Reagen transfeksi sel telah menjadi reagen rutin untuk mempelajari dan mengendalikan fungsi gen dalam sel eukariotik. Reagen transfeksi banyak digunakan dalam penelitian fungsi gen, regulasi ekspresi gen, dan analisis mutasi, serta terapi gen, terapi sel, produksi protein, dan produksi vaksin. Jadi, apa itu transfeksi? Dan bagaimana cara memilih jenis reagen transfeksi berdasarkan eksperimen Anda?

Apa saja jenis transfeksi?

Fitur reagen transfeksi dari Yeasen

Bagaimana memilih jenis reagen transfeksi berdasarkan percobaan Anda?

Kasus aplikasi

Referensi untuk kondisi transfeksi

Tanya Jawab Umum

Salam Membaca

Apa saja jenis transfeksi?

Berdasarkan apakah asam nukleat terintegrasi ke dalam kromosom sel inang setelah transfeksi, ia dibagi menjadi "transien" (transfeksi sementara) dan "stabil" (transfeksi stabil). Efisiensi transfeksi, sitotoksisitas, efek pada fisiologi normal, dan tingkat ekspresi gen dari berbagai metode transfeksi berbeda-beda. Prinsip, aplikasi, dan karakteristiknya dibandingkan dalam tabel berikut:

Tabel 1 Perbandingan metode transfeksi yang berbeda

Fitur-fitur dari reagen transfeksi dari Yeasen

Untuk reagen transfeksi DNA dan reagen transfeksi RNA, Yeasen Bioteknologi memiliki tim R&D dan produksi yang kuat, terus mengoptimalkan formula, meningkatkan proses produksi, dan telah meluncurkan berbagai produk berdasarkan liposom kationik dan polimer kationik. Lembaga penelitian ilmiah dan perusahaan menyediakan berbagai macam produk, dan lini produk mencakup semua bidang yang terlibat dalam reagen transfeksi.

• Efisiensi tinggi: cocok untuk transfeksi sementara atau transfeksi stabil garis sel.
• Toksisitas rendah: Sel yang ditransfeksi tetap dapat bertahan hidup.
• Kemampuan beradaptasi yang luas: cakupan komprehensif terhadap sel-sel umum dan sel-sel primer yang sulit ditransfeksi.
• Mudah dioperasikan: cocok untuk media dengan adanya serum, tanpa mengubah media sebelum dan sesudah transfeksi.
• Hemat biaya: ekonomis dan praktis, efisiensi transfeksi tinggi, harga murah.

Bagaimana memilih jenis reagen transfeksi berdasarkan percobaan Anda?

Pemilihan reagen transfeksi perlu dipilih sesuai dengan tujuan percobaan dan isi percobaan yang berbeda, seperti zat yang ditransfeksi, sel spesifik, kenyamanan operasi dan faktor-faktor lainnya.

Kasus aplikasi

Reagen Transfeksi Liposomal Hieff Trans™

Trans Hieff™ tersedia dalam bentuk cairan steril. Umumnya, untuk transfeksi pelat 24-sumur, sekitar 1,5 μL setiap kali, 1 mL Hieff Trans™ dapat melakukan sekitar 660 transfeksi; untuk pelat 6 sumur, sekitar 6 μL setiap kali, 1 mL Hieff Trans™ dapat melakukan sekitar 660 transfeksi. 160 transfeksi;

Untuk detail lebih lanjut, silakan lihat Keyakinan dalam transfeksi dengan Reagen Lipofectamine Hieff Trans™

Polietilena Linier (PEI) MW40000 (lisis cepat)

PEI 40000 adalah polimer kationik bermuatan tinggi dengan berat molekul 40.000 yang mengikat molekul asam nukleat bermuatan negatif dengan sangat mudah, membentuk kompleks dan memungkinkan kompleks tersebut memasuki sel. PEI 40000 adalah reagen transfeksi sementara dengan sitotoksisitas rendah, efisiensi transfeksi tinggi, dan efisiensi ekspresi gen tinggi dalam sel seperti HEK293 dan CHO. Reagen transfeksi PEI linier telah divalidasi untuk berbagai macam lini sel termasuk sel HEK-293, HEK293T, CHO-K1, COS-1, COS-7, NIH/3T3, Sf9, HepG2, dan Hela. Efisiensi transfeksi setinggi 80%~90%.

Untuk detail lebih lanjut, silakan lihat Favorit baru untuk transfeksi —— Linear PEI MW 40000, reagen transfeksi yang lebih efisien

Hieff Trans™ dalam tabung reaksi Reagen Transfeksi siRNA/miRNA

Produk ini dapat mencapai efisiensi ekspresi siRNA 1 nM lebih dari 90% dalam berbagai lini sel, sehingga terhindar dari efek yang tidak sesuai target. Cocok untuk transfeksi berbagai sel, termasuk Hela, MCF-7, HepG2, CHO, dan sel-sel yang melekat lainnya; dan lini sel suspensi yang sulit ditransfeksi, seperti sel K562 atau THP-1, dapat mencapai efisiensi pembungkaman 80%; Termasuk beberapa sel primer, fibroblas manusia primer, dan hepatosit manusia primer, dll., efisiensi pembungkaman 80% dapat dicapai.

Referensi untuk kondisi transfeksi

Selain petunjuk untuk setiap produk, pelanggan beroperasi sesuai dengan konten eksperimen spesifik mereka, dan akan ada perbedaan yang berbeda dalam jumlah penggunaan. Menurut kondisi transfeksi sel in vitro yang dilaporkan oleh pelanggan setelah menggunakan produk, kondisi tersebut telah disortir untuk referensi Anda.

Tanya Jawab Umum

1 Reagen Transfeksi Liposomal Hieff Trans™

1.1 T: Dapatkah serum hadir saat menyiapkan kompleks reagen transfeksi asam nukleat?

A: Keberadaan serum akan memengaruhi pembentukan liposom. Disarankan untuk menggunakan medium bebas serum (umumnya medium MEM) saat menyiapkan kompleks reagen transfeksi asam nukleat.

1.2 T: Apa saja yang harus saya perhatikan saat menggunakan Hieff Trans™ Liposomal Nucleic Acid Transfection Reagent?

A:

1) Ketika sel ditransfeksi, kepadatan sel sebaiknya 80%-95%, dan kepadatan pelapisan spesifik ditentukan sesuai dengan situasi sel;

2) Penggunaan DNA dengan kemurnian tinggi membantu memperoleh efisiensi transfeksi yang lebih tinggi;

3) DNA dan reagen transfeksi harus diencerkan dengan medium bebas serum saat menyiapkan kompleks transfeksi;

4) Antibiotik tidak dapat ditambahkan ke media selama transfeksi;

5) Reagen harus disimpan pada suhu 2-8°C, dan harus diperhatikan untuk menghindari membuka tutupnya berulang kali dalam waktu lama;

6) Konsentrasi DNA dan jumlah reagen liposom kationik harus dioptimalkan untuk penggunaan pertama guna memperoleh efisiensi transfeksi yang maksimal. Rasio DNA terhadap reagen transfeksi umumnya direkomendasikan sebesar 1:2-1:3.

1.3 T: Apakah perlu dihentikan setelah transfeksi?

A: Tidak perlu. Kompleks liposom stabil selama 6 jam. Jika media sel tidak diganti sebelum transfeksi, untuk memastikan nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan sel normal, perlu mengganti media baru setelah 4-6 jam. Namun, jika media telah diganti sebelum transfeksi, tidak perlu mengganti media setelah transfeksi liposom.

1.4 T: Dapatkah ko-transfeksi DNA dan siRNA dilakukan? Bagaimana efeknya?

A: Ya, ketika DNA dan siRNA ditransfeksi bersama, efisiensi transfeksi siRNA akan sedikit lebih buruk.

1.5 T: Dapatkah reagen transfeksi digunakan untuk transfeksi kemasan lentivirus?

A: Pengemasan lentivirus dimungkinkan.

1.6 T: Dapatkah sel suspensi ditransfeksi dengan Hieff Trans™ Liposomal Nucleic Acid Transfection Reagent?

A: Reagen Transfeksi Asam Nukleat Liposom Hieff Trans™ dapat digunakan untuk transfeksi sel suspensi, lihat Protokol untuk detailnya. Selain itu, kami juga memperkenalkan reagen transfeksi khusus untuk sel suspensi (Nomor Cat.40805, Reagen Transfeksi Liposomal Bebas Sel Suspensi Hieff Trans™)

2. Hieff Trans™ dalam tabung reaksi Reagen Transfeksi siRNA/miRNA

2.1 T: Apakah reagen transfeksi perlu diganti setelah transfeksi?

A: Masalah ini dapat dibagi menjadi dua kasus: 1. Jika tidak ada penggantian media sebelum transfeksi, media harus diganti sekitar 6 jam setelah transfeksi untuk memastikan nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan sel; 2. Jika ada penggantian media sebelum transfeksi, dapatkah dioperasikan sesuai dengan operasi normal sel yang dikultur? ? Setelah operasi penggantian cairan?

2.2 T: Dapatkah reagen transfeksi dibekukan?

A: Tidak dapat dibekukan, karena reagen transfeksi adalah reagen transfeksi kationik PEI. Pembekuan pada suhu rendah akan merusak aktivitas reagen transfeksi PEI. Oleh karena itu, sebaiknya disimpan pada suhu 2-8 °C untuk mempertahankan kemanjuran transfeksi terbaik.

Informasi produk

Beberapa artikel yang diterbitkan menggunakan produk kami

[1] Liu R, Yang J, dkk. Kontrol optogenetik fungsi dan metabolisme RNA menggunakan protein pengikat RNA yang dapat dialihkan cahaya. Nat Biotechnol. 3 Januari 2022. (IF:55)

[2] Luo J, Yang Q, dkk. TFPI adalah reseptor kripta kolon untuk TcdB dari klade 2 C. difficile yang sangat virulen. Sel. 17 Maret 2022.（IF:41.582）

[3] Zhou J, Chen P, dkk. Varian Cas12a dirancang untuk efek off-target yang lebih rendah di seluruh genom melalui pengenalan PAM yang ketat. Mol Ther. 5 Januari 2022. (IF:11.454)

[4] Chen S, Cao X, dkk. circVAMP3 Mendorong Pemisahan Fase CAPRIN1 dan Menghambat Karsinoma Hepatoseluler dengan Menekan Translasi c-Myc. Adv Sci (Weinh). 24 Januari 2022.(IF:16.808)

[5] Gu C, Wang Y, dkk. AHSA1 adalah target terapi yang menjanjikan untuk proliferasi sel dan resistensi inhibitor proteasom pada mieloma multipel. J Exp Clin Cancer Res. 6 Januari 2022. (IF:11.161)

[6] Zhang Y, Yu X, dkk. Faktor penyambungan arginin/serin-kaya 8 meningkatkan keganasan mieloma multipel dan lesi tulang melalui penyambungan alternatif CACYBP dan komunikasi seluler berbasis eksosom. Clin Transl Med. 2022 Februari (IF:11.492)

[7] Qin J, Cai Y, dkk. Mekanisme molekuler agonisme dan agonisme terbalik pada reseptor ghrelin. Nat Commun. 13 Januari 2022.(IF:14.9)

[8] Tang X, Deng Z, dkk.Protein baru yang dikodekan oleh circHNRNPU meningkatkan perkembangan mieloma multipel dengan mengatur lingkungan mikro sumsum tulang dan penyambungan alternatif. J Exp Clin Cancer Res. 8 Maret 2022.(IF:11.161)

[9] Xie F, Su P, dkk. Rekayasa Vesikel Ekstraseluler yang Diperkaya dengan ACE2 Palmitoilasi sebagai Terapi COVID-19. Adv Mater. 19 Oktober 2021. (IF:30.849)

[10] Liang Y, Lu Q, dkk. Reaktivasi penekan tumor pada kanker payudara dengan peralihan penguat melalui jaringan NamiRNA. Nucleic Acids Res. 7 September 2021. (IF:16.9)

[11] Fan Y, Wang J, dkk. CircNR3C2 meningkatkan efek penekan tumor yang dimediasi HRD1 melalui penyerapan miR-513a-3p pada kanker payudara triple-negatif. Mol Cancer. 2 Februari 2021.(IF:27.403)

[12] Dai L, Dai Y, dkk. Wawasan struktural tentang perekrutan kompleks BRCA1-BARD1 ke kromatin yang rusak. Mol Cell. 1 Juli 2021.(IF:17.97)

[13] Zhang K, Wang A, dkk. Sumbu UBQLN2-HSP70 mengurangi agregat poli-Gly-Ala dan mengurangi cacat perilaku pada model hewan C9ORF72. Neuron. 16 Juni 2021.(IF:17.17)

[14] Li T, Chen X, dkk. Perangkat optogenetik berbasis BRET sintetis untuk ekspresi transgen berdenyut yang memungkinkan homeostasis glukosa pada tikus. Nat Commun. 27 Januari 2021.(IF:14.92)

[15] Yan F, Huang C, dkk. ADP-Ribosilasi Threonine dari Ubiquitin oleh Keluarga Efektor Bakteri Memblokir Ubiquitinasi Inang. Mol Cell. 21 Mei 2020. (IF:17.97)

[16] Sun X, Peng X, dkk. ADNP meningkatkan diferensiasi saraf dengan memodulasi sinyal Wnt/β-catenin. Nat Commun. 2020 Jun 12.(IF:14.911)

[17] Yang X, Wang H, dkk. Pengkabelan ulang sinyal ERBB3 dan ERK menghasilkan resistensi terhadap penghambatan FGFR1 pada kanker gastrointestinal yang mengandung mutasi ERBB3-E928G. Protein Cell. Desember 2020 (IF:14.872)

[18] Zou Y, Wang A, dkk. Analisis lanskap dan dinamika redoks dalam sel hidup dan in vivo menggunakan sensor fluoresensi berkode genetik. Nat Protoc. 2018 Okt. (IF:13.490)

[19] Hao H, Hu S, dkk. Hilangnya CXCR7 Endotel Mengganggu Homeostasis Vaskular dan Remodelasi Jantung Setelah Infark Miokard: Implikasi untuk Penemuan Obat Kardiovaskular. Sirkulasi. 28 Maret 2017. (IF:29.69)

Salam Membaca

Reagen Transfeksi – Hieff Trans™ dan PEI

Linear PEI MW 40000, reagen transfeksi yang lebih efisien