La pancreatite acuta (AP) è una condizione addominale acuta comune nella pratica clinica, con eziologia complessa e un tasso di mortalità dal 5% al 10%. Il tasso di mortalità per AP grave può raggiungere il 20% al 30%. La patogenesi non è ancora del tutto compresa e non esistono metodi di trattamento specifici. I metodi attuali per creare modelli animali di AP vivi includono la legatura del dotto pancreatico, la chiusura dell'ansa duodenale, l'iniezione di puntura del dotto biliare pancreatico, l'iniezione pancreatico-biliare combinata con infusione endovenosa e l'iniezione intraperitoneale di caeruleina combinata con lipopolisaccaride.
Caerulein è una molecola regolatrice gastrica che è funzionalmente e compositivamente simile alla colecistochinina (CCK). Stimola la secrezione eccessiva di cellule acinose pancreatiche, causando un disturbo della separazione del tripsinogeno intracellulare e delle idrolasi lisosomiali. L'attivazione avviene in modo dipendente dalla catepsina B e l'attività degli enzimi pancreatici può ulteriormente portare all'attivazione del proenzima, causando una serie di attività proteasiche che portano a danni cellulari. La risposta infiammatoria causata dall'autodigestione del tessuto pancreatico recluta cellule infiammatorie e rilascia fattori infiammatori, che possono ulteriormente causare gravi risposte infiammatorie locali o persino sistemiche.
Figura 1. Struttura chimica della caeruleina (CAS N. 17650-98-5)
Questo modello è stato applicato con successo a ratti, topi, cani e criceti siriani ecc. ed è adatto allo studio dell'autofagia alterata, della segnalazione patologica del calcio e dello stress del reticolo endoplasmatico, in cui l'AP è caratterizzata da variazioni nella quantità di ceruleina, mediante la regolazione del numero di iniezioni, con conseguenti differenze nel grado di gravità.
Protocollo del modello AP indotto da Caerulein
Preparazione della soluzione di ceruleina
Sciogli 1 mg di caeruleina in 1 mL di soluzione salina. Sterilizzare con 0,22 Filtro a membrana da µm e conservare a -20°C. Scongelare prima dell'uso e diluire con soluzione salina fino a ottenere una soluzione di lavoro di 5 μg/mL o 10 μg/mL.
Preparazione degli animali
La caeruleina può indurre AP nella maggior parte degli animali ed è utilizzata principalmente nei roditori (come ratti e topi).
Somministrazione dei farmaci
L'AP indotto dalla caeruleina è per lo più di tipo edematoso, che è per lo più utilizzato nello studio dell'AP lieve (MAP) e della conversione di MAP in SAP. Per la ricerca SAP, la caeruleina è spesso combinata con altri composti per ottenere una maggiore gravità dell'AP, ad esempio, il lipopolisaccaride (LPS).
Gli animali erano a digiuno ma potevano bere liberamente 12 ore prima dell'intervento. Iniezione intraperitoneale con Caerulein (20-100 μg/kg, solitamente 50 μg/kg) ogni ora per 7 ore, seguita da un'iniezione di 10 mg/kg di LPS.
Valutazione del modello
1) Aumento delle attività dell'amilasi e della lipasi sieriche.
2) Elevata concentrazione di NO nel siero.
3) Patologia pancreatica: edema del tessuto pancreatico con vacuoli, infiltrazione di cellule infiammatorie, necrosi delle cellule acinose periduttali e focali.
4) Aumento dell'espressione di fattori infiammatori nel siero e nel tessuto pancreatico.
Vantaggi del modello
Il metodo è semplice, facile da copiare, buona ripetibilità e non invasivo.
UNcaso di applicazione(Cat#60321ES Caerulein)
Figura 2. Modello AP risultati correlati nei topi Balb/c (ID PMI: 35339899, SE: 5.(736)
I topi Balb/c sono stati iniettati per via intraperitoneale con 50 μg/kg di caeruleina (Yeasen, Cat#60321ES) sette volte a intervalli di 1 ora e LPS (10 mg/kg) è stato somministrato simultaneamente all'ultima dose per indurre SAP. Sono state valutate le immagini H&E pancreatiche e il punteggio istologico (b), così come i livelli sierici di amilasi (c), IL-6 (d) e ALT (e).
Figura 3. Risultati del modello AP correlazione nei topi Kunming (Numero PMI: 27579473, SE: 4.096)
I topi Kunming femmina sono stati iniettati per via intraperitoneale con 50 μg/kg di caeruleina (Yeasen, Cat#60321ES) quattro volte a intervalli di 1 ora per indurre AP. Sono stati valutati i livelli di amilasi, lipasi e TNFα nel siero (A), e le immagini H&E pancreatiche e il punteggio istologico (C).
Informazioni per l'ordinazione
| Nome del prodotto | Gatto# | Specificazione |
| 60321ES03 | 1mg | |
| LPS, da Escherichia coli O55:B5 | 60747ES08/10 | 5 mg/10 mg |
| LPS, da Escherichia coli O111:B4 | 60748ES08/10 | 5 mg/10 mg |