I macrofagi sono una cellula importante nel sistema immunitario e svolgono una serie di ruoli nei tessuti, tra cui l'eliminazione dei patogeni, la riparazione dei tessuti e l'immunomodulazione. L'attivazione o la disfunzione anomala dei macrofagi in determinate condizioni patologiche, come l'infiammazione cronica, le malattie autoimmuni o lo sviluppo di tumori, può influire negativamente sull'organismo. I liposomi di clodronato sono una classe di farmaci o composti che impoveriscono o rimuovono specificamente i macrofagi. I liposomi di clodronato sono lo strumento di rimozione dei macrofagi più maturo, conveniente ed economico disponibile oggi e possono rimuovere efficacemente i macrofagi da una varietà di tessuti e siti negli animali, tra cui fegato, milza, polmoni e sangue, e sono il metodo di rimozione dei macrofagi più ampiamente utilizzato oggi.

Approcci di diverse organizzazioni (solo a scopo informativo)

Organo/Macrofago

Dosaggio (20-25g/topo)

Splen/Macrofagi della polpa rossa

Dose singola: 200 µl/topo (EV o IP).
Deplezione a lungo termine: prima dose di 200 µl/topo, poi 200 µl/topo a intervalli di 2-3 giorni

Cellule del fegato/Kuffer

Dose singola: 200 µl/topo (EV o IP).
Deplezione a lungo termine: prima dose di 200 µl/topo, poi 200 µl/topo a intervalli di 2-3 giorni

Macrofagi polmonari/alveolari

I risultati migliori si ottengono con la somministrazione endovenosa (150-200 µl) combinata con quella intratracheale o intranasale (50 µl).

linfonodo linfatico

Iniezione (100-200 µl)/topo, in letteratura si possono trovare regimi di dosaggio specifici.

Cervello/microglia

Ingresso intracerebroventricolare nel liquido cerebrospinale, 10 µl/topo, 50 µl/ratto.

Sangue/Monociti

150-200 µl/topo (IV), la velocità massima di deplezione viene raggiunta entro 24 ore, ma la velocità massima di deplezione a 1-7 giorni dipende dal ceppo.

Domande frequenti

D1: Cosa devo fare dopo aver ricevuto i liposomi di clodronato?

R: Dopo aver ricevuto i liposomi di Clodronato, se non puoi utilizzarli immediatamente, devi metterli in frigorifero a 4℃. Il congelamento è vietato! Utilizzare come soluzione madre, non è consentita alcuna diluizione. I liposomi sono sensibili alla precipitazione, quindi si consiglia di mescolarli delicatamente prima dell'uso. Inoltre, i liposomi di clorofosfato a 4℃ non possono essere utilizzati immediatamente e devono essere riportati a temperatura ambiente prima dell'iniezione.

D2: Come posso trasferire i liposomi dalla fiala?

R: Il modo migliore per trasferire i liposomi dalla fiala è usare una siringa con ago sterile. In questo modo la sospensione di liposomi rimanente nella fiala rimarrà sigillata e pulita. Puoi anche usare una pipetta con una punta sterile per il trasferimento, ma è meglio farlo in un ambiente pulito, come in una cappa BSC.

D3: I liposomi di clodronato possono essere utilizzati per la clearance dei macrofagi in vitro?

R: Il prodotto può essere utilizzato per la clearance dei macrofagi in vitro, ma questo metodo è più adatto per gli esperimenti in vivo. Il motivo principale è che durante la coltura in vitro, il clorofosfato rilasciato dalle cellule morte o "fuoriuscito" dai liposomi rimane nel mezzo di coltura, ma in vivo, il clorofosfato ha un'emivita molto breve e viene rapidamente eliminato dai reni. Sebbene l'acido clorofosforico libero non entri nelle cellule o nei liposomi, una volta accumulato nel mezzo di coltura, entra lentamente nelle cellule.

D4: Qual è il motivo per cui gli animali muoiono subito dopo l'iniezione endovenosa di liposomi di clodronato?

R: Da un lato è possibile che all'animale sia stata iniettata una sospensione di liposomi non omogenea. Si consiglia di agitare delicatamente per mescolare prima dell'uso. I liposomi si depositeranno dopo un periodo di tempo in vitro. Se è necessario iniettare più di un animale alla volta per un lungo periodo di tempo, i liposomi si depositeranno nella siringa e formeranno una sospensione non omogenea, per cui la misurazione della prima iniezione cambierà significativamente rispetto alla misurazione dell'ultima iniezione. D'altro canto è possibile che i liposomi siano appena stati rimossi dal frigorifero e non siano tornati a temperatura ambiente.

D5: Quanti giorni dopo l'iniezione di liposomi di clodronato è morto l'animale?

R: Ciò potrebbe essere dovuto a contaminazione batterica. La rimozione dei macrofagi dal corpo aumenta la possibilità di infezione da, ad esempio, particelle virali, batteri o lieviti.

D6: I liposomi di clodronato non hanno l'effetto desiderato?

R: I liposomi di clodronato vengono prodotti in grandi lotti e ogni lotto viene testato per la concentrazione di clodronato e per un certo numero di possibili contaminanti per garantire che sia corretta prima di essere venduta ai clienti. Inoltre, i liposomi sono sensibili alle temperature estreme. Il modo corretto per trasportarli e conservarli è 4~8°C. Le sospensioni non devono essere congelate né riscaldate oltre i 30°C. Devono essere utilizzate entro 3 mesi dal momento della ricezione della spedizione, altrimenti l'effetto dell'uso potrebbe essere influenzato.

D7: Quando si effettua un'iniezione endovenosa, è possibile aumentare il volume iniettato?

A: L'iniezione endovenosa deve essere basata sul peso corporeo dell'animale e non deve superare 0,1 mL/10 mg, ma per l'iniezione intraperitoneale, il volume di iniezione può essere aumentato in modo appropriato. L'iniezione sottocutanea deve essere decisa in base al volume del sito di iniezione.

D8: A cosa bisogna prestare attenzione quando si utilizzano i liposomi?

R: I liposomi preparati da lipidi con catene idrocarburiche sature sono in realtà molto resistenti, ma è opportuno adottare le seguenti precauzioni.

①Non mescolare con solventi organici, quali cloroformio, metanolo, etanolo, DMSO, etere, ecc.

② Non aggiungere tensioattivi a meno che non sia necessario farlo per scindere i liposomi.

③ Non riscaldare a temperature vicine o superiori alla temperatura di transizione di fase principale dei lipidi, a meno che non si stia eseguendo il caricamento del farmaco, che richiede un'incubazione al di sopra della temperatura di transizione di fase.

Raccomandazione del prodotto

Nome del prodotto

Numero dell'articolo

Specificazione

Liposomi di clodronato (dalla Vrije Universiteit Amsterdam)

40337ES08

5 ml

40337ES10

10 ml

Liposomi di controllo (PBS)

40338ES08

5 ml

40338ES10

10 ml

Indagine