I macrofagi svolgono ruoli unici e critici in diverse parti del corpo, tuttavia, la rimozione precisa dei macrofagi è diventata uno strumento di ricerca fondamentale per studiare meglio le funzioni specifiche dei macrofagi in aree specifiche e il loro impatto sullo sviluppo delle malattie. I liposomi di clodronato sono uno degli strumenti più collaudati, convenienti e ideali per la rimozione dei macrofagi. I liposomi di clodronato possono essere somministrati per via intraperitoneale, nella vena della coda e in vari altri modi per rimuovere i macrofagi da diversi tessuti.
Di seguito condivideremo una serie di argomenti per dimostrare i metodi e l'efficacia della rimozione dei macrofagi in diversi siti, nella speranza di fornire riferimenti utili e spunti per i ricercatori.
Introduzione dei metodi di iniezione
Iniezione nella vena della coda
L'iniezione nella vena della coda raggiunge la massima deplezione dopo 24 ore. Occorre prestare attenzione al momento del rilevamento.
1、Metti i topi in una scatola per il pranzo capovolta, tira fuori la coda dall'orifizio, ce ne sono due arterie e tre vene nella coda dei topi, due le arterie si trovano nella parte dorsale e ventrale della coda e le tre le vene sono distribuite a zigzag, generalmente vengono utilizzati i lati sinistro e destro delle vene;
2. Immergere la garza in acqua calda a circa 70°C (o immergerla nell'alcool), estrarla e avvolgere la coda, per raggiungere lo scopo di vasodilatazione della coda e ammorbidire la cheratina epidermica;
3. Per l'iniezione endovenosa nella coda, con il pollice e l'indice sinistri prima e dopo aver tenuto premuta la coda del ratto, lasciando una sezione di circa 2 cm, in modo che la pelle sia tesa e le vene siano più piene, la mano destra tiene una siringa con ago da 1 ml, in modo che l'ago e la vena siano paralleli (angolo inferiore a 30°), dal quarto inferiore della coda all'ago, l'inizio dell'iniezione del farmaco deve essere lento, attenta osservazione, se non c'è resistenza, non sono comparsi dermatomi bianchi, significa che i vasi sanguigni sono stati perforati e possono essere Iniezione formale di farmaci.
4、Alcuni esperimenti richiedono ripetute iniezioni nella vena della coda per diversi giorni, il sito di iniezione dovrebbe iniziare dall'estremità della coda il più lontano possibile e spostarsi alla radice della coda in sequenza e cambiare la posizione vascolare per l'iniezione. Dopo aver rimosso l'ago, premere il sito di iniezione con un batuffolo di cotone per 1 - 2 minuti per fermare l'emorragia.
Iniezione intraperitoneale
L'iniezione intraperitoneale raggiunge la massima deplezione dopo 48 - 72 h. Bisogna prestare attenzione al rilevamento dei punti temporali.
1. Per prima cosa, utilizzare il metodo di presa dorsale per catturare i topi, in modo che la loro testa sia leggermente inclinata all'indietro e il loro addome sia rivolto verso l'alto, l'arto posteriore sinistro dei topi viene fissato con il mignolo, quindi il sito di iniezione viene sterilizzato con un batuffolo di cotone imbevuto di alcol al 75%.
2. La posizione dell'iniezione intraperitoneale nei topi è 0,5 cm su entrambi i lati della linea mediana del basso addome (a filo con la radice della coscia). Per evitare lesioni agli organi, la testa del topo deve essere inclinata all'indietro quando si tira fuori il topo, in modo da far muovere gli organi del basso addome verso l'alto.
3、Inserire l'ago della siringa nella pelle, entrare nell'area sottocutanea, spingere l'ago in avanti lungo l'area sottocutanea per 2 - 3 mm, e poi perforare la cavità addominale del topo con un angolo di 45 gradi tra l'ago e la pelle. Nota: dopo aver penetrato il peritoneo, la resistenza della punta dell'ago scompare.
4. Ritirare l'ago; se non c'è ritorno di sangue o liquido, il farmaco può essere iniettato.
5. Dopo l'iniezione, ruotare delicatamente l'ago, quindi estrarre lentamente la siringa per evitare perdite di liquido.
Saranno inoltre disponibili diversi metodi di iniezione per diversi siti di studio, come: iniezione sottocutanea, somministrazione tracheale, iniezione intracranica e così via. Dovresti fare riferimento alla letteratura pertinente e consultare il team tecnico di Yeasen prima della sperimentazione.
Ciclo di dosaggio e dosaggio
Somministrazione a breve termine: una singola iniezione di liposomi clorofosfati 200 µL (20 - 25 g di peso) in un momento specifico per rilevare l'efficienza della clearance dei macrofagi o per esperimenti a valle.
Somministrazione a lungo termine: è necessaria più di una settimana o più per ottenere la clearance dei macrofagi. Nei topi WT, ad esempio, 200 µL (20 - 25 g di peso) viene solitamente somministrata come prima dose, seguita da 200 µL ogni 2 - 3 giorni.
Protocollo di prova di riferimento
| Organo/Macrofago | Dosaggio (20-25g/topo) |
| Splen/Macrofagi della polpa rossa | Dose singola: 200 µL/topo (EV o IP). |
| Cellule del fegato/Kuffer | Dose singola: 200 µL/topo (EV o IP). |
| Macrofagi polmonari/alveolari | I risultati migliori si ottengono con la somministrazione endovenosa (150-200 µL) combinata con quella intratracheale o intranasale (50 µL). |
| linfonodo linfatico | Iniezione (100-200 µL)/topo, in letteratura si possono trovare regimi di dosaggio specifici. |
| Cervello/microglia | Ingresso intracerebroventricolare nel liquido cerebrospinale, 10 µL/topo, 50 µL/ratto. |
| Sangue/Monociti | 150-200 µL/topo (IV), la velocità massima di deplezione viene raggiunta entro 24 ore, ma la velocità massima di deplezione tra 1 e 7 giorni dipende dal ceppo. |
Nota: quanto sopra è solo a scopo di riferimento, fare riferimento alla letteratura pertinente e consultare il team tecnico di Yeasen prima di procedere alla sperimentazione.
Raccomandazione del prodotto
| Nome del prodotto | Numero dell'articolo | Specificazione |
| 40337ES08 | 5 ml | |
| 40337ES10 | 10 ml | |
| 40338ES08 | 5 ml | |
| 40338ES10 | 10 ml |