Introduzione agli anticorpi Tag
Gli anticorpi tag vengono utilizzati per il rilevamento e la purificazione di sequenze tag su vari vettori di espressione commerciali per analizzare e determinare i livelli di espressione e le funzioni delle proteine target. Il principio alla base del loro utilizzo è la reazione antigene-anticorpo, in cui questi anticorpi tag possono legarsi specificamente alle corrispondenti proteine fuse con tag. Ecco un breve elenco di alcuni comuni tag proteici adatti all'uso con anticorpi tag:
Tabella 1. Introduzione ai diversi tag proteici
| Etichetta | Sequenza | Caratteristiche | Scenari applicabili |
| Bandiera | DYKDDDDK | 1. Piccolo peso molecolare, non modifica la funzione della proteina di fusione, più idrofilo di tag simili; 2. Contiene il sito di riconoscimento dell'enterochinasi (DDDDK), utile per la rimozione del tag quando fuso all'N-terminale della proteina bersaglio. | Adatto per la purificazione e il rilevamento di proteine di fusione a basso livello di espressione nei sistemi di espressione eucariotici. |
| AH | YPYDVPDYA | Derivato dal determinante dell'antigene di superficie dell'emoagglutinina del virus dell'influenza; evitare l'uso in esperimenti correlati alle cellule apoptotiche. | Adatto per la purificazione e il rilevamento delle proteine. |
| Il mio | Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu | Derivato dal proto-oncogene umano Myc; evitare l'uso in esperimenti su cellule umane. | Generalmente non utilizzato per la purificazione delle proteine, adatto per il rilevamento. |
I prodotti di purificazione dell'affinità degli anticorpi tag Yeasen sono realizzati con anticorpi monoclonali IgG di topo di alta qualità come materie prime. Attraverso un processo chiamato "accoppiamento covalente", questi anticorpi sono accoppiati in modo direzionale ed efficiente a matrici di agarosio o alle superfici di perle nanomagnetiche. Ciò non solo riduce il legame proteico non specifico, ma ottiene anche un carico di anticorpi più elevato sul mezzo. Inoltre, fornisce prodotti di purificazione degli anticorpi tag adatti a vari requisiti di purificazione, tra cui diverse resine di purificazione degli anticorpi tag e perle immunomagnetiche, facilitando la purificazione delle proteine taggate e gli esperimenti di immunoprecipitazione utilizzando metodi manuali o automatizzati.
Guida alla selezione del prodotto per la purificazione degli anticorpi Yeasen Tag
| Serie di prodotti | Serie di resine di purificazione | Serie di perle immunomagnetiche | |||||
| Numero di prodotto | 20584ES | 20586ES | 20587ES | 20565ES | 20566ES | 20567ES | 20564ES |
| Nome del prodotto | Perline anti-HA MagBeads | Anti-MycMagBeads | |||||
| Ligandi | Anticorpi monoclonali IgG di topo di alta qualità | Anticorpi monoclonali anti-GFP/Flag/HA/Myc di topo di alta qualità | |||||
| Capacità di legame proteico | ≥1,1 mg di proteina di fusione con flag/mL di gel ≥1,5 mg di proteina di fusione marcata con HA/mL di gel ≥0,9 mg di proteina di fusione marcata con Myc/mL di gel | ≥0,8 mg di proteina di fusione marcata con GFP/mg perline ≥0,6 mg di proteina di fusione con tag Flag/mg di perle ≥0,4 mg di proteina di fusione marcata con HA/mg di perle ≥0,5 mg di proteina di fusione marcata Myc/mg perline
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| Matrice | Gel di agarosio reticolato al 4% | Perline magnetiche a base di silice | |||||
| Dimensione delle particelle | Diametro interno: 45-165 micron | 200 nm | |||||
| Vantaggi | Basso legame non specifico, alta capacità | Elevata purezza, elevata capacità, elevata specificità, comodo utilizzo con rack magnetico | |||||
| Applicazioni consigliate | Purificazione di affinità di proteine di fusione marcate a qualsiasi scala, immunoprecipitazione (IP) | Immunoprecipitazione (IP), Co-immunoprecipitazione (COIP) | |||||
Dati di prova
1.Test di confronto della purificazione tra Yeasen Anti-Flag Affinity Gel (20584ES) e Brand S*.
Figura 1. Yeasen (a) contro il marchio S* (b) Immagine del gel di confronto anti-bandiera
M: marcatore proteico; 1: lisato pre-colonna delle proteine Flag-N, M, C; 2: permeato post-colonna delle proteine Flag-N, M, C; 3: eluizione (eluizione a pH 2,7); 4: eluizione (eluizione a pH 12)
2. Le frecce nella figura sottostante indicano le proteine target marcate e le tre bande dall'alto verso il basso dopo l'ebollizione diretta delle sfere magnetiche sono BSA, catena pesante dell'anticorpo e catena leggera dell'anticorpo.
Figura 2. Anti-Flag MagBeads Purificazione delle proteine contrassegnate con bandiera
1: Lisato di E. coli contenente proteina contrassegnata con Flag 10 μL; 2: Supernatante dopo incubazione del lisato di E. coli contenente proteina contrassegnata con Flag con sfere magnetiche 10 μL; 3: Ebollizione diretta della proteina contrassegnata con Flag con Anti-Flag MagBeads 10 μL; 4: Ebollizione diretta di Anti-Flag MagBeads; 5: Marcatore
3.
Figura 3. Purificazione delle proteine marcate con GFP con Anti-GFP MagBeads
1: Lisato di E. coli contenente proteina marcata con GFP 10 μL; 2: Supernatante dopo incubazione del lisato di E. coli contenente proteina marcata con GFP con sfere magnetiche 10 μL; 3: Ebollizione diretta della proteina marcata con GFP con Anti-GFP MagBeads 10 μL; 4: Ebollizione diretta di Anti-GFP MagBeads; 5: Marcatore
Informazioni sul prodotto
| Nome del prodotto | Numero di prodotto | Specificazione |
| 20584ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20586ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20587ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20565ES03/08 | 1 ml/5 ml. | |
| Perline anti-HA MagBeads | 20566ES03/08 | 1 ml/5 ml. |
| Anti-Myc MagBeads | 20567ES03/08 | 1 ml/5 ml. |
| 20564ES03/08 | 1 ml/5 ml. |