विवरण
यूकेरियोट्स में, mRNA पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल संशोधनों से गुजरता है, जिससे 5' छोर पर एक विशेष संरचना बनती है जिसे कैप संरचना के रूप में जाना जाता है। यह संरचना mRNA स्थिरता, परिवहन और अनुवाद में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है। वैक्सीनिया वायरस कैपिंग एंजाइम एक प्रभावी एंजाइम है जो कैप संरचना के निर्माण को उत्प्रेरित करता है। इसमें दो सबयूनिट, D1 और D12 होते हैं, और इसमें RNA ट्राइफॉस्फेट गतिविधि, गुआनिलिलट्रांसफेरेज़ गतिविधि और गुआनिन N7-मिथाइलट्रांसफेरेज़ गतिविधि होती है। यह 7-मिथाइलगुआनोसिन कैप संरचना (m7Gppp) को RNA के 5' छोर (m7Gppp5'N) से जोड़ सकता है।
कैपिंग बफर (कैपिंग बफर), ग्वानोसिन ट्राइफॉस्फेट (जीटीपी), एस-एडेनोसिलमेथियोनीन (एसएएम) और अन्य घटकों की उचित सांद्रता की उपस्थिति में वैक्सीनिया वायरस कैपिंग एंजाइम, सही दिशा सुनिश्चित करते हुए एक घंटे के भीतर आरएनए को कैप करने में सक्षम है।
यह किट वैक्सीनिया वायरस कैपिंग एंजाइम की अवशिष्ट मात्रा का पता लगाने के लिए डबल एंटीबॉडी सैंडविच एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (ELISA) के सिद्धांत का उपयोग करती है। वैक्सीनिया वायरस कैपिंग एंजाइम मानक और परीक्षण नमूनों को एंटी-वैक्सीनिया वायरस कैपिंग एंजाइम एंटीबॉडी (36709-A) के साथ एक प्री-कोटेड एंजाइम प्लेट में जोड़ा जाता है, इसके बाद एक पतला बायोटिन-लेबल कैपिंग एंजाइम डिटेक्शन एंटीबॉडी (36709-C) और अंत में स्ट्रेप्टाविडिन-HRP (SA-HRP) (36709-D) मिलाया जाता है। यह एंटीबॉडी+एंटीजन+एंटीबॉडी-बायोटिन+SA-HRP कॉम्प्लेक्स बनाता है। धोने के बाद, रंग विकसित करने के लिए TMB सब्सट्रेट समाधान (36709-H) मिलाया जाता है।
एचआरपी एंजाइम के उत्प्रेरक के तहत, टीएमबी रंगहीन से नीले रंग में बदल जाता है, और स्टॉप सॉल्यूशन (36709-आई) की क्रिया के तहत, अंततः पीले रंग में परिवर्तित हो जाता है। पीले रंग की तीव्रता नमूने में पाए गए वैक्सीनिया वायरस कैपिंग एंजाइम की मात्रा के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबंधित है।
अवयव
| नहीं। | नाम | 36709ES48 | 36709ES96 |
| 36709-ए | एंटी-वैक्सीनिया कैपिंग एंजाइम लेपित माइक्रोटिटर स्ट्रिप्स | 48 टी | 96 टी |
| 36709-बी* | मानक: वैक्सीनिया कैपिंग एंजाइम | 1 शीशी | 2 शीशी |
| 36709-सी | खोज एंटीबॉडी: बायोटिन-संयुग्मित एंटीबॉडी | 60 μएल | 120 μएल |
| 36709-डी | Streptavidin-एचआरपी | 20 μएल | 40 μएल |
| 36709-ई | तनुकरण बफर 1 | 25 एमएल | 45 एमएल |
| 36709-एफ | वॉश बफर सांद्रतादर (20×) | 25 एमएल | 50 एमएल |
| 36709-जी | तनुकरण बफर 2 | 15 एमएल | 30 एमएल |
| 36709-एच | टीएमबी सब्सट्रेट | 8 एमएल | 15 एमएल |
| 36709-आई | समाधान रोकें | 5 एमएल | 10 एमएल |
| 36709-जे | प्लेट सीलर | 3 प्रत्येक | 5 प्रत्येक |
*मानक 36709-बी एक लाइओफिलाइज़्ड पाउडर है।
शिपिंग और भंडारण
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