Fico. 1 LUI colorazione risultati Di Servizio Civile acuto colite sezione

2. Modellazione del pesce zebra

1) Pesce zebra gli embrioni erano coltivato in E3 mezzo embrionale contenente blu metile A 28,5 ℃ fino a 1 dpf;

2) 0,5% Servizio Civile bere acqua era configurato con E3 medio E Poi filtrato attraverso UN 0,22 micron membrana filtrante;

3) Pesce zebra erano trattato con 0,5% Servizio Civile da 3 dpi A 6 filtri antiparticolato.

4) Sperimentale risultati: Tutto 0,5% di DSS trattamenti farmacologici ha portato a oscuramento di fegato di pesce zebra colore e stress infiammatorio.

Figura 2 Il DSS provoca una risposta infiammatoria nel fegato del pesce zebra

3.Stampaggio del maiale

1) Quattro A cinque giorno vecchio Lo Yorkshire maialini, sperimentale gruppo: perfuso con DSS, controllare gruppo: perfuso con salino

2) Giornaliero assunzione Di 1,25 g Peso specifico/kg per maialino, infuso per 5 giorni

3) Sperimentale risultati: Dopo instillazione Di DSS, IL plasma D-mannitolo assorbimento valutare Di IL sperimentale gruppo era significativamente più alto di Quello Di IL controllare gruppo, indicando Quello IL maialini ha mostrato sintomi Di enterite visibile A IL nudo occhio.

Figura 3 Il DSS ha indotto una concentrazione più elevata di D-mannitolo nei suinetti rispetto ai controlli

4.Drosofila modellazione

1) Le femmine di Drosophila di età compresa tra 5 e 10 giorni sono state poste in una fiala vuota contenente fiale da 2,5 × 2,5 × 1 cm in coltura con carta cromatografica da 3,75 cm (Fisher) e terreno di coltura inumidito con una soluzione di saccarosio al 5%;

2) I terreni di coltura contenenti diversi componenti sono stati preparati separatamente con una soluzione di saccarosio al 5% e le categorie includevano il 3% di DSS ciascuno e 25 μg/ml di bleomicina;

3) Le Drosophila sono state poste in fiasche contenenti carta cromatografica e incubate a 29°C per tre giorni, durante i quali le Drosophila sopravvissute sono state trasferite quotidianamente in fiasche vuote contenenti terreno fresco;

4) Risultati sperimentali: il DSS ha una funzione letale e induce la proliferazione delle cellule precursori delle ISC.

Figura 4 Il DSS induce la proliferazione delle cellule precursori dell'ISC in Drosophila

IV. Come A valutare IL successo Di modellazione?

1.MalattiaAttività Indice (DAI punto)

Tre aspetti erano valutato E segnato: peso, fecale coerenza, E fecale occulto sangue, E IL DAI punto era IL somma Di i tre indicatori.

Tabella 2 Regole di punteggio DAI

punteggio (dello studente) lavoro)	Percentuale Di peso perdita	fecale viscosità	fecale sangue occulto
0	0	normalità	negativi
1	1-5%	morbido sgabello	azzurro pallido
2	5-10%	simile al muco sgabello	blu (colore)
3	10-20%	sciolto, feci liquide	Blu profondo
4	>20%	/	Feci sanguinolente a occhio nudo

2. Punteggio Di istologico cambiamenti

Istologico cambiamenti erano segnato COME IL somma Di IL Sopra, E linfa nodo formazione era non segnato In IL acuto colite modello. Il metodo standard per l'analisi istologica era la colorazione HE (Cat. NO: 60524ES60).

Tabella 3 Punteggi delle alterazioni istologiche

punto (Di studioso non è lavoro )	Ulcere (numero)	Epiteliale cambiamenti cellulari	infiltrato infiammatorio	Linfonodi (n.)
0	0	Normale	Nessuno	Nessuno
1	1	Assenza Di a coppa cellule	Pericrittale infiltrazione	1
2	2	Grande cancellazione di cellule concave	Infiltrazione Di IL muscolare strato Di IL mucosa	2
3	3	cripta fossa	Infiltrazione generalizzata del muscolare strato Di IL mucosa con ispessimento della mucosa	3
4	>3	Grande assenza o polipoide rigenerazione della cripta fossa	sottomucoso infiltrazione	>3

3. Due punti lunghezza

Colonico lunghezza accorciamento era rilevabile SU giorno 8 In IL acuto colite modello; Esso era Di più pronunciato In IL cronico colite modello.

4.Riepilogo

Servizio Civile Università degli Studi di Bologna animale modello costruzione Dovrebbe Essere preceduto di pre-test A Tatto IL modellazione condizioni, E Esso È raccomandato che i pre-test siano condotti con 8-10 campioni in ogni gruppo e che venga istituito un gruppo di controllo. Di solito, l'aspetto di perdita di peso, feci molli, diarrea, feci sanguinolente o sangue occulto nelle feci, ulcerazione possono essere considerati efficaci dal farmaco DSS e la modellazione ha successo.

VI.Yeasen Servizio Civile Modellazione Caso Studio

Sììì Servizio Civile (Gatto. NO: 60316ES, MW:36000~50000) È ampiamente usato In IL costruzione Di Università degli Studi di Bologna modelli. Sììì

Servizio Civile può costruire con successo modelli UC con risultati paragonabili a quelli dei marchi importati.

Obiettivo: A confrontare IL estensione Di modifica In corpo peso Di topi ricercato di Indotto da DSS acuto colite da diverso produttori.

Topo tipo: topi BALB/c;

Modellazione protocollo: 2% Servizio Civile concentrazione, continuo flusso libero bere per 1 settimana.

Conclusione: IL tendenza Di corpo peso perdita indotto di Sììì Servizio Civile In topi era coerente con Quello Di IL importato marca.

E Noi trovato Quello IL acuto colite modellazione tempo È principalmente concentrato In Di 7 giorni, IL effetto È molto significativo. IL Nella tabella seguente sono riportati i dati di feedback di alcuni clienti.

Tabella 4 Modellazione di diversi tipi di enterocolite con DSS

Muffa	Modello	Stampaggio Soluzioni	Stampaggio risultati	Testimonianze
colite acuta	BALB/c topi, femmina, 6-8 settimane, 25 grammi	3%-5% Servizio Civile per 7 giorni Di continuo a flusso libero consumo	Giorno 5 presentazione con abbreviato colon lunghezza, colorazione HE e marcato infiammazione	Velocità di modellazione elevata e breve tempo. Conforme al caratteristiche Di IL acuto colite modello
	C57BL/6 topi, maschio, 8 settimane, 20 G	3%-5% DSS tramite sondino, amministrazione continua	Giorno 5 presente, abbreviato colon lunghezza, perdita di peso, sangue nelle feci, diarrea	Alto modellazione valutare E corto tempo. coerente con acuto colite caratteristiche del modello
cronico colite	C57BL/6 topo, maschio, 8 settimane, 22 grammi	1-2% Servizio Civile tramite sondino, amministrazione continua	Giorno40 presente, abbreviato colon lunghezza, peso perdita, sangue In sgabello, diarrea	Alto modellazione valutare. Coerente, con cronico colite modello caratteristiche
Cancro al colon	C57BL/6 topo, maschio, 8 settimane, 21 grammi	1%-2% Servizio Civile liberamente disponibile per 5 giorni per 3 settimane	14 settimane Presente, abbreviato colon lunghezza, perdita di peso, colorazione HE, infiammazione evidente	Alto modellazione valutare. coerente con modello di cancro al colon caratteristiche

Caratteristiche del prodotto:

1. I sintomi sono altamente simile A quelli Di umano Università degli Studi di Bologna: Esso Potere Essere usato A studio IL meccanismo Di colite E farmacodinamico studi.
2. Alta formazione di muffa tariffa: gratuita bere Servizio Civile acquoso soluzione, semplice E facile,
3. puòcostruire varietà Di colite modelli: acuto colite, cronico colite, Potere Anche Essere combinato con AOM A costruire colite- modello di cancro associato (CAC).
4. È adatto per IL modellazione di molti tipi Di animali: topi, ratti, pesci zebra, maiali, frutta mosche e COSÌ
5. alta sicurezza:DSS Potere Essere degradato di IL naturale ecosistema, sicuro per IL ambiente; 6, elevata purezza: elevata purezza (98%), contenuto di zolfo 17-19%;

VII. Domande frequenti

Se acuto Servizio Civile colite modello O cronico Servizio Civile colite modello, IL gravità E successo Di enterite È imparentato A topo specie (diversi background genetici), concentrazione di DSS e ciclo di dosaggio.

Tabella 5 Domande frequenti per la modellazione della colite DSS

Possibili problemi	Possibili cause	Suggerito soluzioni
Alto letalità In topi	Servizio Civile concentrazione pure alto	Ridotto concentrazione Di Servizio Civile amministrazione
Topi con NO O Basso segni Di enterite	Servizio Civile concentrazione pure Basso	Elevato Servizio Civile dosaggio concentrazione; ridotto ciclo intervallo (10- 14 giorni)
In lo stesso gruppo di topi, il sintomi Di enterite vario notevolmente	Tappo intasato	Controllo topo che beve bottiglie ogni giorno

PARTE VIIIProdotto Ordinazione

Nome del prodotto	Numero di catalogo	Specificazione
ColitCare™ Destrano solfato sale sodico (DSS), grado colite PM: 36000~50000	60316ES25	25 grammi
ColitCare™ Destrano solfato sale sodico (DSS), grado colite PM: 36000~50000	60316ES60	100 grammi
ColitCare™ Destrano solfato sale sodico (DSS), grado colite PM: 36000~50000	60316ES76	500 grammi
ColitCare™ Destrano solfato sale sodico (DSS), grado colite PM: 36000~50000	60316ES80	1 chilogrammo
Kit di colorazione con ematossilina ed eosina Kit di colorazione con ematossilina eosina (H&E)	60524ES60	2 x 100 ml

Modellazione della pancreatite acuta negli animali

Caerulein È UN gastrico normativo molecola funzionalmente E composizionalmente simile A colecistochinina (CCK) Quello stimola secrezione gastrica, biliare e pancreatica. Rainfrogin può essere utilizzato per studiare le vie di segnalazione mediate da NF-κB sovraregolato proteine ​​come la molecola di adesione intercellulare (ICAM-1), fattori correlati all'infiammazione come la NADPH ossidasi e Janus chinasi. Ed è stato utilizzato con successo nella creazione di modelli di pancreatite acuta (AP) in ratti, topi, cani e siriano criceti.

Vantaggio dello stampaggio:

1. facile da usare
2. costo inferiore
3. prototipazione rapida
4. modalità multiple farmaco consegna

Meccanismi di modellazione:

1. Sovraregolazione di intercellulare adesione molecola (ICAM-1) espressione In pancreatico alveolare cellule di stimolante intracellular NF-KB. La superficie ICAM-1 a sua volta promuove l'adesione dei neutrofili alle cellule alveolari, migliorando così l'infiammazione pancreatica effetti;
2. Inducespancreatite di inducendo disregolazione Di digestivo enzima secrezione E citoplasmatico vacuolizzazione primo A morte delle cellule alveolari e dell'edema pancreatico;
3. Attivazione Di che promuove l'infiammazione fattori.

Imparentato Reagenti

Sììì fornisce decapeptide molecolare forma, purezza ≥97% (HPLC) pioggia frogin; alto efficienza di stampaggio, favorevole prezzo, fornitura spot.

Nome del prodotto	Numero di catalogo	Specificazione
Caerulein	60321ES03	1 mg
DMSO Dimetilsolfossido (grado di coltura cellulare)	60313ES60	100 ml.

Modellazione della malattia del diabete

La streptozocina (STZ) è un antibiotico antitumorale prodotto da un certo tipo di fungo Streptomyces, Aureobasidium pullulans, e può anche essere sintetizzato. Viene spesso utilizzato nel trattamento del cancro al pancreas. Allo stesso tempo, la STZ ha un effetto distruttivo selettivo sulle cellule β delle isole pancreatiche di certe specie di animali e può indurre il diabete in molti animali, generalmente utilizzando ratti e topi per creare modelli animali. È stato ampiamente studiato in anti-leucemia, metilazione del DNA e anti-nefrite.

1.1 Preparazione degli animali

Prova a usare animali maschi, le femmine contengono ormoni che influenzano l'efficienza della modellazione. Alcuni studi hanno dimostrato che le femmine hanno bassi tassi di modellazione e possono avere tassi di mortalità più elevati rispetto ai maschi, specialmente per il tipo I.

Il diabete di tipo I (diabete di tipo I) può essere generalmente selezionato in base al peso corporeo, si raccomanda 170-200 g per i ratti e 17-22 g per i topi, e il tasso di modellazione è relativamente ideale quando STZ viene iniettato a digiuno dopo 1~2 settimane di alimentazione adattativa.

Per il diabete di tipo II, i ratti (ad esempio SD/Wistar) vengono selezionati a 4-5 settimane di età, con un peso di 90-100 g, e alimentati con diete ricche di grassi (ricche di zuccheri) per 4-6 settimane per raggiungere un peso corporeo di circa 240-280 g. Per i topi (ad esempio topi C57/ICR/Kunming) vengono selezionati a 4-5 settimane di età, con un peso di 16-20 g, e alimentati con diete ricche di grassi (ricche di zuccheri) per 4-6 settimane per raggiungere un peso corporeo di circa 30-35 g. Per gli animali appena acquistati o quelli che cambiano ambiente di alimentazione, devono essere alimentati con diete regolari per una settimana prima di selezionare l'età/il peso appropriati per passare a un mangime ricco di grassi (ricche di zuccheri). Per i topi (ad esempio topi C57/ICR/Kunming), selezionare di 4-5 settimane, con un peso di 16-20 g, e alimentati con diete ricche di grassi (zuccheri) per 4-6 settimane per raggiungere un peso corporeo di circa 30-35 g. Per gli animali appena acquistati o un cambio di ambiente di alimentazione, è necessario alimentare in modo adattivo gli animali con diete normali per una settimana, quindi selezionare gli animali appropriati per età settimanale/peso corporeo e passare a diete ricche di grassi e zuccheri. In termini di successo della modellazione, SD è raccomandato per i ratti e C57 per i topi.

1.2 Alimentazione prima dello stampaggio

Alimentazione prima della modellazione: il modello del diabete di tipo I è relativamente veloce, solitamente i ratti possono iniziare la modellazione dopo 2 settimane di alimentazione adattativa con mangime normale; modello del diabete di tipo II: induzione di una dieta ricca di grassi più una piccola dose di STZ. Prima della modellazione è stato somministrato mangime ricco di grassi (ricco di zuccheri), il che ha indotto resistenza all'insulina.

1.3 Preparazione Di reagenti

①Ad alto contenuto di grassi (ad alto contenuto di zucchero) alimenta

Ad alto contenuto di grassi (ad alto contenuto di zucchero) foraggio ingredienti: contiene 10% saccarosio, 10% lardo, 5% colesterolo

Ad alto contenuto di grassi E ad alto contenuto di zucchero alimenta erano fatto di combinando di base ratto foraggio con saccarosio, condensato lardo E uovo tuorlo In IL seguente rapporto di massa: 18% strutto, 20% saccarosio, 3% tuorlo d'uovo e 59% mangime base.

② Preparazione Di STZ solvente - sodio citrato respingente

Preparazione Di Liquido UN E Liquido B: Pesare 2,1 g Di citrico acido (FW:210.14) E aggiungere Esso A 100 ml Di doppiamente distillato acqua fare Liquido A. Pesa 2,94 g di citrato di sodio (FW:294.10) e aggiungerlo a 100 ml di acqua bidistillata per preparare il Liquid B.

Preparazione Di sodio citrato respingente: Mescolare UN E B liquido In UN certo proporzione (1:1.32 O 1:1), pH metro A determinare IL Valore del pH, regolare il valore del pH a 4,2-4,5, ovvero il tampone citrato di sodio richiesto.

1.4 Preparazione Prima iniezione

Prima preparare STZ iniezione, STZ liofilizzato polvere era collocato In UN Asciutto sterilizzato fiala, avvolto esternamente con alluminio sventare o carta stagnola, pre-raffreddato In un ghiaccio bagno con sodio tampone citrato, e portato al animale camera per il backup.

Nota: Dopo rimozione IL STZ liofilizzato polvere da la temperatura di -20°C frigorifero, Partire Esso secco e protetto da luce a camera temperatura per circa 10 minuti per consentire farlo scongelare completamente (molto importante).

1.5 Preparazione Di soluzione iniettabile

Ratti erano pesato E sangue glucosio concentrazioni erano misurato Dopo durante la notte digiuno (NO acqua). Ratti erano raggruppato per preparare l'iniezione di STZ in base al numero di animali e alla dose da iniettare. Sciogliere STZ all'1% concentrazione (p/V), filtrare e sterilizzare, tenendo presente che la STZ è completamente disciolta.

Attenzione:

①STZ È instabile E facile A inattivare, IL rimanente reagente Dopo rapido pesatura Ancora richiede essiccazione E leggero protezione, E si consiglia di avvolgerlo con carta stagnola (o alluminio) asciutta.

②Se Voi Sono non abile In iniezione, Fare non sciogliere IL STZ A uno tempo, E Esso È raccomandato Quello Voi sciogliere IL STZ In gruppi, ad esempio 10 o 15 ratti/gruppo, a seconda del tuo livello di abilità.

③Il STZ Potere anche essere pesato in anticipo E distribuito in IL importo richiesto per raggruppamento di animali.

1.6 Iniezione

Iniettare per via intraperitoneale o nella vena caudale in base al peso corporeo a digiuno dell'animale.Se l'operazione di iniezione tecnica È non abile, due gruppi Dovrebbe Essere iniettato in alternativa, E IL iniezione Dovrebbe Essere completato entro 30 minuti. Nota: la maggior parte delle iniezioni richiede un'iniezione rapida.

Attenzione:

Tipo Io modello diabete: dose ratto 70-65mg/kg

Tipo Io sono diabetico modello: Ratti nutrito con alto zucchero E alto grasso per 1-2 mesi erano trattato con STZ A UN dose di 25-40 mg/kg.

1.7 Dopo iniezione

Dopo l'iniezione di STZ, agli animali deve essere data acqua e cibo a sufficienza (le caratteristiche di vita di base dei diabetici ratti), E IL biancheria da letto esigenze A Essere cambiato quotidiano A Mantenere IL gabbia Asciutto. Quando alimentazione, Prendere cura A Evitare forte luce del sole. Sterilizzare il più spesso possibile.

Nota: Dopo STZ modellazione, fluttuazioni In apparente sangue glucosio livelli spettacolo 3 temporale fasi, transitorio iperglicemia (1- 2h), ipoglicemia transitoria (6-10h) e iperglicemia persistente (>72h). L'insulina e il glucosio devono essere opportunamente integrato.

2.Indicatori per valutazione IL modellazione effetto Di Indotto da STZ diabete modellazione

IL seguente indicatori erano contato in confronto con IL controllare gruppo:

1. Indicatori generali:il fenomeno Di eccessivo bere, mangiare E urinare, E peso perdita;
2. Altri indicatori:digiuno sangue glucosio, digiuno siero insulina livello, siero insulina livello, insulina sensibilità, glucosio tolleranza e così via;
3. Indicatori biochimici del siero: Ciao, TG, colesterolo HDL, colesterolo LDL, CR, PANINO, Alt, ecc.
4. Vetrini patologici: istopatologici diapositive Di IL pancreas

3.Spiegazione Di IL motivi per IL fallimento Di IL Indotto da STZ diabete modello

1. 1. la qualità di STZ è il chiave, la purezza di STZ per la modellazione dovrebbe non essere meno del 98% (prova HPLC).
2. 2. Fallimento STZ: deve essere conservato asciutto, evitare l'umidità. Evitare il posizionamento prolungato della polvere a temperatura ambiente. STZ disciolto è molto instabile, con UN metà vita Di 15 minuti A neutro  Paga Attenzione A sciogliere STZ con acido pH, preferibilmente In UN ghiaccio bagno.
3. Che sia o meno il l'iniezione intraperitoneale è iniettato in l'intestino e altri organi.

Se IL modello È non su A standard, Esso È raccomandato Quello, Se IL modello È non su A standard, Esso Dovrebbe Essere reiniettato per un altro 3 giorni.

4. Spiegazione Di IL cause Di Indotto da STZ alto mortalità In topi/ratti

4.1.IL del topo peso È pure Basso;

4.2. Abbastanza bere l'acqua deve Essere garantito (insufficiente bere acqua Potere facilmente portare a topi morti).

4.3. Glicemia alta e bassa possono causare la morte dei ratti, evitare che i ratti morti possano essere iniettati con insulina o zucchero temporaneo integrazione, due modi: ① Comunemente alto sangue zucchero. Insulina integrazione metodo, supplemento Alcuni ad azione media insulina. Ad esempio, somministrare Novolin N o NPH (insulina neutra di zinco proteica di pesce), 2-3 unità ogni volta, dopo 3-5 giorni, il generale il tasso di mortalità dei ratti sarà basso; ②metodo di integrazione di zucchero, dopo il digiuno dei ratti, l'iniezione è stata in un ipoglicemico stato, lo stampaggio di 4 ore dopo l'iniezione intraperitoneale di glucosio al 20%, può essere evitato grazie all'iniezione di ipoglicemia morte dei ratti;

4.4. Impedire animali da uccidere ogni altro. Mancanza Di cibo E insufficiente acqua fornitura Volere lacrima ogni altro a parte E sgranocchiare SU dei loro simili, quindi cibo e acqua devono essere forniti in quantità sufficienti, preferibilmente in due modi.

4.5.Prevenire infezione. Diabetico topi urinare UN quantità, IL biancheria da letto È umido E esigenze A Essere cambiato frequentemente, COSÌ diabetico i topi sono più inclini alle infezioni rispetto ad altri ratti, in particolare alle infezioni del tratto urinario e alle infezioni addominali. Prima e dopo l'invasivo operazioni come l'iniezione intraperitoneale, l'iniezione sottocutanea e la raccolta del glucosio nel sangue, bisogna prestare attenzione a sterilizzazione. Per esempio, tetraciclina (O gentamicina oftalmico unguento) Potere Essere applicato localmente A trattare IL ferita A impedire infezione dopo ogni prelievo di glucosio nel sangue.

5. Fattori che colpisce diabete modellazione

I fattori che influenzano la modellazione della malattia del diabete includono la qualità dei reagenti di modellazione STZ, le condizioni degli animali e amministrazione metodo. Tra loro, IL principale proprietà Di IL reagenti Sono purezza, stabilità, solubilità caratteristiche, ecc. IL le condizioni dell'animale includono principalmente il background genetico, il sesso maschile e femminile, il sesso, il peso corporeo, l'ambiente di alimentazione, la dieta struttura, ecc. e la modalità di somministrazione include tempo di somministrazione, intervallo di somministrazione e via di somministrazione. Fattori differenziati comportano effetti di modellazione differenziati.

6. IL STZ modellazione metodologia idee ordinato fuori

Standardizzazione Di IL influenzare fattori È UN garanzia Di raggiungere IL modellazione scopo E modellazione della stabilità. Teoricamente, Tutto modellazione animale esperimenti richiedono una sperimentazione preliminare.

Nel caso del modello di diabete indotto da STZ, il dosaggio di STZ dovrebbe fare riferimento ai risultati dei pre-test e cercare di non essere ciecamente seguire il dosaggio in letteratura o altri per utilizzare direttamente, come il peso medio dei ratti e il digiuno (stato di basso glucosio) resistenza, la durata del digiuno, il momento delle iniezioni, nonché il precedente processo di alimentazione, il momento del glucosio misurazione, E COSÌ SU, Sono diverso, E Esso È IL maggior parte scientifico A determinare IL dosaggio misure In accordo con loro propri topi sperimentali attraverso i pre-test. Il modo più scientifico è determinare il dosaggio del farmaco tramite pre-test.

7.Alto Modellazione Successo Valutare STZ Utilizzo Linee guida

STZ conservazione, dissoluzione, distribuzione e altro precauzioni per utilizzo, Vedere IL ufficiale sito web del reagenti rilevanti.

8.Prodotti

Alto tasso di successo: purezza ≥98% (analisi HPLC determinazione); stabile qualità, conveniente, fornitura spot, post-vendita garanzia.

Nome del prodotto	Numero di catalogo	Specificazione
Streptozocina	60256ES60/76	100/500 mg
Streptozocina	60256ES80	1g
Acido citrico, monoidrato Acido citrico, monoidrato	60347ES25	25g
Acido citrico sale trisodico, diidrato	60348ES25	25g

(Per Di più informazioni SU IL utilizzo Di STZ modanatura, Per favore controllo IL speciale articolo SU sito web di Yeasen)

Prodotto Linea Pubblicato Articoli (parziale)

[1] Li, , Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. L'acido valerico derivato dai commensali intestinali protegge dai danni da radiazioni. Microbi intestinali,.2020 .1-18. IF=10.245

[2] Wang Y, Jia M, Yan X, et al. L'aumento della lipocalina associata alla gelatinasi dei neutrofili (NGAL) promuove il rimodellamento delle vie aeree nella malattia polmonare ostruttiva cronica [J]. Clinical Science, 2017, 131 (11): 1147-1159. IF = 6,124

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Modellazione dell'artrite reumatoide

L'artrite reumatoide (AR) è una malattia infiammatoria cronica delle articolazioni caratterizzata da sinovite persistente, infiammazione sistemica, accompagnata da erosione ossea e cartilaginea, che può portare ad anchilazione e deformità articolare.

L'adiuvante di Freund è stato inventato da Jules Freund negli anni '40 del XX secolo, ed è un'emulsione di antigeni che mescola una quantità uguale di soluzione acquosa di antigeni con un olio e poi aggiunge un emulsionante per creare acqua in olio, che è l'adiuvante più comunemente utilizzato negli esperimenti sugli animali. L'adiuvante di Freund è diviso in Adiuvante di Freund completo (CFA) contenente Mycobacterium tuberculosis e Adiuvante di Freund incompleto (IFA) senza Mycobacterium tuberculosis, che sono principalmente utilizzati per indurre il modello di artrite indotta da collagene CIA e il modello di artrite indotta da adiuvante AA nei topi.

1. Fasi di modellazione dell'artrite indotta dal collagene (CIA) (solo a scopo di riferimento)

1) Preparare i reagenti appropriati, prestando attenzione alla configurazione del gruppo sperimentale e del gruppo di controllo.

2) Il collagene bovino di tipo 2 (CII.) è stato sciolto in una soluzione di acido acetico glaciale a una concentrazione di 2 mg/mL a 4°C durante la notte.

3) L'adiuvante incompleto di Freund è stato integrato con Mycobacterium tuberculosis inattivato a una concentrazione di 2-5 mg/mL per preparare l'adiuvante completo di Freund. La concentrazione di Mycobacterium tuberculosis nell'adiuvante completo di Freund 60718ES fornito da Yisheng Biotech era inferiore a 10 mg/mL.

4) La soluzione di acido acetico di collagene bovino di tipo 2 (CII.) viene miscelata con una quantità uguale di adiuvante completo di Freund ed emulsionata.

5) Iniezione sottocutanea di 0,1-0,2 mL sul dorso di ciascun topo sperimentale.

6) Dopo 3 settimane, la stessa quantità di adiuvante Fund incomplete è stata miscelata con una soluzione di acido acetico di collagene bovino di tipo 2 (CII.) ed emulsionata, e ciascun topo è stato iniettato per via sottocutanea alla base della coda per un totale di 0,1-0,2 mL.

7) Esame patologico: i topi nel gruppo sperimentale e nel gruppo di controllo sono stati rimossi, il 4% di formaldeide è stato fissato per più di 48 ore, il 5% di nitrato decalcificato per 2 ore, infiltrato in xilene e incluso in paraffina. Sono state fatte sezioni, colorate con HE e osservate con microscopia ottica convenzionale.

2. Fasi di modellazione dell'artrite indotta da adiuvanti (AA) (solo a scopo di riferimento)

1) Preparare i reagenti appropriati, prestando attenzione alla configurazione del gruppo sperimentale e del gruppo di controllo.

2) Registrazione delle osservazioni: in genere, 7-12 giorni dopo la seconda immunizzazione, oltre l'80% dei topi presenta sintomi di artrite.In base al rossore, al gonfiore e all'attività delle parti articolari dei topi, i sintomi clinici sono stati classificati e le registrazioni delle osservazioni sono state esaminate prima dell'esperimento e rispettivamente il 3°, 5°, 7° e 12° giorno dopo l'esperimento; il riferimento alla classificazione dei gradi è il seguente:

Indice di grado	Sintomo
0	L'attività è normale, nessun segno di eritema e gonfiore
1	Attività normale, arrossamento della pelle, ma nessun gonfiore significativo
2	L'attività è leggermente compromessa e si verificano arrossamenti e gonfiori nelle zampe e nei piedi o nelle articolazioni del ginocchio.
3	L'attività è compromessa e le zampe, le dita dei piedi o le ginocchia sono leggermente deformate, rosse e gonfie
4	Movimenti compromessi, grave rossore e gonfiore delle dita dei piedi o delle ginocchia dei piedi, artigli, dita dei piedi o ginocchia e rigidità o deformità

3) Misurazione del topo: il volume delle articolazioni degli arti posteriori dei topi prima e dopo l'esperimento è stato misurato utilizzando un misuratore del volume delle zampe posteriori dei topi, mentre il volume delle articolazioni del ginocchio delle zampe posteriori di ciascun topo è stato misurato a circa 5 mm, ripetuto tre volte, è stato registrato il valore medio e il test è stato eseguito una volta ogni tre giorni.

4) Esame patologico: i topi nel gruppo sperimentale e nel gruppo di controllo sono stati rimossi, la formaldeide al 4% è stata fissata per più di 48 ore, il nitrato al 5% è stato decalcificato per 2 ore, è stato infiltrato xilene ed è stata inclusa paraffina. Sono state fatte sezioni, colorate con HE e osservate con microscopia ottica convenzionale.

3.Domande frequenti

Problemi che potrebbero sorgere	Risposta
Qual è la differenza tra l'adiuvante completo di Freund (CFA) 60718ES e l'adiuvante incompleto di Freund (IFA) 60719ES?	L'adiuvante completo di Freund (CFA) contiene bacilli di Mycobacterium tuberculosis inattivati ​​e uccisi dal calore che stimolano una forte risposta immunitaria; l'adiuvante incompleto di Freund (IFA) è privo di Mycobacterium tuberculosis e stimola una risposta immunitaria più debole.
Qual è la quantità specifica di BCG contenuta nell'adiuvante completo di Freund (CFA) 60718ES?	Il contenuto di BCG è inferiore a 10 mg/mL.
Quando si utilizza l'adiuvante completo di Freund (CFA) e l'adiuvante incompleto di Freund (IFA) nella modellazione animale dell'artrite reumatoide?	Poiché i ratti sono generalmente più sensibili dei topi, i topi vengono solitamente trattati con CFA; i ratti possono essere trattati anche con IFA, ma il CFA è più indicato.

Raccomandazioni di prodotti correlati

Classificare	Nome del prodotto	Numero di catalogo	Specificazione
Modello di artrite reumatoide	Adiuvante completo di Freund (CFA)	60718ES	10 ml/5x10 ml
	Adiuvante di Freund incompleto (IFA)	60719ES	10 ml/5x10 ml

Modellazione ipertensiva

L'ipertensione è caratterizzata da un aumento della pressione arteriosa sistemica (pressione sistolica e/o diastolica), che si manifesta nella pressione arteriosa sistemica (pressione arteriosa sistolica ≥ 140 mmHg e/o pressione diastolica ≥90 mmHg), che è la malattia cronica più comune e il fattore di rischio più importante per le malattie cardiovascolari e cerebrovascolari, ed è spesso accompagnata da sindromi cliniche con danni funzionali o organici a cuore, reni, cervello e altri organi. Lo studio della prevenzione e del trattamento dell'ipertensione è di grande importanza pratica e l'istituzione di un modello di ipertensione animale è una parte importante dello studio dell'ipertensione.

Modelli di ipertensione animale possono essere divisi in modelli geneticamente correlati e modelli non geneticamente correlati. I modelli geneticamente correlati includono modelli animali ereditari e geneticamente modificati, mentre i modelli non geneticamente correlati generalmente si riferiscono a modelli indotti da fattori ambientali, chirurgici e farmacologici. I soggetti di ricerca della modellazione generalmente includono maiali, pecore, conigli, cani, topi e ratti, ecc., ma la maggior parte degli esperimenti sono modellati su topi e ratti, e i modelli di ipertensione animale comunemente utilizzati sono il modello SHR di ratti ipertesi spontanei e il modello di ipertensione indotta da farmaci.

1. Modello di ipertensione ereditaria animale

1.1 Modello SHR di ratti spontaneamente ipertesi

I ratti ipertesi spontanei, noti anche come ratti SHR, hanno un'incidenza di ipertensione di quasi il 100% e sono i modelli animali più ampiamente utilizzati. La pressione sanguigna sistolica dei ratti normali è di 110-120 mmHg e la pressione sanguigna dei ratti SHR inizia ad aumentare dopo 4-6 settimane di età e la pressione sanguigna è alta fino a oltre 200 mmHg dopo la riproduzione.

Vantaggi: l'incidenza dell'ipertensione è elevata, il decorso della malattia è breve e si possono osservare alterazioni patologiche degli organi bersaglio durante l'esordio.

Svantaggi: il ciclo riproduttivo è lungo, le condizioni di alimentazione hanno determinati requisiti e il prezzo è leggermente più alto rispetto a quello dei ratti comuni.

1.2 Modello SHRsp di ratti con ipertensione spontanea inclini all'ictus

I ratti con ipertensione spontanea incline all'ictus, noti anche come ratti SHRsp, hanno un'incidenza di ipertensione di quasi il 100% e di ictus di quasi l'80%. La pressione sanguigna nei ratti SHRsp ha iniziato ad aumentare dopo 4-6 settimane di età e potrebbe raggiungere 200 mm Hg dopo 10-15 settimane di età.

Vantaggi: l'incidenza dell'ipertensione è prossima al 100% e quella dell'ictus è dell'80%, il che rappresenta un modello animale ideale per la ricerca sull'ictus.

Svantaggi: lungo ciclo di coltivazione, selezione genetica difficoltosa, facile mutazione, rottura.

2. Modello di ipertensione indotta da farmaci

2.1 Induzione dell'angiotensina II (AngII.)

2.1.1 Metodi sperimentali (solo a scopo di riferimento)

Ai topi maschi di età compresa tra 8 e 12 settimane è stata iniettata angiotensina II e soluzione salina normale tramite iniezione sottocutanea con pompa osmotica, e la dose di AngII è stata generalmente di 100 ng/(kg·min) per 2-4 settimane. Il tempo di somministrazione può essere abbreviato o esteso di conseguenza in base alla situazione effettiva.

2.1.2 Immagini sperimentali (estratti dalla letteratura)

Applicazione 1: Angiotensina II. Nei topi alimentati con una soluzione di NaCl per 28 giorni, il gruppo sperimentale ha registrato un aumento significativo della pressione sanguigna rispetto al gruppo di controllo.

Figura 5 Cambiamenti nella pressione sanguigna e nella frequenza cardiaca nei topi (A è la pressione sanguigna sistolica, B è la pressione sanguigna media, C è la pressione sanguigna diastolica, D è la frequenza cardiaca)

2.2 Induzione dell'acetato di desossicorticosterone (DOCA)

L'acetato di desossicorticosterone (DOCA) può inibire il sistema renina-angiotensina, con conseguente riduzione dell'attività della renina plasmatica e conseguente aumento della pressione sanguigna, generalmente impiantando una pompa a rilascio prolungato di DOCA sottocutanea o iniettando DOCA e aggiungendo una soluzione di NaCl per indurre la formazione di ipertensione.

È applicabile principalmente alla ricerca sul sistema renina-angiotensina (RAS) e sul metabolismo dell'acqua e del sodio nell'ipertensione; il modello può far aumentare la pressione sanguigna in modo stabile e il metodo è semplice.

2.2.1 Metodi sperimentali (solo a scopo di riferimento)

È stato resecato il rene sinistro di ratti maschi normali da 250-275 g e il mezzo di gomma composto da DOCA e gel di silice è stato posizionato sotto la pelle tra le scapole su entrambi i lati del ratto oppure, dopo la rimozione del rene sinistro, è stato iniettato DOCA per via sottocutanea a 50 mg/(kg·d) al giorno. Va notato che i ratti DOCA dovevano bere una soluzione di NaCl all'1% durante l'alimentazione e la pressione sanguigna dei ratti è stata misurata dopo 3-5 settimane dall'operazione.

2.2.2 Immagini sperimentali (estratti dalla letteratura)

Applicazione 1: Dopo la rimozione del rene unilaterale, è stato aggiunto DOCA e i risultati hanno mostrato che la pressione sanguigna dei topi nel gruppo di controllo era relativamente costante, mentre la pressione sanguigna dei topi nel gruppo sperimentale è aumentata in modo significativo.

Figura 6 Diagramma delle variazioni della pressione sanguigna nei topi

2.3 Modello animale di ipertensione indotta da N-nitro-L-arginina metil estere (L-NAME)

L-NAME è un inibitore competitivo della sintasi dell'ossido nitrico, una sostanza attiva che promuove la funzione endoteliale e diminuisce la pressione sanguigna quando l'ossido nitrico aumenta. L-NAME, un inibitore competitivo della sintasi dell'ossido nitrico, può indebolire l'effetto vasodilatatorio dell'ossido nitrico e portare all'insorgenza di ipertensione. Pertanto, è possibile stabilire un modello animale di ipertensione causata da carenza di NO a lungo termine e gli oggetti di ricerca sperimentale modello sono per lo più osservati nei ratti.

È adatto principalmente allo studio del sistema dell'ossido nitrico e del sistema cardiovascolare nell'ipertensione; il modello può far aumentare la pressione sanguigna in modo stabile e continuo, con un metodo semplice.

2.3.1 Metodi sperimentali (solo a scopo di riferimento)

Ai ratti maschi di età compresa tra 3 e 4 settimane è stata iniettata per via intraperitoneale (o somministrata) L-NAME a 20-50 mg/(kg·d) e somministrata una volta al giorno per 4 settimane, mentre al gruppo di controllo è stata iniettata per via intraperitoneale (o somministrata) solo acqua distillata e i cambiamenti nei ratti sono stati monitorati quotidianamente.

Dopo l'esperimento, sono stati misurati il ​​peso corporeo, la pressione sanguigna, la frequenza cardiaca, gli indici biochimici sierici e altri indici biochimici del gruppo sperimentale e del gruppo di controllo.

2.3.2 Tabelle e immagini sperimentali (estratti dalla letteratura)

Applicazione 1: Dopo l'arruolamento, la pressione sanguigna del gruppo modello è aumentata gradualmente con l'estensione del tempo di assunzione di L-NAME e ha raggiunto lo standard dell'ipertensione alla quarta settimana, che era significativamente più alto di quello del gruppo di controllo corrispondente.

Applicazione 2: Dopo 4 settimane di irrigazione nei ratti si è formata ipertensione, un valore significativamente più alto rispetto a quello riscontrato nei ratti del gruppo di controllo corrispondente; l'estratto acquoso di semi di cassia ha potuto ridurre la pressione e migliorare le lesioni renali.

2.4 Confronto dei modelli di ipertensione indotta da farmaci

Modello di ipertensione indotta da farmaci	Angiotensina II. (L'angoloⅡ)	Acetato di desossicorticosterone (DOCA）	N-Nitro-L-Arginina Metil Estere (L-NAME)
Descrizione del metodo	Iniezione sottocutanea con pompa osmotica, AngII.la dose è generalmente di 100 ng/(kg·min)	In primo luogo, è stato resecato il rene unilaterale e sono stati iniettati 50 mg/(kg·d) di DOCA per via sottocutanea e contemporaneamente è stata bevuta una soluzione di NaCl all'1%	L'iniezione intraperitoneale (o gavaggio) di 20-50 mg/(kg·d) di L-NAME, come bere una soluzione di NaCI all'1%, può accelerare la formazione di muffa
Ciclo di muffa	2-4 settimane	3-5 settimane	4-5 settimane
Scenari applicativi	Ricerca sui danni da stress ossidativo e RAS	Studi correlati al RAS e all'acqua sodica Ricerca correlata al metabolismo	Sistema NO, ricerca correlata al sistema cardiovascolare

Raccomandazioni sui prodotti correlati (Riepilogo)

Crilassare	Nome del prodotto	Numero di catalogo	Sspecificazione
Modello di ipertensione	L-NAME cloridrato (L-NAME HCl)	52302ES	100mg
	Angiotensina II umana	54041ES	10mg
	Acetato di desossicorticosterone	54344ES	50 mg/500 mg
Modello di artrite reumatoide	Adiuvante completo di Freund (CFA)	60718ES	10 ml/5x10 ml
	Adiuvante di Freund incompleto (IFA)	60719ES	10 ml/5x10 ml
Modello di colite	ColitCare™ Destrano solfato sale sodico (DSS), grado colite PM: 36000~50000	60316ES	25g/100g/500g/1kg
Modello animale di pancreatite acuta	Caerulein	60321ES	1mg
Modello di malattia diabetica	Streptozocina (STZ)	60256ES	100 mg/500 mg/1 g

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