डी-लूसिफ़ेरिन लूसिफ़ेरेज़ एंजाइम लूसिफ़ेरेज़ के लिए एक सामान्य सब्सट्रेट है और इसका उपयोग आमतौर पर पूरे बायोटेक्नोलॉजी में किया जाता है, विशेष रूप से इन विवो इन विवो इमेजिंग में। क्रिया का तंत्र यह है कि लूसिफ़ेरिन (सब्सट्रेट) को ATP और लूसिफ़ेरेज़ की उपस्थिति में प्रकाश उत्सर्जित करने के लिए ऑक्सीकृत किया जा सकता है। जब लूसिफ़ेरिन की अधिकता होती है, तो उत्पादित प्रकाश क्वांटा की संख्या लूसिफ़ेरेज़ की सांद्रता के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबंधित होती है (नीचे चित्र देखें)। लूसिफ़ेरेज़ (ल्यूक) को एन्कोड करने वाले जीन वाले प्लास्मिड के साथ कोशिकाओं को संक्रमित करने और इसे चूहों और चूहों जैसे शोध जानवरों में पेश करने के बाद, कोशिकाओं में लूसिफ़ेरिन को इंजेक्ट किया जाता है, और प्रकाश की तीव्रता में परिवर्तन BLI द्वारा पता लगाया जाता है, जिससे रोग की प्रगति की स्थिति या किसी दवा की चिकित्सीय प्रभावकारिता की वास्तविक समय की निगरानी की अनुमति मिलती है, उदाहरण के लिए। इस प्रतिक्रिया प्रणाली पर एटीपी के प्रभाव का उपयोग बायोल्यूमिनेसेंस तीव्रता में परिवर्तन के आधार पर ऊर्जा या महत्वपूर्ण संकेतों को इंगित करने के लिए भी किया जा सकता है।

डी-लूसिफ़ेरिन का उपयोग आमतौर पर इन विट्रो अध्ययनों में भी किया जाता है जिसमें ल्यूसिफ़रेज़ और एटीपी स्तर विश्लेषण, रिपोर्टर जीन विश्लेषण, उच्च थ्रूपुट अनुक्रमण और विभिन्न संदूषण परख शामिल हैं। वर्तमान में बाजार में तीन उत्पाद रूप हैं, डी-लूसिफ़ेरिन (मुक्त एसिड), डी-लूसिफ़ेरिन सोडियम नमक और डी-लूसिफ़ेरिन पोटेशियम नमक। इन तीन उत्पादों के बीच मुख्य अंतर उनकी घुलनशीलता विशेषताओं में है; डी-लूसिफ़ेरिन (मुक्त एसिड) पानी और बफर सिस्टम में कम घुलनशील है, जब तक कि यह NaOH और KOH समाधान जैसे कमजोर आधारों में घुलनशील न हो। सोडियम और पोटेशियम लवण के रूप में डी-लूसिफ़ेरिन पानी या बफर में बहुत आसानी से और जल्दी से घुल जाता है, उपयोग में आसान है, और विलायक गैर विषैले हैं, जो इसे इन विवो प्रयोगों के लिए विशेष रूप से उपयुक्त बनाता है। जब तरल पदार्थ के रूप में तैयार किया जाता है, तो अधिकांश अनुप्रयोगों के लिए तीन उत्पादों के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं होता है।

विशेषताएँ

• कोई विकिरण नहीं, जीवित जीवों के लिए लगभग हानिरहित।
• बायोलुमिनेसेंस, कोई उत्तेजना प्रकाश स्रोत नहीं।
• यह इतना संवेदनशील है कि आप इसे कुछ सौ कोशिकाओं में ही पहचान सकते हैं।
• अच्छी पैठ, 3-4 सेमी ऊतक गहराई अभी भी पता लगाया जा सकता है।
• उच्च संकेत-से-शोर अनुपात, मजबूत प्रतिदीप्ति संकेत और अच्छा हस्तक्षेप-विरोधी।

अनुप्रयोग

• नग्न चूहों में ट्यूमरजनन प्रयोग में, ट्यूमर की वृद्धि को बिना किसी आक्रमण के, वास्तविक समय में, ट्यूमर स्ट्रिपिंग माप के बिना देखा गया।
• ट्यूमर के विकास या मेटास्टेसिस पर प्रशासन के प्रभाव का परीक्षण करने के लिए, फ्लोरेसिन सब्सट्रेट को दवा प्रयोग में हस्तक्षेप किए बिना, 3 घंटे के भीतर पूरी तरह से समाप्त किया जा सकता है।
• पशुओं में विदेशी कोशिकाओं के स्थानीयकरण और वितरण का पता लगाया गया।
• दवा उपचार या रोग की प्रगति के दौरान जीन अभिव्यक्ति में परिवर्तन का पता लगाने के लिए लक्ष्य जीन या लक्ष्य जीन के प्रमोटर को ल्यूसिफ़रेज़ जीन के साथ जोड़ा जाता है।
• स्टेम कोशिका प्रत्यारोपण, उत्तरजीविता और प्रसार की निगरानी करना; जीव में स्टेम कोशिकाओं के वितरण और प्रवास का पता लगाना।

विशेष विवरण

अवयव

शिपिंग और भंडारण

बर्फ के पैक में ले जाया जा सकता है; -20 डिग्री सेल्सियस तापमान पर सूखा और प्रकाश से सुरक्षित रखा जा सकता है; 1 वर्ष।

आंकड़ों

दस्तावेज़:

सुरक्षा डेटा पत्रक

नियमावली

उद्धरण एवं संदर्भ:

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