I macrofagi sono una cellula importante nel sistema immunitario e svolgono una serie di ruoli nei tessuti, tra cui l'eliminazione dei patogeni, la riparazione dei tessuti e l'immunomodulazione. L'attivazione o la disfunzione anomala dei macrofagi in determinate condizioni patologiche, come l'infiammazione cronica, le malattie autoimmuni o lo sviluppo di tumori, può influire negativamente sull'organismo. I liposomi di clodronato sono una classe di farmaci o composti che impoveriscono o rimuovono specificamente i macrofagi. I liposomi di clodronato sono lo strumento di rimozione dei macrofagi più maturo, conveniente ed economico disponibile oggi e possono rimuovere efficacemente i macrofagi da una varietà di tessuti e siti negli animali, tra cui fegato, milza, polmoni e sangue, e sono il metodo di rimozione dei macrofagi più ampiamente utilizzato oggi.
Approcci di diverse organizzazioni (solo a scopo informativo)
Organo/Macrofago | Dosaggio (20-25g/topo) |
Splen/Macrofagi della polpa rossa | Dose singola: 200 µl/topo (EV o IP). |
Cellule del fegato/Kuffer | Dose singola: 200 µl/topo (EV o IP). |
Macrofagi polmonari/alveolari | I risultati migliori si ottengono con la somministrazione endovenosa (150-200 µl) combinata con quella intratracheale o intranasale (50 µl). |
linfonodo linfatico | Iniezione (100-200 µl)/topo, in letteratura si possono trovare regimi di dosaggio specifici. |
Cervello/microglia | Ingresso intracerebroventricolare nel liquido cerebrospinale, 10 µl/topo, 50 µl/ratto. |
Sangue/Monociti | 150-200 µl/topo (IV), la velocità massima di deplezione viene raggiunta entro 24 ore, ma la velocità massima di deplezione a 1-7 giorni dipende dal ceppo. |
Domande frequenti
D1: Cosa devo fare dopo aver ricevuto i liposomi di clodronato?
R: Dopo aver ricevuto i liposomi di Clodronato, se non puoi utilizzarli immediatamente, devi metterli in frigorifero a 4℃. Il congelamento è vietato! Utilizzare come soluzione madre, non è consentita alcuna diluizione. I liposomi sono sensibili alla precipitazione, quindi si consiglia di mescolarli delicatamente prima dell'uso. Inoltre, i liposomi di clorofosfato a 4℃ non possono essere utilizzati immediatamente e devono essere riportati a temperatura ambiente prima dell'iniezione.
D2: Come posso trasferire i liposomi dalla fiala?
R: Il modo migliore per trasferire i liposomi dalla fiala è usare una siringa con ago sterile. In questo modo la sospensione di liposomi rimanente nella fiala rimarrà sigillata e pulita. Puoi anche usare una pipetta con una punta sterile per il trasferimento, ma è meglio farlo in un ambiente pulito, come in una cappa BSC.
D3: I liposomi di clodronato possono essere utilizzati per la clearance dei macrofagi in vitro?
R: Il prodotto può essere utilizzato per la clearance dei macrofagi in vitro, ma questo metodo è più adatto per gli esperimenti in vivo. Il motivo principale è che durante la coltura in vitro, il clorofosfato rilasciato dalle cellule morte o "fuoriuscito" dai liposomi rimane nel mezzo di coltura, ma in vivo, il clorofosfato ha un'emivita molto breve e viene rapidamente eliminato dai reni. Sebbene l'acido clorofosforico libero non entri nelle cellule o nei liposomi, una volta accumulato nel mezzo di coltura, entra lentamente nelle cellule.
D4: Qual è il motivo per cui gli animali muoiono subito dopo l'iniezione endovenosa di liposomi di clodronato?
R: Da un lato è possibile che all'animale sia stata iniettata una sospensione di liposomi non omogenea. Si consiglia di agitare delicatamente per mescolare prima dell'uso. I liposomi si depositeranno dopo un periodo di tempo in vitro. Se è necessario iniettare più di un animale alla volta per un lungo periodo di tempo, i liposomi si depositeranno nella siringa e formeranno una sospensione non omogenea, per cui la misurazione della prima iniezione cambierà significativamente rispetto alla misurazione dell'ultima iniezione. D'altro canto è possibile che i liposomi siano appena stati rimossi dal frigorifero e non siano tornati a temperatura ambiente.
D5: Quanti giorni dopo l'iniezione di liposomi di clodronato è morto l'animale?
R: Ciò potrebbe essere dovuto a contaminazione batterica. La rimozione dei macrofagi dal corpo aumenta la possibilità di infezione da, ad esempio, particelle virali, batteri o lieviti.
D6: I liposomi di clodronato non hanno l'effetto desiderato?
R: I liposomi di clodronato vengono prodotti in grandi lotti e ogni lotto viene testato per la concentrazione di clodronato e per un certo numero di possibili contaminanti per garantire che sia corretta prima di essere venduta ai clienti. Inoltre, i liposomi sono sensibili alle temperature estreme. Il modo corretto per trasportarli e conservarli è 4~8°C. Le sospensioni non devono essere congelate né riscaldate oltre i 30°C. Devono essere utilizzate entro 3 mesi dal momento della ricezione della spedizione, altrimenti l'effetto dell'uso potrebbe essere influenzato.
D7: Quando si effettua un'iniezione endovenosa, è possibile aumentare il volume iniettato?
A: L'iniezione endovenosa deve essere basata sul peso corporeo dell'animale e non deve superare 0,1 mL/10 mg, ma per l'iniezione intraperitoneale, il volume di iniezione può essere aumentato in modo appropriato. L'iniezione sottocutanea deve essere decisa in base al volume del sito di iniezione.
D8: A cosa bisogna prestare attenzione quando si utilizzano i liposomi?
R: I liposomi preparati da lipidi con catene idrocarburiche sature sono in realtà molto resistenti, ma è opportuno adottare le seguenti precauzioni.
①Non mescolare con solventi organici, quali cloroformio, metanolo, etanolo, DMSO, etere, ecc.
② Non aggiungere tensioattivi a meno che non sia necessario farlo per scindere i liposomi.
③ Non riscaldare a temperature vicine o superiori alla temperatura di transizione di fase principale dei lipidi, a meno che non si stia eseguendo il caricamento del farmaco, che richiede un'incubazione al di sopra della temperatura di transizione di fase.
Raccomandazione del prodotto
Nome del prodotto | Numero dell'articolo | Specificazione |
40337ES08 | 5 ml | |
40337ES10 | 10 ml | |
40338ES08 | 5 ml | |
40338ES10 | 10 ml |