विवरण
Hieff Trans™ यूनिवर्सल ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक नवीनतम नैनो तकनीक के आधार पर विकसित एक बहुउद्देश्यीय, सुविधाजनक और कुशल लिपोसोम ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक है। यह प्राथमिक कोशिकाओं सहित डीएनए, आरएनए और ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स के ट्रांसफ़ेक्शन के लिए उपयुक्त है, न्यूरॉन्स सहित मुश्किल से ट्रांसफ़ेक्ट होने वाली कोशिकाओं में उच्च ट्रांसफ़ेक्शन दक्षता होती है। इसका अनूठा सूत्र इसे सीधे माध्यम में जोड़ने की अनुमति देता है, और सीरम की उपस्थिति ट्रांसफ़ेक्शन दक्षता को प्रभावित नहीं करती है, जो सीरम हटाने के कारण कोशिकाओं को होने वाले नुकसान को कम करती है। ट्रांसफ़ेक्शन के बाद न्यूक्लिक एसिड-ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक कॉम्प्लेक्स को हटाना या नए माध्यम से बदलना आवश्यक नहीं है, और कोशिकाओं की पोषक स्थिति के अनुसार 4-6 घंटे बाद ताज़ा माध्यम को भी बदला जा सकता है।
उत्पाद घटक
| घटक संख्या | अवयव | बिल्ली#/आकार | ||
| 40808ES02 | 40808ES03 | 40808ES03 | ||
| 40808-ए | UNIVERSAL-एक | 0.5 एमएल | 1 एमएल | 5×1 एमएल |
| 40808-बी | यूनिवर्सल-बी | 0.5 एमएल | 1 एमएल | 5×1 एमएल |
शिपिंग और भंडारण
उत्पाद को बर्फ के पैक के साथ भेजा जाता है और इसे एक वर्ष के लिए 2-8 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता है। फ्रीज न करें!
चेतावनी
1) अभिकर्मक ऑपरेशन के दौरान, यह बेहतर है कि सेल संगम 70% -90% तक पहुंच जाए, और विशिष्ट चढ़ाना घनत्व कोशिकाओं की स्थिति के अनुसार निर्धारित किया जाता है।
2) ट्रांसफेक्शन कॉम्प्लेक्स की तैयारी के लिए सीरम-मुक्त माध्यम में डीएनए और ट्रांसफेक्शन अभिकर्मकों को पतला करना आवश्यक है।
3) ट्रांसफ़ेक्शन के दौरान माध्यम में एंटीबायोटिक्स नहीं मिलाए जा सकते।
4) उच्च शुद्धता वाले डीएनए या आरएनए का उपयोग उच्च ट्रांसफेक्शन दक्षता प्राप्त करने में मदद करता है, और प्लास्मिड में एंडोटॉक्सिन ट्रांसफेक्शन का दुश्मन है।
5) 2-8ºC पर स्टोर करें, ध्यान रखें कि ढक्कन को लंबे समय तक बार-बार न खोलें।
6) अधिकतम अभिकर्मक दक्षता प्राप्त करने के लिए पहले उपयोग के लिए न्यूक्लिक एसिड सांद्रता और अभिकर्मक मात्रा को अनुकूलित किया जाना चाहिए।
7) यह उत्पाद केवल वैज्ञानिक अनुसंधान उद्देश्यों के लिए है!
निर्देश
डीएनए का ट्रांसफ़ेक्शन
[नोट] उपयोग किए जाने वाले ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक की मात्रा कोशिका के प्रकार और अन्य प्रयोगात्मक स्थितियों से प्रभावित होती है। पहली बार उपयोग की इष्टतम मात्रा को अनुकूलित करने के लिए एक ग्रेडिएंट सेट करने की अनुशंसा की जाती है।
1) कोशिकाओं को प्लेट किया जाता है, और ट्रांसफेक्शन के समय तक कोशिका संगम 70% -90% होना चाहिए।
2) नीचे दी गई तालिका के अनुसार यूनिवर्सल-बी घोल को ऑप्टी-एमईएम माध्यम के साथ पतला करें और धीरे से मिलाएं।
3) डीएनए प्रीमिक्स प्राप्त करने के लिए ऑप्टी-एमईएम माध्यम के साथ डीएनए को पतला करें, फिर यूनिवर्सल-ए घोल डालें और पतला डीएनए प्राप्त करने के लिए धीरे से मिलाएं।
4) पतला डीएनए को पतला यूनिवर्सल-बी घोल (1:1 अनुपात) में मिलाएं।
5) कमरे के तापमान पर 5 मिनट तक रखें।
6) डीएनए-लिपोसोम कॉम्प्लेक्स को बूंद-बूंद करके कोशिकाओं में डालें और धीरे से मिलाएं।
7) जीन अभिव्यक्ति विश्लेषण तक 48-96 घंटे के लिए 37°C, 5% CO2 इनक्यूबेटर पर इनक्यूबेट करें।
siRNA का ट्रांसफ़ेक्शन
siRNA के अभिकर्मण की प्रक्रिया DNA अभिकर्मण के समान ही है, सिवाय इसके कि siRNA को पतला करते समय यूनिवर्सल-A घोल (चरण 3) को मिलाने की आवश्यकता नहीं होती है।
तालिका 1 विभिन्न कोशिका संवर्धन वाहिकाओं में ट्रांसफ़ेक्शन की मात्रा (केवल संदर्भ के लिए)
| कोशिका संवर्धन वाहिकाएँ | 96 अच्छी तरह से | 24-अच्छी तरह से | 6-अच्छी तरह से | |
| आसंजक कोशिकाएं | 1-4×104 | 0.5-2×105 | 0.25-1×106 | |
| नीचे दी गई तालिका के अनुसार यूनिवर्सल-बी घोल को ऑप्टि-एमईएम माध्यम के साथ पतला करें और धीरे से मिलाएं। | ऑप्टि-एमईएम माध्यम | 5 μएल | 25 μएल | 125 μएल |
| यूनिवर्सल-बी | 0.2 μएल | 1 μएल | 5 μएल | |
| डीएनए प्रीमिक्स प्राप्त करने के लिए डीएनए को ऑप्टी-एमईएम माध्यम के साथ पतला करें, फिर यूनिवर्सल-ए घोल डालें और पतला डीएनए प्राप्त करने के लिए धीरे से मिलाएं। | ऑप्टि-एमईएम माध्यम | 5 μएल | 25 μएल | 125 μएल |
| डीएनए (0.5–5 μg/μL) | 0.1 माइक्रोग्राम | 0.5 माइक्रोग्राम | 2.5 माइक्रोग्राम | |
| यूनिवर्सल-ए(2 μL/μg डीएनए) | 0.2 μएल | 1 μएल | 5 μएल | |
| पतला डीएनए को पतला यूनिवर्सल-बी घोल (1:1 अनुपात) में मिलाएं। | पतला डीएनए समाधान | 5 μएल | 25 μएल | 125 μएल |
| यूनिवर्सल-बी | 5 μएल | 25 μएल | 125 μएल | |
| कमरे के तापमान पर 5 मिनट तक रखें। | ||||
| डीएनए-लिपोसोम कॉम्प्लेक्स | घटक(प्रत्येक कुआं) | 96 अच्छी तरह से | 24-अच्छी तरह से | 6-अच्छी तरह से |
| ऑप्टी सदस्य | 10 μएल | 50 μएल | 250 μएल | |
| डीएनए(0.5–5 μg/μL) | 0.1 माइक्रोग्राम | 0.5 माइक्रोग्राम | 2.5 माइक्रोग्राम | |
| यूनिवर्सल-बी | 0.2 μएल | 1 μएल | 5 μएल | |
| UNIVERSAL-एक | 0.2 μएल | 1 μएल | 5 μएल | |
| डीएनए-लिपोसोम कॉम्प्लेक्स को बूंद-बूंद करके कोशिकाओं में डालें और धीरे से मिलाएं। | डीएनए-लिपोसोम कॉम्प्लेक्स | 10 μएल | 50 μएल | 250 μएल |
[नोट] तालिका में उपयोग की गई मात्रा केवल संदर्भ के लिए है। उपयोग की जाने वाली डीएनए और यूनिवर्सल-बी समाधान की विशिष्ट मात्रा को सेल प्रकार और अन्य प्रयोगात्मक स्थितियों के अनुसार अनुकूलित किया जाना चाहिए। अनुपात 1:0.5-1:5 के बीच रखने की सिफारिश की जाती है।
(1) प्रश्न: क्या न्यूक्लिक एसिड ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक कॉम्प्लेक्स तैयार करते समय सीरम मौजूद हो सकता है?
उत्तर: सीरम की उपस्थिति लिपोसोम के निर्माण को प्रभावित करेगी। न्यूक्लिक एसिड ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक परिसरों की तैयारी करते समय सीरम-मुक्त माध्यम (आमतौर पर एमईएम माध्यम) का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।
(2) प्रश्न: क्या अभिकर्मक अभिकर्मक को जमाया जा सकता है?
उत्तर: इस अभिकर्मक को 2-8°C पर संग्रहित किया जाना चाहिए, तथा ढक्कन को बार-बार और लंबे समय तक खोलने से बचना चाहिए, क्योंकि ढक्कन को लंबे समय तक खोलने से लाइपोसोम ऑक्सीकरण हो जाएगा और अभिकर्मक दक्षता प्रभावित होगी।
(3) प्रश्न: Hieff Trans™ यूनिवर्सल ट्रांसफेक्शन रिएजेंट का उपयोग करते समय मुझे क्या ध्यान देना चाहिए?
ए: 1) अभिकर्मक ऑपरेशन के दौरान, यह बेहतर है कि सेल संगम 70% -90% तक पहुंच जाए, और विशिष्ट चढ़ाना घनत्व कोशिकाओं की स्थिति के अनुसार निर्धारित किया जाता है।
2) ट्रांसफेक्शन कॉम्प्लेक्स की तैयारी के लिए सीरम-मुक्त माध्यम में डीएनए और ट्रांसफेक्शन अभिकर्मकों को पतला करना आवश्यक है।
3) ट्रांसफ़ेक्शन के दौरान माध्यम में एंटीबायोटिक्स नहीं मिलाए जा सकते।
4) उच्च शुद्धता वाले डीएनए या आरएनए का उपयोग उच्च ट्रांसफेक्शन दक्षता प्राप्त करने में मदद करता है, और प्लास्मिड में एंडोटॉक्सिन ट्रांसफेक्शन का दुश्मन है।
5) 2-8ºC पर स्टोर करें, ध्यान रखें कि ढक्कन को लंबे समय तक बार-बार न खोलें।
6) उच्चतम अभिकर्मक दक्षता प्राप्त करने के लिए न्यूक्लिक एसिड सांद्रता और अभिकर्मक मात्रा को पहले उपयोग के लिए अनुकूलित किया जाना चाहिए।
(4) प्रश्न: क्या ट्रांसफ़ेक्शन के बाद इसे समाप्त करने की आवश्यकता है?
उत्तर: कोई ज़रूरत नहीं है। न्यूक्लिक एसिड-ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक कॉम्प्लेक्स को हटाने या ट्रांसफ़ेक्शन के बाद ताज़ा माध्यम से बदलने की ज़रूरत नहीं है, और कोशिकाओं की पोषक स्थिति के अनुसार 4-6 घंटे के बाद ताज़ा माध्यम को भी बदला जा सकता है।
(5) प्रश्न: क्या ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक का उपयोग वायरल वेक्टर पैकेजिंग के ट्रांसफ़ेक्शन के लिए किया जा सकता है?
उत्तर: हां.वायरल वेक्टर पैकेजिंग की दक्षता आवश्यक रूप से ट्रांसफेक्शन की दक्षता से संबंधित नहीं है, बल्कि पैकेजिंग प्लास्मिड के चयन और प्लास्मिड के बीच के अनुपात से भी संबंधित है।
भुगतान और सुरक्षा
आपकी भुगतान जानकारी सुरक्षित रूप से संसाधित की जाती है। हम क्रेडिट कार्ड के विवरण को संग्रहीत नहीं करते हैं और न ही आपके क्रेडिट कार्ड की जानकारी तक पहुंच है।
जाँच करना
आपको यह भी पसंद आ सकता हैं
उपवास
यह उत्पाद केवल शोध उद्देश्यों के लिए है और मनुष्यों या जानवरों में चिकित्सीय या नैदानिक उपयोग के लिए अभिप्रेत नहीं है। उत्पाद और सामग्री येसेन बायोटेक्नोलॉजी के स्वामित्व वाले पेटेंट, ट्रेडमार्क और कॉपीराइट द्वारा संरक्षित हैं। ट्रेडमार्क प्रतीक मूल देश को इंगित करते हैं, जरूरी नहीं कि सभी क्षेत्रों में पंजीकरण हो।
कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।