I coniugati anticorpo-farmaco (ADC) sono immunoconiugati composti da un anticorpo monoclonale legato a un farmaco citotossico (noto come payload) tramite un linker chimico. I componenti che costituiscono un ADC sono un mAb specifico dell'antigene tumorale, un linker chimico stabile scindibile o non scindibile e un potente payload citotossico (figura 1).
Figura 1: Struttura di un coniugato farmaco-anticorpo e proprietà dell'anticorpo (e dell'antigene bersaglio), del linker e dei componenti del carico citotossico[1]
Caratteristiche del carico utile
Il carico utile è legato covalentemente all'anticorpo tramite il linker e il farmaco ADC svolge un ruolo importante nell'attività citotossica all'interno delle cellule, poiché il suo meccanismo d'azione determinerà la potenza dell'ADC risultante come composto antitumorale e le sue potenziali indicazioni. Un carico utile ideale dovrebbe avere le seguenti caratteristiche: elevata citotossicità; bassa immunogenicità; elevata stabilità; gruppi funzionali modificabili senza influenzare significativamente la sua efficacia; effetto di uccisione degli astanti; solubilità appropriata; e il bersaglio dovrebbe essere intracellulare, poiché la maggior parte degli ADC deve entrare nelle cellule tumorali per rilasciare il proprio carico utile.
Classificazione del carico utile
I carichi utili possono essere suddivisi in tipi citotossici e non citotossici, con la stragrande maggioranza degli ADC che utilizzano carichi utili citotossici. Ci sono due principali rappresentanti dei carichi utili citotossici: inibitori dei microtubuli e inibitori del DNA, con gli inibitori del DNA ulteriormente suddivisi in agenti di danno al DNA e inibitori della topoisomerasi. Gli inibitori dei microtubuli possono interrompere la mitosi e le cellule tumorali si dividono più velocemente della maggior parte delle cellule normali, rendendo gli inibitori dei microtubuli più efficaci nell'uccidere le cellule cancerose. Gli inibitori dei microtubuli possono essere suddivisi in due tipi: uno che promuove la polimerizzazione dei microtubuli, causando una crescita incontrollata dei microtubuli, come il derivato della dolastatina MMAE, MMAF; l'altro inibisce efficacemente l'assemblaggio dei microtubuli, inducendo l'arresto mitotico cellulare, come il derivato della maitansina DM1, DM4. Gli inibitori dei microtubuli sono i payload più maturi attualmente utilizzati, con una tossicità molto più forte rispetto ai farmaci chemioterapici tradizionali, ma hanno anche alcuni problemi, come il fatto che gli inibitori dei microtubuli possono uccidere solo le cellule tumorali nella fase di divisione cellulare e sono inefficaci contro le cellule tumorali non in divisione e statiche, e sono più inclini alla resistenza ai farmaci. Gli inibitori del DNA che agiscono sull'intero ciclo cellulare non solo hanno un effetto letale sulle cellule tumorali non in divisione, ma uccidono anche le cellule tumorali resistenti ai classici inibitori dei microtubuli. Come terza generazione di payload, gli inibitori del DNA possono distruggere la struttura e la funzione del DNA attraverso rotture del doppio filamento, alchilazione, intercalazione, cross-linking e inibizione della topoisomerasi I (TOPO1), promuovendo la morte delle cellule tumorali.
Tra i 14 farmaci ADC approvati, ci sono 6 farmaci ADC con payload MMAE o MMAF, che rappresentano quasi il 50%. Ci sono anche più di 80 pipeline in fase di ricerca con MMAE come payload, rendendo la dolastatina il payload più comunemente utilizzato.
Tabella 1: Classificazione comune del carico citotossico
| Obiettivo dell'azione | Meccanismo | Classificazione |
| Microtubulo | Inibitore dei microtubuli | Dolastatina: MMAE, MMAF |
| Derivato della Maytansina: DM1, DM4 | ||
| Solubilizzatore dei microtubuli | ||
| Tossina della spugna morbida: Halichondrin | ||
| Il DNA | Danni al DNA | Calicheamicina |
| PBD | ||
| Duocarmicina | ||
| Inibitore della topoisomerasi I | Camptotecina: DN38, Dxd |
Componenti del farmaco ADC e metodi di analisi corrispondenti
Gli ADC hanno sia macromolecole che piccole molecole, che richiedono una varietà di metodi e piattaforme bioanalitiche per analizzare la diversità degli ADC. I tradizionali metodi di analisi delle piccole molecole LC-MS/MS sono comunemente usati per analizzare il carico utile non coniugato e la distribuzione del DAR (rapporto farmaco-anticorpo, che rappresenta il numero di molecole di carico utile legate a ciascun anticorpo ed è un attributo importante dell'ADC) nel tempo, mentre l'analisi del legame del ligando (LBA) e la LC-MS/MS possono essere entrambe usate per l'analisi dell'anticorpo totale (TAb) e dell'ADC totale. Gli anticorpi anti-carico utile svolgono un ruolo importante nell'analisi dell'immunogenicità degli ADC.
Applicazioni degli anticorpi anti-payload
- Analisi farmacocinetica (PK) dei farmaci ADC nel plasma/siero
- Determinazione dell'affinità di legame del farmaco
- Analisi del valore DAR
- Valutazione dell'efficacia dei farmaci ADC
Vantaggi del prodotto anticorpo anti-carico utile
- Elevata purezza: purezza verificata tramite SDS-PAGE e HPLC, >95%
- Alta affinità: verificato da ELISA e altri metodi di rilevamento dell'attività, con elevata attività
- Elevata specificità: riconosce specificamente il bersaglio
- Supporto tecnico professionale: supporto tecnico professionale per rispondere tempestivamente alle domande pre-vendita e post-vendita
| N. di cat. | Nome | Misurare |
| 31901ES | 100μg/1mg | |
| 31902ES | 100μg/1mg | |
| 31903ES | 100μg/1mg | |
| 31904ES | 100μg/1mg | |
| 31905ES | 100μg/1mg |
Riferimenti:
[1] Cindy H., Patricia S., William D..Coniugati anticorpo-farmaco per il cancro[J]. Lancet 2019, 394:793-804