विवरण
साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिऐस एक गैर-विशिष्ट एंडोन्यूक्लिऐस है कौन समुद्री सूक्ष्मजीवों से प्राप्त और आनुवंशिक रूप से इंजीनियर द्वारा एस्चेरिचिया कोली (ई. कोली) में व्यक्त और शुद्ध किया जाता है। इस गैर-विशिष्ट, पुनः संयोजक एंडोन्यूक्लिएज में उच्च नमक सांद्रता (500mM NaCl) पर इष्टतम गतिविधि होती है, जो विभिन्न वर्कफ़्लो में दक्षता और उपज में सुधार कर सकती है।
यह किट डबल-एंटीबॉडी सैंडविच एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसर्बेंट परख (सैंडविच एलिसा) के सिद्धांत का उपयोग करके पता लगाती है। अवशिष्ट साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिएज नमूनों में। सबसे पहले, जोड़ें नमक सक्रिय अल्ट्रान्यूक्लिअस मानक और परीक्षण नमूना एंटी-नमक सक्रिय अल्ट्रान्यूक्लिअस लेपित माइक्रोटिटर स्ट्रिप्स के लिए (36719-ए), फिर जोड़ें पतला बायोटिन लेबल एंटी-अल्ट्रान्यूक्लिअस एंटीबॉडी (36719-सी), और अंत में जोड़ें Streptavidin-एचआरपी (36719-डी) एंटीबॉडी + एंटीजन + एंटीबॉडी-बायोटिन + एसए-एचआरपी कॉम्प्लेक्स बनाने के लिए। इसके बाद, जोड़ना टीएमबी सब्सट्रेट (36719-एच) कॉम्प्लेक्स को धोने के बाद रंग प्रतिक्रिया का निरीक्षण करने के लिए कॉम्प्लेक्स में डालें। टीएमबी को एचआरपी एंजाइम के उत्प्रेरक के तहत नीले रंग में परिवर्तित किया जाता है और अंत में एसिड की उपस्थिति में पीले रंग में परिवर्तित किया जाता है, और रंग की छाया की मात्रा के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबंधित होती है नमक सक्रिय नमूने में अल्ट्रान्यूक्लिऐस।
का पता लगाने इस किट की रेंज 0.047-3 एनजी/एमएल है; निचली पहचान सीमा है 0.024 एनग्राम/एमएल.
विशेषता
- अत्यधिक संवेदनशील: 0.024 ng/mL नमक सक्रियता का पता लगाना प्रक्रियाधीन और अंतिम जैविक नमूनों में अल्ट्रान्यूक्लिऐस अवशेष।
- सटीकता सुनिश्चित करता है: द साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिऐस अवशेषों का सटीकता से पता लगाया जा सकता है 75%-125%.
- विशिष्टता: YEASEN Salt Active के साथ सहयोगात्मक उपयोग अल्ट्रान्यूक्लिअस और अवशेषों का सटीक पता लगा सकते हैं।
- स्थिर: लॉट-टू-लॉट के बीच का अंतर कम है, किट गुण 37 डिग्री सेल्सियस से कम पर प्रभावित नहीं होता है 7 दिन.
- आसान संकेत संग्रहण: बायोटिन-स्ट्रेप्टाविडिन प्रणाली का उपयोग करके, संकेत को स्थिर रूप से बढ़ाया जा सकता है।
आवेदन
- अवशिष्ट नमक सक्रिय जैविक उत्पादों में अल्ट्रान्यूक्लिऐस परीक्षण
विनिर्देश
| संवेदनशीलता | 0.024 एनजी/एमएल (सीमा 0.047~3 एनजी/एमएल) |
| परख समय | <4 घंटे |
| परख सिद्धांत | दो-साइट इम्यूनोएंजाइमेट्रिक परख |
| सिग्नल प्रवर्धन | बायोटिन-स्ट्रेप्टाविडिन प्रणाली |
| पता लगाने की तरंगदैर्ध्य | 450एनएम-630एनएम |
अवयव
| घटक सं. | नाम | 36703ES96 |
| 36703-ए | एंटी-सॉल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिएज लेपित माइक्रोटिटर स्ट्रिप्स | 96 टी |
| 36703-बी* | मानक: साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिऐस | 2 शीशी |
| 36703-सी | डिटेक्शन एंटीबॉडी: बायोटिन-संयुग्मित एंटीबॉडी | 120 μएल |
| 36703-डी | Streptavidin-एचआरपी | 60 μएल |
| 36703-ई | तनुकरण बफर 1 | 50 एमएल |
| 36703-एफ | वॉश बफर कंसन्ट्रेट (20×) | 50 एमएल |
| 36703-जी | तनुकरण बफर 2 | 30 एमएल |
| 36703-एच | टीएमबी सब्सट्रेट | 15 एमएल |
| 36703-आई | समाधान रोकें | 10 एमएल |
| 36703-जे | प्लेट सीलर | 5 प्रत्येक |
* 1. इस किट में स्टॉप सॉल्यूशन नहीं दिया गया है, इसे उपयोगकर्ता द्वारा तैयार किया जाना चाहिए। 1M HCl को स्टॉप सॉल्यूशन के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है;
* 2. मानक (36719-बी) लियोफिलाइज्ड पाउडर है।
भंडारण
इस उत्पाद को 2°C ~8°C पर संग्रहित किया जाना चाहिए। बिना खोले उत्पाद एक वर्ष के लिए वैध है। अभिकर्मक खुलने के बाद, यह आधे वर्ष के लिए वैध है।
*किट प्राप्त होने पर, कृपया जांच लें कि सभी घटक पूर्ण हैं या नहीं और उन्हें तुरंत उचित स्थिति में संग्रहित करें।
आंकड़ों
- शुद्धता प्रदर्शन
ए)repeatability
| स्पाइक्ड नमूना | इंट्रा-परख | ||
| डुप्लिकेट | औसत सांद्रता (एनजी/एमएल) | सीवी (%) | |
| एस-1.5 एनजी/एमएल | 10 | 1.344 | 2.97% |
| एस-0.375 एनजी/एमएल | 10 | 0.260 | 2.27% |
| एस-0.094 एनजी/एमएल | 10 | 0.061 | 2.56% |
बी)मध्यवर्ती परिशुद्धता
| स्पाइक्ड नमूना | अंतर-परख | ||
| डुप्लिकेट | औसत सांद्रता (एनजी/एमएल) | सीवी (%) | |
| एस-1.5 एनजी/एमएल | 30 | 1.335 | 5.70% |
| एस-0.375 एनजी/एमएल | 30 | 0.258 | 5.59% |
| एस-0.094 एनजी/एमएल | 30 | 0.064 | 6.82% |
तालिका 1. की परिशुद्धता नमक सक्रिय अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा का परीक्षण उपरोक्त प्रकार से किया गया योजना
10 डुप्लिकेट का परीक्षण किया गया 3 सांद्रता मानक वक्र पर, और सभी CV% 5% से कम थे (चित्र 2A)। बहुत सारा नमक सक्रिय अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा किटों का परीक्षण किया गया और सी.वी.% 10% से कम था (चित्र 2बी)।
- सटीकता सत्यापन
| तनुकरण कारक | तनुकरण पुनर्प्राप्ति (%) | तनुकरण पुनर्प्राप्ति की सीमा（%） |
| 1:2 | 92.5 | 87.5-98.9 |
| 1:4 | 87.0 | 79.0-95.2 |
| 1:8 | 92.6 | 78.9-106.2 |
| 1:16 | 96.9 | 79.1-118.1 |
| स्पाइक्ड नमूने | स्पाइक रिकवरी (%) | स्पाइक रिकवरी की रेंज（%） |
| एस-0.75 एनजी/एमएल | 105.3 | 91.0-122.1 |
| एस-0.18एनजी/एमएल | 96.6 | 86.5-105.5 |
तालिका 2. UCF.ME™ अल्ट्रान्यूक्लिअस एलिसा की सटीकता निम्नलिखित योजना के अनुसार परखी गई
उच्च साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिज़ सांद्रता वाले प्रोटीन नमूने को क्रमिक रूप से 2 गुना पतला किया गया और 0.75 एनजी/एमएल और 0.18 एनजी/एमएल साल्ट एक्टिव अल्ट्रान्यूक्लिज़ के साथ स्पाइक भी किया गया। कमजोर पड़ने की रिकवरी और स्पाइक रिकवरी सभी 75%-125% के भीतर थे (आंकड़े 3).
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