L'acido nucleico funge da fondamento di tutta la ricerca di biologia molecolare. Inoltre, la qualità dell'acido nucleico estratto è anche uno dei fattori chiave che determinano il successo o il fallimento degli esperimenti a valle. Quando si sviluppano reagenti per l'estrazione di acidi nucleici, oltre ai componenti chimici convenzionali, alcuni acidi nucleici o enzimi a piccole molecole possono migliorare notevolmente l'efficienza di estrazione o rimuovere l'interferenza di sostanze non target e diventare componenti importanti nell'estrazione di acidi nucleici.
Sulle sostanze ausiliarie per la precipitazione degli acidi nucleici
RNA vettore
- Concetto e funzione di RNA vettore
Carrier RNA, noto anche come aiuto alla precipitazione degli acidi nucleici in cinese. Nel processo di estrazione degli acidi nucleici, le provette da centrifuga utilizzate per l'estrazione sono per lo più realizzate in polipropilene. C'è elettricità statica sulla parete della provetta, che adsorbirà gli acidi nucleici. L'utilizzo di Carrier RNA nel processo di estrazione e purificazione può aiutare gli acidi nucleici a rimuovere l'effetto elettrostatico, garantire che gli acidi nucleici possano essere ben adsorbiti sulla colonna di purificazione, migliorare l'efficienza di eluizione e quindi ottenere il recupero di acidi nucleici nel campione il più possibile.
- Tipi comuni di RNA trasportatore
Come sostanza ausiliaria per la precipitazione degli acidi nucleici, l'RNA vettore è disponibile in diversi tipi, come il sale di potassio PolyA, l'RNA totale di E. coli, l'RNA totale di lievito, il tRNA, ecc.
- Problemi comuni nell'uso di RNA vettore
L'RNA vettore può essere ancora utilizzato dopo essere stato tenuto a temperatura ambiente per un certo periodo di tempo? La degradazione dell'RNA vettore ne influenza l'utilizzo? L'RNA vettore influisce sugli esperimenti a valle?
Il Carrier RNA è disciolto in un protettore di RNA. Il Carrier RNA liquido ha un impatto minimo se posto a 37°C o a temperatura ambiente per un breve periodo (entro 7 giorni). In sostanza, il Carrier RNA è un frammento nell'intervallo da 500 nt a 1000 nt. Una leggera degradazione non influisce sul normale utilizzo. Per applicazioni downstream come la PCR quantitativa fluorescente, il Carrier RNA non ha alcun effetto sul valore Ct. Per applicazioni downstream come NGS, può essere aggiunto in base alle effettive esigenze.
- Introduzione al prodotto RNA vettore
Il Carrier RNA di Yeasen è RNA derivato dal lievito. Non vi sono enzimi DNasi o RNasi residui e il contenuto residuo di proteine e DNA è estremamente basso. Può essere utilizzato in esperimenti quali l'estrazione di acidi nucleici virali e l'estrazione di tracce di DNA. Gli acidi nucleici estratti possono essere utilizzati in esperimenti successivi quali RT-PCR e RT-qPCR. Il prodotto è disponibile in formulazioni liquide e in polvere liofilizzata per un comodo uso diretto, trasporto a lunga distanza e conservazione.
Nome del prodotto | Prodotto Numero | Specificazione | Condizioni di conservazione e durata di conservazione |
RNA vettore, 6 μg/μL | 19701ES | 1 ml / 5 ml / 100 ml | Conservare a una temperatura compresa tra -25 e -15 °C. La durata di conservazione è di 2 anni. |
Polvere di RNA vettore, 216 μg/provetta | 19703ES | 1 tubo / 100 tubi / 1000 tubi | Conservare a temperatura ambiente. La durata di conservazione è di 2 anni. |
19704ES | 1 tubo / 100 tubi / 1000 tubi | Conservare a temperatura ambiente. La durata di conservazione è di 2 anni. |
Soluzione di acrilammide lineare
- Concetto e funzione della soluzione lineare di acrilammide
L'acrilamide lineare, nota anche come Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide, abbreviato in LPA), è un coprecipitante che aiuta a precipitare gli acidi nucleici durante il processo di purificazione degli acidi nucleici.
- Caratteristiche della soluzione lineare di acrilammide
È un vettore neutro e di origine non biologica. Pertanto, non contiene potenziale contaminazione da acidi nucleici o nucleasi.
Non interferirà con le letture A260/A280 e non inibirà le attività della polimerasi e dell'endonucleasi di restrizione.
È compatibile con altre successive applicazioni di biologia molecolare come la PCR e la digestione enzimatica.
Può aiutare a precipitare DNA e RNA a livello di picogrammi o superiore (incluso Oligo). La lunghezza del frammento recuperabile è superiore a 20 nucleotidi e sono applicabili sia acidi nucleici a singolo filamento che a doppio filamento.
- Introduzione al prodotto
Nome del prodotto | Prodotto Numero | Specificazione | Condizioni di conservazione e durata di conservazione |
Soluzione di acrilammide lineare (5 mg/mL) | 10408ES | 1 ml | Conservato a 4 °C. La durata di conservazione è di 3 anni. |
Enzima ausiliario per l'estrazione degli acidi nucleici
RNasi A
- Concetto e funzione della RNasi A
La ribonucleasi A (RNasi A), come endoribonucleasi, degrada specificamente i residui di citosina (C) o uracile (U) su RNA a singolo filamento. L'applicazione più comune della ribonucleasi A (RNasi A) è la rimozione di RNA durante la preparazione di DNA plasmidico o DNA genomico. Inoltre, questo prodotto può essere utilizzato anche in esperimenti di biologia molecolare come saggi di protezione RNasi e analisi di sequenza RNA.
- Caratteristiche della RNasi A
La RNasi A deriva dal pancreas bovino. Non c'è contaminazione di endo- ed esonucleasi deossiribonucleasi. Può essere utilizzata direttamente senza preriscaldamento ed è resistente ad ambienti ad alta temperatura.
- Introduzione al prodotto
Nome del prodotto | Prodotto Numero | Specificazione | Condizioni di conservazione e durata di conservazione |
RNasi A (100 mg/mL) | 10406ES | 1 ml | Conservare a -20°C. La durata di conservazione è di 2 anni. |
RNasi A (10 mg/mL) | 10405ES | 1 ml | Conservare a temperatura ambiente.La durata di conservazione è 1 anni. |
10407ES | 100 mg/1 g | Conservare a temperatura ambiente. La durata di conservazione è di 2 anni. |
Desossiribonucleasi I (DNasi I)
La desossiribonucleasi I (DNasi I), un'endonucleasi presente in varie cellule e tessuti, prende di mira e scinde il legame fosfodiesterico adiacente alle pirimidine, producendo polinucleotidi con un gruppo fosfato all'estremità 5' e un gruppo idrossile all'estremità 3'. Il prodotto medio di digestione minima è un polimero tetranucleotidico. La DNasi può catalizzare varie forme di DNA, come il DNA a singolo filamento, il DNA a doppio filamento e persino la cromatina (la cui velocità di scissione è influenzata dagli istoni). Negli esperimenti di biologia molecolare, viene spesso utilizzata per rimuovere il DNA dalle proteine o per introdurre tagli nel DNA per inserire basi marcate nel DNA.
2. Caratteristiche della DNasi I
L'intervallo di lavoro ottimale della DNasi I è pH 7-8 e la sua attività dipende da Ca2+ e può essere attivato da ioni metallici bivalenti come Co2+, Minnesota2+, Zinco2+, ecc. 5 mM Ca2+ può proteggere l'enzima dall'essere idrolizzato. In presenza di Mg2+, questo enzima può riconoscere e tagliare casualmente qualsiasi sito su entrambi i filamenti di DNA; mentre in presenza di Mn2+, può riconoscere entrambi i filamenti di DNA simultaneamente e tagliarli quasi nello stesso punto.
3. Introduzione al prodotto
Nome del prodotto | Prodotto Numero | Specificazione | Condizioni di conservazione e durata di conservazione |
Desossiribonucleasi I (DNasi I) dal pancreas bovino | 10607ES | 15 KU/10×15KU | Conservare a -20°C. La durata di conservazione è di 2 anni. |
Desossiribonucleasi I (DNasi I) dal pancreas bovino | 10608ES | 25 mg/100 mg/1 g | Conservare a -20°C. La durata di conservazione è di 2 anni. |
Proteinasi K
1.Concetto e funzione della proteinasi K
La proteinasi K (Proteinasi K) è una serina proteasi con un'ampia gamma di attività di scissione. Il suo peso molecolare relativo è di circa 29,3 kDa e può scindere i legami peptidici carbossi-terminali di amminoacidi alifatici e amminoacidi aromatici. La proteinasi K ha un'ampia gamma di applicazioni e può essere utilizzata in esperimenti come la preparazione di DNA cromosomico per elettroforesi su gel a campo pulsato, Western blotting e rimozione di nucleasi in preparazioni di DNA e RNA. Agenti denaturanti come SDS (1%) possono aumentarne l'attività.
2. Caratteristiche della proteinasi K
Derivato da un ceppo di lievito geneticamente ricombinante.
Privo di RNasi e DNasi.
Attivo e stabile in urea e SDS.
Attivo in un ampio intervallo di pH (pH 4,0 - 12,0); l'intervallo di pH ottimale è pH 7,5 - 9,0.
Nome del prodotto | Prodotto Numero | Specificazione | Condizioni di conservazione e durata di conservazione |
10401ES | 100 mg/1 g/5 g/100 g | Conservato a 4°C. La durata di conservazione è di 3 anni. | |
Soluzione di proteinasi K (20 mg/mL) | 10412ES | 1 ml/10 ml/25 ml/500 ml | Conservare a 4°C. La durata di conservazione è di 2 anni. |
Soluzione di proteinasi K (20 mg/mL) | 10410ES | 1 ml/10 ml/25 ml/500 ml | Conservare a 4°C. La durata di conservazione è di 2 anni. |
Stabilizzatore dell'RNA
Soluzione stabilizzante dell'RNA per tessuti animali e vegetali
1. Funzione della soluzione stabilizzatrice dell'RNA per tessuti animali e vegetali
Le RNasi sono ampiamente presenti nell'ambiente e hanno molte probabilità di degradare l'RNA in campioni appena raccolti di tessuti animali e vegetali, sangue, fluidi corporei, ecc. Lo stabilizzatore tissutale RNAsafe per tessuti animali e vegetali (RNAsafe Tissue Stabilizer) è sviluppato appositamente per stabilizzare e proteggere l'RNA nei campioni raccolti. Come soluzione non tossica, può penetrare rapidamente nei tessuti e inattivare le RNasi endogene.
2. Caratteristiche della soluzione stabilizzatrice dell'RNA per tessuti animali e vegetali
Estremamente facile da usare: basta tagliare i tessuti freschi in blocchi di tessuto di dimensioni adeguate (≤0,5 cm) e immergerli in un volume di RNAsafe da 5 a 10 volte superiore.
Lungo periodo di stabilizzazione: i tessuti/le cellule infiltrati con RNAsafe possono essere conservati a 37°C per 1 giorno, a temperatura ambiente per 1 settimana, a 4°C per 4 settimane e, per la conservazione a lungo termine, a -20°C/-80°C.
Ampia compatibilità a valle: è compatibile con quasi tutti i metodi di isolamento dell'RNA, come HieffTM Total RNA Extraction Reagent (numero di catalogo: 10606ES60) e con quasi tutti i kit di estrazione dell'RNA in commercio, tra cui il metodo di estrazione con colonna centrifuga e il metodo di purificazione con microsfere magnetiche.
Ampia applicazione dei materiali: può essere utilizzato per la conservazione di vari tessuti animali e vegetali (come cervello, cuore, fegato, pancreas, reni, milza, testicoli, muscoli, steli e foglie di piante, ecc.) e anche per lieviti, cellule di coltura tissutale, ecc.
3. Introduzione al prodotto
Nome del prodotto | Prodotto Numero | Specificazione | Condizioni di conservazione e durata di conservazione |
Stabilizzatore tissutale RNAsafe RNAsafe | 10604ES60 | 100 ml | Conservare a temperatura ambiente. La durata di conservazione è di 5 anni. |
Prodotti correlati
Nome del prodotto | Prodotto Numero | Specificazione | Condizioni di conservazione e durata di conservazione |
Lisozima | 10402ES | 5/50 G | Conservato a -20°C. La durata di conservazione è di 3 anni. |
Liticasi (10 U/μL) | 10403ES | 1500/3000/10000 unità | Conservato presso Temperatura: -20°C. |
Lumaca | 10404ES | 5/10 G | Conservare a 2-8°C. La durata di conservazione è di 2 anni. |
RNA sicuro-ICE | 10605ES | 100 ml | Conservare a temperatura ambiente. La durata di conservazione è di 2 anni. |