Istituzione del modello di colite ulcerosa del solfato di sodio di destrano (DSS)

2. Vantaggi del modello DSS UC

👍 1. I protocolli sono facili da implementare.

👍 2. Il modello DSS UC riproduce fedelmente i sintomi della CU umana, con elevata ripetibilità.

👍 3. Vari sintomi caratteristici possono essere indotti controllando la dose di DSS somministrata, il che era unico per il modello DSS UC.

👍 4. Il modello DSS UC può essere generato con una varietà di animali modello ampiamente utilizzati, come topi, ratti, pesci zebra, maiali, moscerini della frutta, ecc.

👍 5. Il modello di cancro associato alla colite (CAC) indotto da IBD può essere creato con l'uso combinato di azossimetano (AOM).

3. Esempio di costruzione del modello DSS UC

3.1 Modello di topo(Clicca per i dettagli)

1) Topi BALB/c, femmine, 6-8 settimane, 25 g;

2) Acqua potabile sterile con il 3% di DSS e filtro con filtro 0.Membrana da 22 μm;

3) Il DSS è stato somministrato per 7 giorni;

4) Infiammazione, come quella del colon edema e congestione sono stati osservati dopo la colorazione con HE.

Fig.2 Risultati della colorazione HE delle sezioni di colite acuta DSS ^[1]

3.2 Modello di pesce zebra(Clicca per i dettagli)

1) Gli embrioni di pesce zebra sono stati ottenuti dalla deposizione delle uova naturale e allevati fino a 1 giorno dopo la fecondazione (dpf) in un'incubatrice a 28,5℃ in acqua ricircolante (60 μg/mL di sali marini oceanici istantanei) e integrati con blu di metilene fino a 1 dpf;

2) Dopo 1 dpf, utilizzare il terreno di coltura embrionale E3 senza blu di metilene per coltivare fino a 3 dpf;

3) Preparare una soluzione di conservazione DSS al 10% con terreno E3;

4) Diluire il DSS con il terreno di coltura fino alla dose massima non letale (riferimento della concentrazione del DSS: 0,5%);

5) I pesci zebra sono stati trattati con DSS allo 0,5% da 3 a 6 giorni dopo la dose giornaliera e sono stati osservati gli indici.

Fig.3 DSS induce una risposta infiammatoria nel fegato di pesce zebra ^[2]

3.3 Modello di maiale(Clicca per i dettagli)

1) Maialini Yorkshire all'età di 4-5 giorni;

2) Dose DSS: 1,25 g/kg, assunzione orale per 5 giorni;

3) È stato osservato un aumento del tasso di assorbimento del D-mannitolo.

Fig.4 La concentrazione di D-mannitolo indotta da DSS nei suinetti era più alta rispetto a quella nel gruppo di controllo ^[3]

3.4 Modello di Drosophila(Clicca per i dettagli)

1) Drosophila, femmina, 5-10 giorni;

2) Alimentazione medio è stato preparato con una soluzione di saccarosio al 5% contenente il 3% di DSS e 25 μg/mL bleomicina;

3) La Drosophila è stata coltivata a 29°C per tre giorni con un cambio giornaliero del flacone di coltura;

4) Il DSS ha indotto la proliferazione delle cellule precursori delle ISC e ha avuto un effetto letale sulla drosophila.

Fig.5 DSS induce la proliferazione delle cellule precursori ISC in Drosophila ^[4].

3.5 Cancro associato alla colite(Clicca per i dettagli)

1)Topi BALB/c, maschi, età 7 settimane;

2)Il giorno 1, pesare e contrassegnare i topi. Iniettare nei topi per via intraperitoneale 10 mg/kg di soluzione AOM.

3) Riempire d'acqua la riserva d'acqua delle gabbie dei topi. Calcolare 7-10 ml di acqua al giorno per topo. Alimentazione per una settimana.

4) Sostituire l'acqua potabile con il 2,5% di DSS per una settimana;

5) Somministrare regolarmente acqua potabile per due settimane;

6) Ripetere i passaggi 3-4 per 3 volte.

Fig.6 Diagramma schematico del CAC indotto da AOM/DSS ^[5] .

4. Modellazione dei criteri di valutazione del successo

4.1 Indice di attività della malattia (punteggio DAI)

Il modello è stato valutato con molteplici parametri, tra cui peso corporeo, viscosità fecale e sangue occulto, attraverso i quali viene generato il DAI complessivo.

Tabella 2 Regole di punteggio DAI

4.2 Punteggio di cambiamento istologico

I punteggi sono stati assegnati per gli indicatori di cui sopra in base ai cambiamenti istologici escludendo la formazione dei linfonodi per il modello di colite acuta. Il reagente di colorazione HE utilizzato è Cat#60524ES60.

Tabella 3 Punteggio di cambiamento istologico

4.3 Colon lunghezza

La lunghezza ridotta del colon era un fenotipo evidente per il modello di colite cronica, mentre cambiamenti simili possono essere rilevati l'ottavo giorno per il modello di colite acuta.

4.4 Riepilogo

Si raccomandano esperimenti preliminari per l'utilizzo del modello animale DSS UC con controllo appropriato. 8-10 animali per gruppo sono requisiti minimi. DAI è il criterio per valutare i risultati di uno studio preliminare.

5. Link a questa risorsa

[1]Xiaona Gao, et al. Rivista di biochimica nutrizionale 83 (2020) 108438.
[2]Jing Ma, et al. Acquacoltura e pesca (2021) 548–557.
[3]Connie J. Kim, et al. Journal of Nutritional Biochemistry 21 (2010) 468–475.
[4]Fangfang Ren, et al.PNAS.2010.107 (49) Italiano:
[5]Jia-Rong Huang, et al.Frontiers in Pharmacology.2020.11:586885.

6. Caso di successo per la modellazione con Yeasen DSS

I modelli di colite acuta di successo vengono generati con Yeasen DSS (Cat#60316ES, MW: 36000~50000) in 7 giorni con fenotipo prominente come mostrato nella tabella seguente.

Tabella 4 Costruzione di diversi tipi di modelli di enterite con DSS

7. Domande frequenti

Indipendentemente dal modello di colite DSS acuta o cronica, la gravità e il successo dell'enterite sono correlati alla specie di topo (diversi background genetici), alla concentrazione di DSS e al ciclo di dosaggio.

Tabella 5 Problemi comuni della modellazione della colite DSS

8. Ordine del prodotto:

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Tabella 6 Ordine dei prodotti

Nome del prodotto	Cat N.	Misurare
Cura del colittoTM Sale di sodio solfato di destrano (DSS), grado di colite PM: 36000~50000	60316ES25	25g
	60316ES60	100 grammi
	60316ES76	500 grammi
	60316ES80	1 chilogrammo

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