विवरण
अल्ट्रान्यूक्लिअस, जिसे गैर-प्रतिबंधक एंडोन्यूक्लिअस, ब्रॉड-स्पेक्ट्रम न्यूक्लिअस के रूप में भी जाना जाता है, सेराटिया मार्सेसेन से प्राप्त एक गैर-विशिष्ट एंडोन्यूक्लिअस है, जो न्यूक्लिक एसिड में किसी भी न्यूक्लियोटाइड के बीच आंतरिक फॉस्फोडाइस्टर बॉन्ड को हाइड्रोलाइज करता है ताकि 2-5 बेस की लंबाई वाले 5'-मोनोफॉस्फेट ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड का उत्पादन किया जा सके। यह विभिन्न रूपों (डबल-स्ट्रैंडेड, सिंगल-स्ट्रैंडेड, रैखिक, गोलाकार, मूल या विकृत) में डीएनए और आरएनए को बहुत व्यापक परिस्थितियों (6 एम यूरिया, 0.1 एम गुआनिडीन एचसीएल, 0.4% ट्राइटन एक्स-100, 0.1% एसडीएस, 1 एमएम ईडीटीए, 1 एमएम पीएमएसएफ) के तहत विघटित कर सकता है और जैविक उत्पादों से न्यूक्लिक एसिड को हटाने के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। अल्ट्रान्यूक्लिअस को बाद में संबंधित तरीकों से भी हटाया जा सकता है।
यह किट विकृत और गैर-विकृत अल्ट्रान्यूक्लिज़ के अवशेषों का पता लगाने के लिए डबल-एंटीबॉडी सैंडविच एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (सैंडविच एलिसा) के सिद्धांत का उपयोग करती है। सबसे पहले, एक ठोस-चरण एंटीबॉडी बनाने के लिए एक एंटी-अल्ट्रान्यूक्लिज़ खरगोश पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी के साथ माइक्रोप्लेट को कोट करें। दूसरा, ठोस-चरण एंटीबॉडी माइक्रोप्लेट में अल्ट्रान्यूक्लिज़ मानक और परीक्षण नमूना जोड़ें, फिर बायोटिन लेबल वाले एंटी-अल्ट्रान्यूक्लिज़ पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी को जोड़ें, और अंत में, एंटीबॉडी + एंटीजन + एंटीबॉडी-बायोटिन + SA-HRP कॉम्प्लेक्स बनाने के लिए हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज-लेबल वाले स्ट्रेप्टाविडिन (SA-HRP) को जोड़ें। इसके बाद, कॉम्प्लेक्स को धोने के बाद रंग प्रतिक्रिया का निरीक्षण करने के लिए कॉम्प्लेक्स में TMB सब्सट्रेट जोड़ा गया। HRP एंजाइम के उत्प्रेरक के तहत TMB को नीले रंग में परिवर्तित किया जाता है और अंत में एसिड की उपस्थिति में पीले रंग में परिवर्तित किया जाता है, और रंग की छाया नमूने में अल्ट्रान्यूक्लिज़ की मात्रा के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबंधित होती है।
इस किट की पहचान परिमाणीकरण सीमा 0.047-3 ng/mL है; निचली पहचान सीमा 23.5 pg/mL है।
विशेषता
- अत्यधिक संवेदनशील: प्रक्रियाधीन और अंतिम जैविक नमूनों में 23 पीजी/एमएल अल्ट्रान्यूक्लिऐस अवशेषों का पता लगाना।
- सटीकता सुनिश्चित करता है: अल्ट्रान्यूक्लिऐस अवशेषों का 80%-110% की रिकवरी के साथ सटीक रूप से पता लगाया जा सकता है।
- विशिष्टता: YEASEN UltraNuclease के साथ सहयोग करें और अवशेषों का सटीक पता लगा सकते हैं।
- स्थिर: लॉट-टू-लॉट के बीच का अंतर कम है, किट की संपत्ति 6 दिनों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस से कम पर प्रभावित नहीं होती है।
- आसान संकेत संग्रहण: बायोटिन-स्ट्रेप्टाविडिन प्रणाली का उपयोग करके, संकेत को स्थिर रूप से बढ़ाया जा सकता है।
- पूर्ण किट: सभी प्रमुख घटक किट में प्रदान किए गए हैं, यह उपयोग के लिए लागत प्रभावी है।
आवेदन
- जैविक उत्पादों में अवशिष्ट अल्ट्रान्यूक्लिऐस परीक्षण
विनिर्देश
संवेदनशीलता | 23 पीजी/एमएल (सीमा 0.047~3 एनजी/एमएल) |
परख समय | <4 घंटे |
परख सिद्धांत | दो-साइट इम्यूनोएंजाइमेट्रिक परख |
सिग्नल प्रवर्धन | बायोटिन-स्ट्रेप्टाविडिन प्रणाली |
पता लगाने की तरंगदैर्ध्य | 450एनएम |
अवयव
घटक सं. | नाम | 36701ES59 (96 टी) |
36701-ए | एलिसा माइक्रोप्लेट्स | 1 प्लेट |
36701-बी | जांच एंटीबॉडी: बायोटिन-संयुग्मित खरगोश एंटी-अल्ट्रान्यूक्लिअस एंटीबॉडी | 35μL (0.2 मिलीग्राम/एमएल) |
36701-सी | मानक: अल्ट्रान्यूक्लिअस | 1 शीशी (500 एनजी/एमएल) |
36701-डी | एचआरपी-संयुग्मित स्ट्रेप्टाविडिन | 10 μएल |
36701-ई | तनुकरण बफर 1 | 45 एमएल |
36701-एफ | 20×वॉश बफर | 50 एमएल |
36701-जी | तनुकरण बफर 2 | 30 एमएल |
36701-एच | टीएमबी | 15 एमएल |
36701-आई | समाधान रोकें | 10 एमएल |
36701-जे | सीलिंग फिल्म | 5 टुकड़े |
शिपिंग और भंडारण
अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा किट को आइस पैक के साथ भेजा जाता है और इसे 2°C ~8°C पर संग्रहीत किया जा सकता है। बिना खोले उत्पाद एक वर्ष के लिए वैध है। एक बार अभिकर्मक खुलने के बाद, यह आधे साल के लिए वैध है। इस उत्पाद को कभी भी फ़्रीज़ न करें।
तैयार अभिकर्मकों का भंडारण:
1. पतला वाशिंग बफर और पतला बफर 2°C ~8°C पर 1 सप्ताह के लिए संग्रहीत किया जा सकता है
2. मानक 36701-सी तरल है और इसे 1 वर्ष के लिए 2°C ~8°C पर संग्रहीत किया जाता है
3. तैयार डिटेक्शन एंटीबॉडी और स्टॉप बफर को 2°C ~8°C पर 1 महीने तक संग्रहीत किया जा सकता है
आंकड़ों
- विशिष्टता प्रदर्शन
चित्र 1. अल्ट्रान्यूक्लिएस एलिसा किट की विशिष्टता ऊपर दिए गए चित्र में दर्शाई गई है।
किट में एंटीबॉडी के साथ गैर-विशिष्ट प्रतिक्रिया के लिए 8 मिमिक नमूनों का अनुमान लगाया गया था। 8 नमूनों और नकारात्मक नमूने के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। (*: नकारात्मक नमूने से महत्वपूर्ण अंतर; NS: नकारात्मक नमूने से कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं)
- परिशुद्धता प्रदर्शन
ए)
एकाग्रता (एनजी/एमएल) | एक ही प्लेट में 6 डुप्लिकेट डेटा | सीवी | |||||
3 | 2.412; | 2.390 | 2.323 | 2.367 | 2.476 | 2.291 | 2.53% |
1.5 | 1.780 | 1.883 | 1.884 | 1.908 | 1.876 | 1.883 | 2.19% |
0.75 | 1.123 | 1.215 | 1.166 | 1.18 | 1.140 | 1.109 | 3.12% |
0.375 | 0.691 | 0.706 | 0.708 | 0.722 | 0.722 | 0.679 | 2.21% |
0.1875 | 0.449 | 0.462 | 0.453 | 0.460 | 0.447 | 0.433 | 2.13% |
0.094 | 0.306 | 0.308 | 0.304 | 0.311 | 0.295 | 0.302 | 1.65% |
0.047 | 0.242 | 0.241 | 0.240 | 0.241 | 0.256 | 0.240 | 2.37% |
0 | 0.183 | 0.192 | 0.189 | 0.187 | 0.189 | 0.189 | 1.43% |
बी)
मध्यवर्ती शुद्धता | |||
सान्द्र | 1.5 एनजी/एमएल | 0.375 एनजी/एमएल | 0.094 एनजी/एमएल |
विश्लेषक 1 | 1.388 | 0.382 | 0.079 |
विश्लेषक 2 | 1.458 | 0.363 | 0.068 |
विश्लेषक 3 | 1.318 | 0.37 | 0.063 |
औसत | 1.388 | 0.372 | 0.07 |
एसडी | 0.070 | 0.010 | 0.008 |
सीवी | 5.04% | 2.59% | 11.69% |
चित्र 2. UCF.ME™ अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा की परिशुद्धता ऊपर बताए अनुसार मापी गई योजना।
मानक वक्र पर प्रत्येक सांद्रता पर 6 डुप्लिकेट का परीक्षण किया गया, और सभी CV% 5% से कम थे (चित्र 2A)। 3 विश्लेषक UCF.ME™ अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा प्रयोग करते हैं और CV% 15% से कम थे (चित्र 2B)।
- सटीकता सत्यापन
ए)
बी)
एकाग्रता | ओडी450 | परिणाम | ||||
एनजी/एमएल | दोहराएँ 1 | दोहराएँ 2 | दोहराएँ 3 | औसत | सान्द्र | वसूली% |
3 | 2.271 | 2.222 | 2.287 | 2.260 | 2.950 | 98% |
1.5 | 1.495 | 1.488 | 1.514 | 1.499 | 1.540 | 103% |
0.750 | 0.868 | 0.856 | 0.890 | 0.871 | 0.735 | 98% |
0.375 | 0.537 | 0.525 | 0.522 | 0.528 | 0.358 | 95% |
0.188 | 0.373 | 0.369 | 0.389 | 0.377 | 0.201 | 107% |
0.093 | 0.261 | 0.255 | 0.258 | 0.258 | 0.082 | 88% |
0 | 0.184 | 0.195 | 0.187 | 0.189 | 0 | 0 |
आंकड़े 3. UCF.ME™ की सटीकता अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा निम्नलिखित योजना के रूप में परखा गया।
अल्ट्रान्यूक्लिअस को 5 μg/mL सेल लाइसिस सॉल्यूशन (HEK293, E.coli, CHO, और Vero) में स्वतंत्र रूप से स्पाइक किया गया था, जिसकी अंतिम स्पाइक सांद्रता 1.5 ng/mL थी। विभिन्न सेल नमूनों में सटीकता अन्य विक्रेता (चित्र 3A) की तुलना में बेहतर दिखाई दी। अल्ट्रान्यूक्लिअस को एक वास्तविक नमूने (क्लाइंट द्वारा प्रदान किया गया) में स्पाइक किया गया था और इसे 3 ng/mL से 0.093 ng/mL तक 2 गुना पतला करके क्रमिक रूप से डाला गया था। स्पाइक रिकवरी सभी 80% ~ 110% (चित्र 3B) के बीच थी।
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