Descrizione del prodotto

2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (con colorante) è una soluzione premiscelata 2× pronta all'uso contenente Hieff Canace™ Più DNA polimerasi ad alta fedeltà, dNTP e un sistema tampone ottimizzato. Il mix include due anticorpi monoclonali che inibiscono l'attività della polimerasi e l'attività esonucleasica 3'→5' a temperatura ambiente, consentendo una PCR Hot Start altamente specifica. L'aggiunta di fattori di allungamento consente l'amplificazione di frammenti lunghi, con frammenti target fino a 13 kb. Questo enzima esibisce attività DNA polimerasi 5'→3' e attività esonucleasica 3'→5', con una fedeltà 83 volte quella della Taq DNA polimerasi e 9 volte quella della normale Pfu DNA polimerasi. È adatto per l'amplificazione di modelli complessi, producendo prodotti PCR a estremità smussata.

2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (con colorante) offre vantaggi quali semplicità, elevata sensibilità, forte specificità ed eccellente stabilità. Il sistema di reazione richiede solo l'aggiunta di primer e template, e un protocollo PCR in due fasi può essere utilizzato per semplificare la procedura e risparmiare tempo. Il prodotto include colorante di tracciamento dell'elettroforesi, che consente il caricamento diretto dei prodotti PCR per l'analisi del gel. Inoltre, contiene uno speciale agente protettivo che assicura un'attività stabile anche dopo ripetuti cicli di congelamento-scongelamento.

Specifiche

Magazzinaggio

Questo prodotto deve essere conservato a -25~-15℃ per 1 anni.

Istruzioni

1. Sistemi di reazione PCR consigliati.

*La concentrazione finale 1× della miscela contiene 1 U/50 μL di polimerasi, 2 mmol/L Mg²⁺e 200 μmol/L dNTP.

**La concentrazione finale raccomandata dei primer nella reazione PCR è 0,2-1 μmol/L, con 0,4 μmol/L preferito.

***Quantità di modello consigliate per un sistema di reazione da 25 μL:

2. Programma di reazione.

1)Protocollo in due fasi (preferito):

2)Protocollo in tre fasi (convenzionale):

*Denaturazione iniziale: consigliata a 98°C per 3 min (5-10 min per modelli ad alto GC).

**Ricottura: consigliata a 60°C per 20 sec (regolabile tra 10 e 30 sec). Una ricottura prolungata può causare sbavature sui gel.

***Estensione: consigliata a 72°C per 30 sec/kb (fino a 60 sec/kb per modelli complessi).

3)Protocollo di ricottura a gradiente (consigliato per obiettivi difficili):

4)Caratteristiche dei diversi protocolli PCR:

Appunti

1.Questo prodotto è destinato esclusivamente alla ricerca.

2. Si prega di operare con camici da laboratorio e guanti monouso,per la tua sicurezza.