स्रोत

रिकॉम्बिनेंट ह्यूमन CD73/NT5E प्रोटीन को HEK293 से C-टर्मिनल पर His टैग के साथ व्यक्त किया जाता है। इसमें Trp27-Lys547 होता है।[एक्सेसन | पी21589-1]

आणविक वजन

प्रोटीन का अनुमानित MW 58.8 kDa है। ग्लाइकोसिलेशन के कारण, प्रोटीन ट्रिस-बिस PAGE परिणाम के आधार पर 60-70 kDa तक चला जाता है।

अन्तर्जीवविष

एलएएल विधि द्वारा 1 ईयू प्रति μg से कम।

पवित्रता

ट्रिस-बिस पेज द्वारा निर्धारित > 95% और एचपीएलसी

गतिविधि

एलिसा डेटा: स्थिर मानव CD73, प्लेट पर 0.5μg/ml (100μl/well) पर उसका टैग। एंटी-CD73 एंटीबॉडी के लिए खुराक प्रतिक्रिया वक्र, ELISA द्वारा निर्धारित EC50 40.6ng/ml के साथ hFc टैग।

एनजाइम गतिविधि: मापा द्वारा इसका क्षमता को हाइड्रोलाइज़  5'-फॉस्फेट समूह से

सब्सट्रेट एडेनोसिन-5'-मोनोफॉस्फेट (एएमपी)

विशिष्ट गतिविधि >15000 pmol/min/μg है

सूत्रीकरण

20mM ट्रिस, 120mM NaCl (pH 7.5) में 0.22μm फ़िल्टर किए गए घोल से लाइओफ़िलाइज़ किया गया। आम तौर पर लाइओफ़िलाइज़ेशन से पहले प्रोटेक्टेंट के रूप में 8% ट्रेहलोस मिलाया जाता है।

पुनर्गठन

खोलने से पहले ट्यूबों को सेंट्रीफ्यूज करें। 100 μg/ml से अधिक सांद्रता में पुनर्गठित करने की अनुशंसा की जाती है। आसुत जल में लाइओफिलाइज़्ड प्रोटीन को घोलें।