टैफिलोकोकस ऑरियस से अलग किया गया है। जाति जी या सी स्ट्रेप्टोकोकस, बाँध अधिकांश स्तनधारी आईजीजी द्वारा बातचीत प्रमुख रूप से साथ  एफसी क्षेत्र इम्युनोग्लोबुलिन (आईजी) के लिए प्रोटीन ए और प्रोटीन जी अलग-अलग होते हैं, लेकिन उनकी बंधन विशिष्टता में भिन्नता होती है। इसका उपयोग विभिन्न प्रकार के एंटीबॉडी (मोनोक्लोनल एंटीबॉडी और पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी) के पृथक्करण और शुद्धिकरण के लिए किया जा सकता है। प्रोटीन ए और प्रोटीन जी विभिन्न इम्युनोग्लोबुलिन उपवर्गों के लिए उनके बंधन गुणों में भिन्न होते हैं (विवरण के लिए परिशिष्ट 1 देखें)।
यह उत्पाद आनुवंशिक रूप से संशोधित प्रोटीन ए का उपयोग करता है, जो न केवल अपने आईजी आत्मीयता गुणों को बनाए रखता है, बल्कि गैर-विशिष्ट बंधन को कम करने के लिए प्राकृतिक प्रोटीन के गैर-प्रमुख बंधन डोमेन को भी हटा देता है। SuRi rProtein A Agarose Resin, जो मैट्रिक्स के रूप में अत्यधिक क्रॉस-लिंक्ड agarose gel और लिगैंड के रूप में संशोधित क्षार-प्रतिरोधी पुनः संयोजक प्रोटीन A है, में उच्च भौतिक रासायनिक स्थिरता है। इस उत्पाद के साथ एक-चरण आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी द्वारा जलोदर, सीरम और संस्कृति माध्यम के नमूनों से उच्च शुद्धता एंटीबॉडी प्राप्त की जा सकती है, जो उपयोग करने के लिए सुविधाजनक है और व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

अवयव

विशेष विवरण

शिपिंग और भंडारण

उत्पादों को आइस पैक के साथ भेजा जाता है।   इसे 2~8℃ पर स्थिर रूप से संग्रहीत किया जा सकता है 5 साल के लिए.

निर्देश

1. बफर तैयारी

यह अनुशंसा की जाती है कि निम्नलिखित उपयोग से पहले बफर्स ​​को 0.22μm या 0.45μm फिल्टर झिल्ली से फ़िल्टर किया जाना चाहिए। संतुलन/बंधन/धोने वाला बफर: 0.15 M NaCl, 20 mM ना2 एचपीओ4, पीएच 7.0

एल्यूशन बफर: 0.1 एम ग्लाइसिन, पीएच 3.0

न्यूट्रलाइजिंग बफर: 1 MTris-HCl, pH 8.5

2. नमूना तैयार करना

सुनिश्चित करना वह  नमूना समाधान है  उपयुक्त ईओण का ताकत और पीएच पहले लोड हो रहा है  स्तंभ, दोनों में से एक द्वारा सीरम नमूने, जलोदर, या कोशिका संवर्धन समाधान को बाइंड/वॉश बफर के साथ पतला करना, या नमूने को डायलिसिस द्वारा बाँधना/धोना बफर.

3. कॉलम पैकिंग

SuRi rProtein लोड करें ए एगरोज रेज़िन को उपयुक्त क्रोमेटोग्राफिक कॉलम में डालें, बुलबुले से बचने का ध्यान रखें।

4. नमूना शुद्धिकरण

1) संतुलन: क्रोमैटोग्राफिक स्तंभ है संतुलित बंधन बफर 5 का 5 टाइम्स  स्तंभ आयतन, इसलिए वह पैकिंग उसी बफर सिस्टम में है यह लक्ष्य प्रोटीन पर कार्य करता है, तथा प्रोटीन की सुरक्षा करने की भूमिका निभाता है।

2) नमूना लोड हो रहा है:  नमूना था लदा हुआ को  अच्छी संतुलित आरप्रोटीन ए अगारोज़ राल को सुनिश्चित करना भरा हुआ संपर्क लक्ष्य प्रोटीन और राल के बीच, वसूली में सुधार लक्ष्य प्रोटीन की दर, और अपशिष्ट को इकट्ठा करने के लिए परीक्षण किया जाएगा.

3) धुलाई: इससे धोएं 10-15 गुना स्तंभ आयतन की कपड़े धोने बफर, निकालना  अपवित्रता प्रोटीन जब तक विशेष रूप से सोख लिया गया, धोने का घोल इकट्ठा करें।

4) क्षालन: क्षालन साथ 5-10 बार स्तंभ आयतन की क्षालन बफर, इकट्ठा करना एलुएंट, वह है,  लक्ष्य प्रोटीन अवयव।

5) सीआईपी सफाई और संरक्षण: आम तौर पर उपयोग 0.1-0.5 एम नाओएच 3CV से अधिक, और  संपर्क समय है 15 मिनट; तब तटस्थ होने तक 5CV संतुलन समाधान के साथ कुल्ला। अंततः, यह 20% के साथ संतुलित इथेनॉल स्तंभ का 5 गुना आयतन, और तब संग्रहित  में 20%  इथेनॉल  का   वही  आयतन  पर  4 डिग्री सेल्सियस  को  रोकना    पैकिंग  से  प्राणी बैक्टीरिया द्वारा दूषित.

5. एसडीएस-पेज पहचान

नमूने प्राप्त किया में  शुद्धिकरण प्रक्रिया (शामिल मूल नमूने, प्रवाह अवयव, कपड़े धोने और शुद्धिकरण प्रभाव को निर्धारित करने के लिए एसडीएस-पीएजीई द्वारा एल्यूशन घटकों आदि का पता लगाया गया।

नोट्स

1. उत्पाद को फ्रिज में न रखें।
2. प्रोटीन AAgarose राल को उपयोग करने से पहले कई बार पूरी तरह से उलट दिया जाना चाहिए, ताकि agarose राल समान रूप से मिश्रित हो।
3. सभी प्रचालनों के दौरान, नमूने को 4°C या बर्फ पर संचालित करना आवश्यक है।
4. अपनी सुरक्षा और स्वास्थ्य के लिए, कृपया ऑपरेशन के समय लैब कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनें।
5. केवल अनुसंधान उपयोग के लिए.

संलग्न तालिका 1: बंधन क्षमता का सारांशएफ प्रोटीन ए और जी से आईजी अलग-अलग प्रजातियाँ

सुरी प्रोटीन ए अगारोज़ राल